薛成軍，陳治水，袁 蓉，崔麗娟，王勇軍，張杰克

2種檢測系統(tǒng)心肌酶譜結(jié)果的比對分析與臨床可接受性評價

薛成軍，陳治水，袁 蓉，崔麗娟，王勇軍，張杰克

目的：探討2種生化檢測系統(tǒng)心肌酶譜檢測結(jié)果的可比性，為同一實驗室檢驗結(jié)果的互認提供依據(jù)。方法：參考美國臨床實驗室標準化協(xié)會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）的EP9-A2文件，每天選取臨床標本10份，分別用西門子ADVIA1800和強生Victro350 2種生化檢測系統(tǒng)測定天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）。以西門子ADVIA1800為目標檢測系統(tǒng)，以強生Victro350為實驗檢測系統(tǒng)，對檢測結(jié)果進行相關性分析和臨床可接受性評價。結(jié)果：西門子ADVIA1800和強生Victro350 2種檢測系統(tǒng)的精密度均較高（變異系數(shù)（coefficient of variance，CV）≤1/3CLIA′88允許誤差）。通過t檢驗，西門子ADVIA1800和強生Victro350 2種檢測系統(tǒng)的心肌酶譜檢測結(jié)果差異有顯著統(tǒng)計學意義（P＜0.01），但2種檢測系統(tǒng)的相關系數(shù)（r）均大于0.975，具有顯著相關性。在與西門子ADVIA1800的比對中，強生Victro350檢測AST、LDH、CK和CK-MB的誤差分別為4.0%～6.6%、11.2%～12.7%、9.6%和13.3%，AST、CK和CK-MB在臨床可接受水平內(nèi)，但是LDH超出臨床可接受的范圍。結(jié)論：當同一實驗室用2種檢測系統(tǒng)檢測同一檢驗項目時，應進行方法比對和臨床可接受性評價，以確保結(jié)果的準確性和一致性。

比對試驗；心肌酶譜；臨床可接受性評價

0 引言

心肌酶譜檢測作為臨床急診檢測項目對患者病情的診斷具有重要意義。常規(guī)心肌酶譜檢測項目包括天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌酸激酶（CK）和乳酸脫氫酶（LDH）4項。目前，臨床醫(yī)生經(jīng)常對同一患者采取定時多次檢測心肌酶譜的方式推斷急性心肌梗死患者的心梗時間及預后情況。因此，相同臨床實驗室內(nèi)不同檢測儀器之間心肌酶譜檢測結(jié)果的準確性和一致性有著更為現(xiàn)實的意義。同時，ISO/IEC 17025《檢驗和校準實驗室能力的通用要求》和ISO 15189《醫(yī)學實驗室質(zhì)量和能力的專用要求》都對檢驗結(jié)果的可比性提出了明確要求，并強調(diào)方法比對是實現(xiàn)準確度溯源和患者標本檢驗結(jié)果可比性的重要途徑[1]。

本院檢驗科先后購買了西門子ADVIA1800生化分析儀和強生Victro350干式生化分析儀。由于2種檢測系統(tǒng)檢測原理不同，項目的正常參考范圍也存在差異，因此為了了解2種生化檢測系統(tǒng)檢測結(jié)果的一致性，本實驗室參考美國臨床實驗室標準化協(xié)會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）的EP9-A2文件，對上述2種檢測系統(tǒng)心肌酶譜項目的檢測結(jié)果進行比對試驗，并進行臨床可接受性評價，為實現(xiàn)不同檢測系統(tǒng)間檢測結(jié)果的可比性提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 檢測系統(tǒng)的組成

根據(jù)實驗室使用的試劑、儀器的不同分為2個檢測系統(tǒng)：檢測系統(tǒng)1——西門子ADVIA1800生化分析儀，原裝配套試劑；檢測系統(tǒng)2——強生Victro 350干生化分析儀，原裝配套試劑。質(zhì)控品和校準品均選用Randox公司的產(chǎn)品。

1.1.2 盲樣制備

收集無脂血、溶血的新鮮血清標本若干份，用于制備成不同濃度的混合血清，共10份，分裝于清潔試管內(nèi)。所選血清標本應包括正常和異常水平，檢測項目濃度分布越寬越好。同時，選用Randox同一批號的正常與異常2種水平的質(zhì)控血清，按操作說明書要求復溶，分裝于清潔試管內(nèi)。

