李樹博

（遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧沈陽 110164）

牛病毒性腹瀉病毒分子生物學特性及流行病學研究進展

李樹博

（遼寧省動物疫病預防控制中心，遼寧沈陽 110164）

牛病毒性腹瀉病毒屬于黃病毒科的瘟病毒屬，是一組由單鏈RNA病毒組成的瘟病毒，與羊邊界病病毒、豬瘟病毒在血清學上能夠產(chǎn)生交叉反應，并能夠突破宿主特異性交叉感染。本文介紹了牛病毒性腹瀉病毒的分子生物學特性、國內(nèi)外流行情況及對牛以外動物的感染情況。為牛病毒性腹瀉的綜合防控提供理論依據(jù)。

牛病毒性腹瀉；分子生物學；流行病學；研究進展

牛病毒性腹瀉是1946年在紐約州由Olafson等首先發(fā)現(xiàn)并報道的。牛病毒性腹瀉（BVD）是指以消化道潰瘍和下痢為特征的牛傳染性疾病。此病最早發(fā)生于美國紐約州的艾薩卡鎮(zhèn)，當時被認為是冬季痢疾，緊接在其他鄰近的牛群暴發(fā)。發(fā)病奶牛的產(chǎn)奶量減少，有些懷孕母牛在感染后10～90d內(nèi)發(fā)生流產(chǎn)，還有些牛出現(xiàn)肺炎癥狀。由于此病典型的臨床癥狀是腹瀉，故稱為牛病毒性腹瀉（BVD），病原即稱為牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）。

1 牛病毒性腹瀉病毒的分子生物學特性

根據(jù)毒株在培養(yǎng)的上皮細胞上的繁殖活性將BVDV分為兩種生物型：非致細胞病變型（Noncytopathicbiotype，NCP）和致細胞病變型（Cytopathicbiotype，CP），兩種生物型的血清型相同，但與宿主細胞作用不同，尤其在粘膜病致病機制方面。非細胞致病變型和細胞病變型毒株都可在細胞培養(yǎng)中合成一個分子量為125ku的非結(jié)構(gòu)蛋白NS2/3。在細胞致病變型毒株中，NS2/3蛋白被裂解為兩個單獨的病毒蛋白：NS2、NS3蛋白。通常，NS3蛋白的產(chǎn)生于嵌入到病毒基因組的細胞基因序列有關(guān)。Meyers等研究發(fā)現(xiàn)，在病毒基因序列的氨基酸1535或1589為嵌入了子羧基端包含氨基酸的細胞基因序列。這兩個位置分別指的是A和B位置。位置B是NS2/3前體蛋白上裂解出游離NS3氨基端的切割位點，故一般認為B位置上細胞基因序列的嵌入導致了NS2/3的解體。嵌入到致細胞病變型BVDV1的絕大多數(shù)描述都是在B位置上。也就發(fā)現(xiàn)細胞RNA的插入使NCP型BVDV的基因發(fā)生重組，轉(zhuǎn)化為CP型BVDV。在細胞培養(yǎng)過程中，NCP型BVDV沒有發(fā)生明顯的細胞病變，因此認為這種生物在體內(nèi)不能引起持續(xù)感染，因此它們通常被作為BVDV弱毒疫苗首選的生物型。

自然界中，絕大多數(shù)BVDV分離株是非致細胞病變型。在野生環(huán)境下，致細胞病變型BVDV毒株一般分離與爆發(fā)的黏膜病或免疫后疾病暴發(fā)的病例。目前研究報道的所有高毒力BVDV毒株都是非致細胞病變型。簡而言之，從養(yǎng)牛業(yè)的管理角度來說，確定一個BVDV毒株的基因型通常比確定其生物型更為重要。

