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        應(yīng)用藥物動力學(xué)原理分析規(guī)模豬場后備母豬豬瘟間接血凝抗體消長動態(tài)

        2015-12-27 12:25:37徐慶安韓永剛李成虎
        豬業(yè)科學(xué) 2015年3期

        徐慶安,韓永剛,劉 浩,李成虎

        (1.漢中市漢臺區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,陜西 漢中 723000;2.漢中市漢臺區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,陜西 漢中 723000;3.陜西省動物衛(wèi)生監(jiān)督所,陜西 710014)

        應(yīng)用藥物動力學(xué)原理分析規(guī)模豬場后備母豬豬瘟間接血凝抗體消長動態(tài)

        徐慶安1,韓永剛2*,劉 浩3,李成虎2

        (1.漢中市漢臺區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,陜西 漢中 723000;2.漢中市漢臺區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,陜西 漢中 723000;3.陜西省動物衛(wèi)生監(jiān)督所,陜西 710014)

        漢中市A、B兩豬場各提供32~35日齡的35頭后備母豬作為豬瘟抗體檢查供試豬,分別注射豬瘟疫苗后按試驗設(shè)計的規(guī)定時間采集血清樣品259份,依照農(nóng)業(yè)部指定的豬瘟正向間接血凝試驗方法,檢測豬瘟抗體效價并詳細記錄。運用藥物動力學(xué)中的殘數(shù)法分析模豬場后備母豬豬瘟間接血凝抗體消長動態(tài),求算出A、B兩豬場后備母豬豬瘟抗體(效價)消長動態(tài)參數(shù)ka、k、t1/2(a)和t1/2分別是0.077 17/d 、0.006 99/d、8.978 d、99.14 d及0.071 34/d、0.008 186 8/d、9.714 d、84.65 d。通過比較2豬場的數(shù)據(jù),發(fā)現(xiàn)B豬場的疫病防控效果與A豬場相比存在一定差距,需要進一步加強和改進。

        后備母豬;豬瘟抗體;代謝動力學(xué);研究

        豬瘟是由豬瘟病毒引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病,被國際獸醫(yī)局(OIE)列為A類傳染病,我國也將該病列為一類傳染病[1]。由于豬瘟在豬病防控中的重要性和基礎(chǔ)性地位,建立后備母豬豬瘟間接血凝抗體消長動態(tài)模型,并以該數(shù)學(xué)模型參數(shù)作為考查豬場日常疫病防控狀況的重要指標(biāo),具有一定的參考意義和實用價值。殘數(shù)法是代謝動力學(xué)中把一條曲線分解成若干指數(shù)成分的一種常用方法,該法又稱羽毛法、削去法或剩余法等。在單室或雙室模型中應(yīng)用均較普遍。凡是血藥濃度(或抗體效價)曲線由多項指數(shù)式表示時,均可用殘數(shù)法逐個求出各指數(shù)項的參數(shù)[2]。為了在生產(chǎn)中對A、B兩豬場的疫病防控效果進行評估,筆者運用了殘數(shù)法對規(guī)模豬場后備母豬豬瘟抗體(效價)消長動態(tài)進行了研究。

        1 材料和方法

        1.1 試驗材料

        1.1.1 試驗豬

        由漢中市A、B兩豬場提供,選擇兩場32~35日齡的后備母豬各35頭作為豬瘟抗體檢查供試豬。

        1.1.2 疫苗

        供試豬使用的豬瘟疫苗均為政府采購的豬瘟脾淋苗,由四川華派生物制品廠生產(chǎn),批準(zhǔn)文號為(2011)270021001,批號為:20120706,規(guī)格為20頭份/瓶,每頭份脾淋苗的組織毒不少于0.01 g。按說明書用生理鹽水稀釋后,每頭供試豬注射2頭份。

        1.1.3 診斷試劑

        豬瘟正向間接血凝試驗診斷抗原購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所,抗原批號:20121025;陽性血清20120902;陰性血清2012090;稀釋液20121007。

        1.2 試驗方法

        1.2.1 豬瘟抗體監(jiān)測

        采集免疫當(dāng)日及免疫后7、14、21、28、60、90、120、150及180 d供試豬血液,分離血清置冰箱-15 ℃以下保存?zhèn)溆谩?/p>

        1.2.2 血清學(xué)試驗

        采用正向間接血凝試驗進行后備母豬豬瘟抗體檢測。將待檢血清置常溫下解凍搖勻后,每樣取50μL,按農(nóng)業(yè)部豬瘟正向血凝試驗操作規(guī)程進行試驗檢測。