1.2 方法

因西門子ADVIA1800生化分析儀以及與之配套的西門子原裝試劑，參加河南省臨檢中心室間質(zhì)評成績合格，心肌酶譜室內(nèi)質(zhì)控日間的變異系數(shù)（coef ficient of variance，CV）均小于1/3CLIA′88室間質(zhì)評允許誤差，因此以其（檢測系統(tǒng)1）作為目標檢測系統(tǒng)；以強生Victro350干式生化分析儀（檢測系統(tǒng)2）為實驗檢測系統(tǒng)。檢測項目包括AST、LDH、CK、CKMB共4項。實驗進行前，按照實驗室標準操作程序?qū)z測儀器進行常規(guī)維護、保養(yǎng)、校準和質(zhì)控，使儀器處于最佳狀態(tài)[2]。室內(nèi)質(zhì)控在控時方可進行盲樣測定。以上實驗樣品置于當天常規(guī)工作中進行測定，每個項目的檢測嚴格按廠商試劑盒的說明書進行，血清標本測定順序為1～10和10～1，取其均值，不連續(xù)重復5 d。相同檢測項目在不同檢測系統(tǒng)上檢測時間間隔控制在30 min內(nèi)。質(zhì)控標本連續(xù)測定30 d。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 17.0軟件，對2種檢測系統(tǒng)的測定結(jié)果進行處理和統(tǒng)計學分析。根據(jù)EP9-A2文件中的要求進行不同方法間離群值檢查。

1.3.1 檢測系統(tǒng)1測定范圍的檢驗

如r≥0.975（或r2≥0.95），則可認為檢測系統(tǒng)（測定值以X表示）取值范圍符合要求，直線回歸統(tǒng)計的截距和斜率可靠；反之，則需要采用部分個別差異法計算檢測結(jié)果的平均偏差。

1.3.2 線性回歸方程式中，Y表示由檢測系統(tǒng)2測定的數(shù)值，X表示由檢測系統(tǒng)1測定的數(shù)值。

1.3.3 計算2種方法間的系統(tǒng)誤差

根據(jù)臨床應用要求，將各個檢測項目給定的醫(yī)學決定水平濃度（Xc、Yc）分別代入上述回歸方程，計算檢測系統(tǒng)1與檢測系統(tǒng)2之間的系統(tǒng)誤差：

1.3.4 臨床可接受性評價

以CLIA′88對室間質(zhì)量評定的允許誤差為判斷依據(jù)，由不同檢測系統(tǒng)測得的誤差（SE%）不大于允許誤差的1/2，屬于臨床可接受水平[3]，即2種檢測系統(tǒng)間的測定結(jié)果具有可比性。

2 結(jié)果

2.1 2種檢測系統(tǒng)檢測AST、LDH、CK和CK-MB的評價

根據(jù)西門子ADVIA1800和強生Victro350 2種檢測系統(tǒng)連續(xù)檢測Randox正常質(zhì)控品和異常質(zhì)控品的結(jié)果，計算各檢測系統(tǒng)的變異系數(shù)，用來評價不同檢測系統(tǒng)對AST、LDH、CK和CK-MB 4個項目檢測的精密度和穩(wěn)定性。

2.1.1 精密度（批內(nèi)變異）結(jié)果

2種檢測系統(tǒng)檢測AST、LDH、CK和CK-MB的批內(nèi)CV范圍分別為0.62%～2.86%、0.78%～2.34%、1.08%～2.97%和1.83%～3.26%，均顯著低于1/3 CLIA′88的允許誤差（分別為6.7%、6.7%、10.0%和10.0%），即符合臨床要求。

2.1.2 穩(wěn)定性（日間變異）結(jié)果

2種檢測系統(tǒng)檢測AST、LDH、CK和CK-MB的批內(nèi)CV范圍分別為0.81%～2.92%、0.87%～2.97%、2.02%～3.71%和1.58%～3.74%，均明顯低于1/3CLIA′88的允許誤差（同上），符合臨床要求。

2.2 2種檢測系統(tǒng)檢測AST、LDH、CK和CK-MB的結(jié)果比較

檢測結(jié)果經(jīng)t檢驗，ADVIA1800與Victro350檢測系統(tǒng)間心肌酶譜檢測結(jié)果的差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01），見表1。