2 國外牛病毒性腹瀉流行狀況

BVDV呈全球性分布，各養(yǎng)牛業(yè)發(fā)達國家均有流行，如今該病已成為美國牛場中主要傳染病之一。據(jù)統(tǒng)計每年全世界死于該病毒感染的牛不少于500萬頭。據(jù)2005年的數(shù)據(jù)統(tǒng)計結(jié)果顯示：加拿大部分地區(qū)血清陽性率高達82% ～84%、美國50%、南美6國為84.9%、澳大利亞89%、法國76%、英格蘭和威爾士54%～74%、印度17.31%。從地域上看，一般來說歐洲的國家具有高流行率，但又不能一概而論，因為個別的歐洲國家（如挪威、芬蘭、奧地利）的流行率非常低。值得注意的是，北美洲的非免疫牛群中盡管攜帶抗BVDV抗體的牛流行率很高，但持續(xù)性感染牛的流行率卻較低。對歐洲多國中分離得到的BVDV1株進行系統(tǒng)進化樹分析，表明在不同地區(qū)流行的BVDV1亞基因型病毒也有所不同。至今為止，在美國和加拿大流行的是BVDV1a和BVDV1b，從比利時分離出的28株BVDV毒株中，只有一株是BVDV1a，其他的都是BVDV1b或BVDV2基因型；而從澳大利亞分離出的300多株BVDV1亞基因型分離株中，近90%為BVDV1c亞基因型；在印度主要流行BVDV-1b。BVDV-2主要是在北美分離得到的。據(jù)報道，牛的BVD-MD抗體陽性率在50%以上，大約有70%的2歲以上的牛BVD-MD抗體陽性，0.5%～1%的牛是持續(xù)感染牛，由于養(yǎng)牛業(yè)的集約化，國內(nèi)牛的頻繁交換以及牛進口數(shù)量的增加促進了BVDV的傳播。

3 我國牛病毒性腹瀉流行情況

近年來，許多學者從一些疫苗中分離出了該病毒，這說明污染疫苗的大范圍使用也對該病的傳播起到了促進作用。鑒于該病的嚴重性及其進而產(chǎn)生的的相應后果，OIE已經(jīng)將其列為國際貿(mào)易中優(yōu)先檢驗的疾病之一，國際獸醫(yī)局也將其規(guī)定為B類傳染病，我國現(xiàn)階段也將該病列為牛羊疫病三類法定傳染病。該病對規(guī)?；B(yǎng)牛業(yè)造成了巨大經(jīng)濟損失，由于養(yǎng)牛業(yè)的集約化，國內(nèi)牛的頻繁交換以及牛進口數(shù)量的增加促進了BVDV的傳播。有人估計在英國每年由于BVDV造成的損失可達4700萬英鎊（魏偉，2009）。我國從進口牛當中也發(fā)現(xiàn)有較高的血清陽性率，并多次分離到病毒，所以認為BVDV-MD是牛的具有重大經(jīng)濟意義的疾病之一，也是進口檢疫中應重點防范的疾病之一。