        表1 后備母豬豬瘟抗體檢測數(shù)值

        1.2.3 結(jié)果判定

        按照農(nóng)業(yè)部和陜西省豬瘟免疫計劃判定標(biāo)準(zhǔn)進行判定:豬瘟正向間接血凝試驗抗體效價大于等于5 log 2(1∶32)判定為合格。群體豬抗體合格率大于等于70%判定為合格。

        2 檢測結(jié)果與分析

        2.1 后備母豬豬瘟抗體檢測結(jié)果

        70頭供試豬豬瘟抗體滴度均可檢出,介于3 log 2~11 log 2之間。詳細檢測結(jié)果見表1。所有豬只注射疫苗后抗體均呈現(xiàn)不同程度上升,且群體免疫合格率大于70%,符合農(nóng)業(yè)部規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)。說明使用的豬瘟疫苗質(zhì)量穩(wěn)定,均能使后備母豬在免疫后一段時期內(nèi)對豬瘟產(chǎn)生免疫力。

        圖1 A豬場 抗體效價對數(shù)—免疫后時間圖

        圖2 B豬場 抗體效價對數(shù)—免疫后時間圖

        2.2 豬瘟抗體代謝動力學(xué)分析

        2.2.1 A豬場豬瘟抗體代謝動力學(xué)分析

        供試后備母豬采集血樣259份。

        在此我們結(jié)合單室模型血管外給藥途徑分析如下,其中以抗體效價代替血藥濃度。單室模型血管外給藥途徑血藥濃度(抗體效價)曲線的多項指數(shù)表達式為:

        其中C表示抗體效價,ka代表抗體效價上升常數(shù),k代表抗體效價消除常數(shù);若ka遠大于k,當(dāng)t充分大時,則e-kat首先趨向于零,則上式簡化為:

        此式描述抗體效價--時間曲線的生成后相(即此時抗體生成很少),兩端取對數(shù),得:

        以抗體效價對數(shù)對時間作圖得二項指數(shù)曲線,其尾端為一條直線,直線的斜率為-k/2.303,該直線外推至零時間的截距為log 〔(kaFX0)/V(ka-k)〕,因此從直線的斜率可求出消除速度常數(shù)k值和t1/2值。若F、V已知,從截距中可繼續(xù)求出ka值,一般情況下F、V是未知的,因此可應(yīng)用殘數(shù)法求出吸收速度常數(shù)ka值。方法如下:

        將(1)式展開得:

        兩端取對數(shù)得:

        設(shè){〔(kaFX0)/V(ka-k)〕*e-kt-C}=Cr

        則(5)式可寫成:

        式中Cr為殘數(shù)效價,以log Cr-t作圖,得第二條直線,稱為“殘數(shù)線”,該直線的斜率為-ka/2.303:從該斜率求出ka值和t1/2(a)值[1]。

        A豬場供試后備母豬抗體檢測時間和數(shù)值見表2(根據(jù)效價、時間數(shù)據(jù)列表):

        表2 A豬場后備母豬抗體檢測時間和數(shù)值

        在對數(shù)圖坐標(biāo)上,以抗體效價對數(shù)對時間作圖,尾端為一直線,斜率為:

        (0.6 8 1 2 4-0.8 6 3 3 2)/ (1 5 0-9 0)=-0.0 0 3 0 3, 則k=2.303*(0.003 03)=0.006 99d-1

        由此得:t1/2=(0.693)/k=(0.693)/ (0.00699)=99.14(d)

        將尾端直線外推到與縱軸相交,從圖中找出前一段時間的外推線上的濃度即上表中第3列,將外推線上的濃度減去相應(yīng)時間的血藥濃度(即第3列減去第2列相應(yīng)數(shù)字)得到殘數(shù)效價(及第4列數(shù)字)。在該對數(shù)坐標(biāo)圖中,以殘數(shù)效價對時間作圖,即以log Cr-t作圖,得到另一條直線,即為殘數(shù)線,殘數(shù)線的斜率為:

        {(1.1417-0.9590)-(1.333-0.6812)}/(28-14)=-0.033 50

        因 此,ka= 2.303*(-0.03307)=0.077 17 d-1

        吸收半衰期 t1/2(a)=(0.693)/ ka=( 0.693)/0.07717=8.978(d)