表1 2種檢測系統(tǒng)心肌酶譜檢測結(jié)果比較 U/L

2.3 檢測系統(tǒng)心肌酶譜檢測結(jié)果的相關性分析

以ADVIA1800作為目標檢測系統(tǒng)，與 Victro350進行相關與回歸分析，具體結(jié)果見表2。2種檢測系統(tǒng)間的相關系數(shù)（r）均大于0.975，說明線性回歸曲線的斜率和截距可靠。

表2 ADVIA1800（X）與Victro350（Y）的回歸方程和相關系數(shù)（r）

2.4 檢測系統(tǒng)可接受性的評價

以ADVIA1800（X）作為目標檢測系統(tǒng)，將心肌酶譜不同檢測項目的醫(yī)學決定水平濃度（Xc）代入各自對應的回歸方程，根據(jù)計算結(jié)果判斷Victro350（Y）的臨床可接受性，具體結(jié)果見表3。AST、LDH、CK和 CK-MB的1/2 CLIA′88室間評估允許誤差分別為10%、10%、15%和15%。

表3 2種檢測系統(tǒng)心肌酶譜測定結(jié)果的臨床可接受性能評價

3 討論

近年來，隨著檢驗醫(yī)學的快速發(fā)展和儀器自動化程度的提高，各種生化檢測系統(tǒng)相繼推出，并不斷更新?lián)Q代。部分醫(yī)院檢驗科也根據(jù)自身工作的需要，引進不同的生化檢測系統(tǒng)。雖然各種生化檢測系統(tǒng)一般均能滿足臨床需要，但不同實驗室相同檢測系統(tǒng)或相同實驗室內(nèi)的不同檢測系統(tǒng)對同一標本同一項目的檢測結(jié)果也可能存在很大的差異。本實驗室根據(jù)臨床需要引進了2臺型號不同的生化檢測系統(tǒng)。這2種檢測系統(tǒng)間由于檢測方法、反應杯體積、試劑、反應介質(zhì)、加樣方式以及光路等系統(tǒng)配置存在差別，會導致部分項目測定結(jié)果差異很大[4]，如不能及時解決，必將給臨床的診斷、治療帶來很多困難和不便。如何做到使同一實驗室不同檢測系統(tǒng)結(jié)果具有可比性或一致性，已成為臨床醫(yī)學檢驗實驗室標準化和規(guī)范化必須解決的問題，也是醫(yī)學實驗室認可標準ISO/ 15189的必備要求。

本研究對2種不同的生化檢測系統(tǒng)心肌酶譜檢測結(jié)果分別進行比對分析，有助于實驗室向臨床提供可靠的檢驗結(jié)果。心肌酶作為酶蛋白的組成部分，其自身的生物學特性及其在酶促反應中對反應條件要求的特殊性，使不同檢測方法酶的催化活性差異很大[5]。這2種生化檢測系統(tǒng)根據(jù)檢測原理分為濕式生化儀（西門子ADVIA1800）和干式生化儀（強生Victro350）。濕式生化反應，即普通意義的化學反應方式，在儀器反應杯中加入試劑和待檢標本，混合后發(fā)生反應；而干式生化反應則是采用多層薄膜的固相試劑技術，只需要將待檢標本直接加到固相載體上，以標本中的水為溶劑，使已在載體上固化的反應試劑溶解后，再與標本中對應的待檢物質(zhì)反應，從而達到進行分析測定的目的。雖然2種檢測系統(tǒng)的反應原理有很大差異，但是本研究通過對Randox正常質(zhì)控品和異常質(zhì)控品分別進行批內(nèi)檢測和日間檢測，發(fā)現(xiàn)在AST、CK、CK-MB和LDH 4個項目的檢測中都表現(xiàn)出很好的精密度和穩(wěn)定性。經(jīng)統(tǒng)計學分析，AST、CK、CK-MB和LDH在2種生化檢測系統(tǒng)上的檢測結(jié)果的誤差值均明顯低于1/3CLIA′88允許誤差，符合臨床檢驗的質(zhì)量要求，這也是實驗室檢驗結(jié)果具有良好重復性的基礎。