我國牛病毒性腹瀉血清流行病學調(diào)查結(jié)果表明，該病在我國流行范圍較廣且陽性率較高。牛病毒性腹瀉在我國西北、西南、華北、東北等地區(qū)流行，流行程度呈上升趨勢（蔣穎，2007）。我國自1980年在吉林省首次發(fā)現(xiàn)并分離到BVDV以來，至少已在15個省市自治區(qū)檢測出BVDV抗體或分離到病毒，其中某些地區(qū)感染嚴重。在我國，王新平等（1995）利用雙抗體夾心ELISA方法從感染畜糞便中檢測到BVDV抗原。檢測結(jié)果表明，我國牛、羊群的病毒陽性率相當高，分別達到16.5%～89.0%和14.6%～83.3%。邱昌慶等（1998）對山東、河北和河南等省份的牛場進行了BVDV血清學調(diào)查，結(jié)果顯示抗體平均陽性率為46%～65%，其中山東省BVDV抗體陽性檢出率為5.1%～77.2%，平均為59.6%，幾乎為1990年的檢出率29%的兩倍。高雙娣等（1999）對中國西部五?。▍^(qū)）部分地區(qū)黃牛、牦牛進行BVDV血清學調(diào)查發(fā)現(xiàn)，黃牛中抗體平均陽性率高達46.15%。邱昌慶等（2000）對安徽、江蘇、廣西部分地區(qū)水牛進行了該病的血清學檢測，血清平均陽性率分別為24.7%、8.4%和10.0%。楊得勝等在對福建省規(guī)?；龊蜕B(yǎng)戶的牛進行的流行病學調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，2006、2007和2008年，規(guī)?；雠２《拘愿篂a病的血清學陽性率分別為92.4%、96.5%和80%；散養(yǎng)戶牛BVDV的血清學陽性率分別為12.3%、21.4%和18.5%。金愛華等（2008）從上海市奉賢區(qū)14個奶牛場的每個場分別隨機采10份血樣（其中一個牛場采8份），共138份奶牛血樣，并對其進行檢測。分離血清后進行ELISA檢測，結(jié)果顯示該區(qū)14家奶牛場中BVDV抗體平均陽性率為34.06%，其中有4個奶牛場的BVDV抗體陽性率較高，為50%以上，并且有一個牛場牛病毒性腹瀉血清抗體陽性率達100%，說明個別場牛病毒性腹瀉的感染情況較為嚴重。另外，根據(jù)其他一些學者的檢測報告顯示，目前BVDV2型在我國流行比較普遍。

相信隨著對此病的了解和不斷加深，對其重視程度也會不斷提高。因次，有效地控制BVDV在牛群中及牛場（特別是集約化的大型養(yǎng)牛場）中或其間的傳播，已成為廣大獸醫(yī)工作者及管理機構(gòu)的艱巨任務(wù)。

4 牛病毒性腹瀉病毒感染其他動物

家養(yǎng)和野生的反芻獸及豬是本病的自然宿主。其他家養(yǎng)或野生的有蹄動物也可以成為易感牛的BVDV潛在傳染源。最早報道豬感染BVDV是在1973年。Fernelius等從自然感染發(fā)病豬體內(nèi)分離到牛病毒性腹瀉病毒,首次在病原學上證明牛病毒性腹瀉病毒可以自然感染豬，但豬作為BVDV傳染源傳播給易感牛的觀點至今未得到承認（趙月蘭等，2006）。1991年，Carlsson等報道了類似于綿羊邊界病的疾病的暴發(fā)，最后證實此暴發(fā)是由于BVDV持續(xù)性感染牛導致的BVDV傳播而引起的。血清學和病毒分離的結(jié)果顯示，北美和歐洲的鹿可以感染BVDV，2001年，Van Campen等在懷俄明州的母騾鹿體內(nèi)分離到BVDV1a毒株，但被BVDV持續(xù)性感染的鹿還未得到證實。我國王新平等（1995）首次證實國內(nèi)的鹿也有高達19.6%～44.4%的BVDV帶毒率，采用ELISA對吉林某地區(qū)馬鹿、育成馬鹿、育成梅花鹿進行BVDV感染率檢測，結(jié)果顯示馬鹿帶毒率為44.4%，育成馬鹿帶毒率為19.6%，育成梅花鹿的帶毒率為34.1%，并首次由疑似“豬瘟”的病豬體內(nèi)分離到BVDV。宋永峰等（2006）用套式PCR檢測從遼寧、安徽、江西、浙江、湖南、廣西等地采集的43份豬病科中牛病毒性腹瀉的流行情況，陽性率為16.3%。這說明，目前豬群中感染BVDV情況比較嚴重，但目前中國對豬群中BVDV感染情況的重視程度還不高，在這方面的研究較少。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．05.003

李樹博（1985～），黑龍江省齊齊哈爾市人，碩士，獸醫(yī)師，研究方向：動物疫病防治和生物安全實驗室管理