        2.2.2 B豬場后備母豬抗體代謝動力學(xué)分析

        B豬場后備母豬抗體檢測時間、數(shù)值及外推線數(shù)值見表3。

        同理,B豬場在對數(shù)圖坐標(biāo)上,以抗體效價對數(shù)對時間作圖,尾端為一直線,斜率為:

        (0.6 1 2 7 8 3-0.8 2 6 0 7 4)/ (1 5 0-9 0)=-0.0 0 3 5 5 5, 則k=2.303*(0.003555)=0.0081868d-1

        由此得: t1/2=(0.693)/k=(0.693)/ (0.0081868)=84.65(d)

        將尾端直線外推到與縱軸相交,從圖中找出前一段時間的外推線上的濃度即上表中第3列,將外推線上的濃度減去相應(yīng)時間的血藥濃度(即第3列減去第2列相應(yīng)數(shù)字)得到殘數(shù)效價(及第4列數(shù)字)。在該對數(shù)坐標(biāo)圖中,以殘數(shù)效價對時間作圖,即以log Cr-t作圖,得到另一條直線,即為殘數(shù)線,殘數(shù)線的斜率為:

        {(0.9759-0.9345)-(1.1379-0.6628)}/(28-14)=-0.03097

        表3 B豬場后備母豬抗體檢測時間、數(shù)值及外推線數(shù)值

        因 此,ka= 2.303*(-0.0.03098)=-0.07134 d-1

        吸收半衰期 t1/2(a)=(0.693)/ ka=( 0.693)/0.07134=9.714(d)

        3 討論

        1)豬瘟是由豬瘟病毒(SFV)引起的一種急性熱性高度接觸性傳染病,常呈地方性和散發(fā)性流行??茖W(xué)合理的疫苗免疫,避免出現(xiàn)免疫空白期并保持較高水平的抗體,是預(yù)防豬瘟的暴發(fā)和流行重要條件。但是體內(nèi)原有抗體的存在同時也是導(dǎo)致豬瘟補免效果不好的一個重要因素[3],確定正確的補免時間非常重要。通過本次后備母豬豬瘟抗體代謝動力學(xué)研究,A、B兩場分別在前次豬瘟免疫后160和145日對后備母豬進行補免,可獲得滿意的合格免疫率。

        2)抗體消長動態(tài)參數(shù)ka、t1/2(a)是考察疫苗注射后抗體效價上升情況的重要指標(biāo),比較A、B兩場抗體代謝動力學(xué)參數(shù)ka、t1/2(a)可見:抗體(效價)增長常數(shù)ka值越大,抗體效價上升速度越快,最終的抗體效價峰值也高;t1/2(a)數(shù)值越大抗體效價上升速度越慢,最終的效價峰值越底??贵w代謝動力學(xué)參數(shù)k、t1/2是考查疫苗注射后抗體(效價)消除情況的重要指標(biāo),抗體(效價)消除常數(shù)越小,抗體消除速度越慢;抗體(效價)半衰期t1/2越大,抗體(效價)維持時間越長。在相關(guān)疫苗質(zhì)量可控的情況下,疫苗注射后抗體效價上升的速度和幅度與豬場內(nèi)眾多的免疫抑制性因素(如免疫抑制性疾病、霉菌毒素等)有關(guān),考查抗體消長動態(tài)參數(shù)ka、t1/2(a)就可以對豬場內(nèi)免疫抑制性因素(如免疫抑制性疾病、霉菌毒素等)的綜合危害程度做出半定量綜合評價;而考查抗體消長動態(tài)參數(shù)k、t1/2可以對豬場相關(guān)疫病的防控水平和生物安全措施的效果做出較為直觀的綜合評測。

        [1] 楊懷志,張爭勁.散養(yǎng)生豬豬瘟兔化弱毒疫苗免疫效果的監(jiān)測研究[J].中國牧業(yè)通訊,2008(5):47-49.

        [2] 梁文權(quán),等.生物藥劑與藥物動力學(xué)[M].第1版.北京:人民衛(wèi)生出版社1999:180-182.

        [3] 張新成,李官兵,史子學(xué).豬瘟母源抗體在仔豬體內(nèi)持續(xù)時間的研究[J].養(yǎng)豬,2008(1):46-48.

        2014-03-10)

        徐慶安 (1975-) 男,漢臺區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所,獸醫(yī)師。主要從事動物衛(wèi)生監(jiān)督和檢疫監(jiān)督工作。

        *韓永剛,為并列第一作者、通訊作者。

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