雖然西門子ADVIA1800和強生Victro350本身具有很好的精密度和穩(wěn)定性，但是將2種檢測系統(tǒng)AST、LDH、CK和CK-MB的檢測結(jié)果分別進行比較研究時發(fā)現(xiàn)，2種檢測系統(tǒng)對上述4個心肌酶譜項目的檢測結(jié)果均有明顯差異（P＜0.01）。這可能是由于干式生化與濕式生化的反應條件差別很大，且檢測原理本質(zhì)不同造成的，與文獻報道相一致[6]。相關與回歸分析顯示，2種檢測系統(tǒng)檢測AST、LDH、CK和CK-MB結(jié)果的相關系數(shù)（r）均大于0.975，說明目標檢測方法（檢測系統(tǒng)1）的結(jié)果分布范圍合適，可以利用回歸統(tǒng)計的方法分析實驗檢測系統(tǒng)與目標檢測系統(tǒng)之間的系統(tǒng)誤差[7]。強生Victro350檢測系統(tǒng)AST、CK和CK-MB檢測的系統(tǒng)誤差均低于1/2CLIA′88室間評估允許誤差，皆在臨床可接受范圍內(nèi)，可以滿足臨床需要；而LDH檢測結(jié)果的系統(tǒng)誤差大于1/2CLIA′88室間評估允許誤差，超出臨床可接受范圍，不具有可比性。針對同一實驗室內(nèi)同一檢測項目在不同檢測系統(tǒng)中的結(jié)果不具有可比性的情況，實驗室應該分別制訂自身的正常值范圍，也可以用相關回歸方程進行換算得出可比性結(jié)果[8-9]。

綜上所述，雖然西門子ADVIA1800和強生Victro350檢測原理存在明顯差異，但是作為單獨的檢測系統(tǒng)對心肌酶譜的檢測具都有很好的精密度和穩(wěn)定性。同時，AST、CK和CK-MB在2種檢測系統(tǒng)中的檢測結(jié)果都具有可比性，但是LDH的檢測結(jié)果超出臨床可接受范圍。因此，對于同一實驗室中2種以上檢測系統(tǒng)檢測同一檢驗項目，應進行方法學比對和臨床可接受性評價，而且在平時檢驗工作中應該嚴格遵守室內(nèi)質(zhì)量控制制度，為檢驗結(jié)果的可靠性提供依據(jù)，使之更好地服務于臨床[10-11]?？傊?，同一實驗室內(nèi)不同檢測系統(tǒng)的比對試驗對實驗室檢驗結(jié)果的準確性和一致性有著重要的意義。

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（收稿：2014-11-15 修回：2015-04-25）

Comparison and clinical acceptability estimation of myocardial enzyme spectrum detection results by two systems

XUE Cheng-jun,CHEN Zhi-shui,YUAN Rong,CUI Li-juan,WANG Yong-jun,ZHANG Jie-ke
（Department of Clinical Laboratory,The 91st Hospital of the PLA,Jiaozuo 454003,Henan Province,China）

ObjectiveTo study the comparability of myocardial enzyme spectrum detection results by two different biochemical testing systems to provide references for mutual accredit of detection results in one lab.MethodsFollowing NCCLS document EP9-A2,8 clinical specimens were selected every day for five days and tested for AST,LDH,CK and CK-MB respectively with Siemens ADVIA1800 and Johnson＆Johnson Victro350 systems.Acknowledging Siemens ADVIA1800 as objective testing system,the results were utilized to make correlation analysis and clinical acceptability estimation.ResultsThere was high precision in Siemens ADVIA1800 and Johnson＆Johnson Victro350 (CV≤1/3CLIA′88 allowable error).It's proved by t test that the difference of the myocardial enzyme results tested with Siemens ADVIA1800 and Johnson Victro350 was statistically significant(P＜0.01),while the two testing systems showed significant correlation (r＞0.975).In the comparison with the Siemens ADVIA1800,the standard errors (SE%)of AST,CK and CK-MB tested with Johnson Victro350 were 4.0%-6.6%,9.6%and 13.3%,which were accepted by clinical standard;while the SE%of LDH tested with Johnson Victro350 were 11.2%-12.7%,which were beyond clinically acceptable range.ConclusionIn case one item is tested by different testing systems in one laboratory,the comparison and bias estimation acceptable evaluationare necessary to judge the clinical acceptability,which can ensure the accuracy and consistency of the results.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（9）：90-92，154]

comparative test;myocardial enzyme spectrum;clinical acceptability estimation

R318；R446.1

A

1003-8868（2015）09-0090-04

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.09.090

薛成軍（1982—），男，主管技師，主要從事臨床實驗室質(zhì)量管理方面的研究工作，E-mail：xuecjun@sina.com。

454003河南焦作，解放軍91醫(yī)院檢驗科（薛成軍，陳治水，袁蓉，崔麗娟，王勇軍，張杰克）