（河南省諸美種豬育種集團有限公司，河南 駐馬店 463612）

規(guī)?；i場豬瘟、豬藍耳病抗體檢測結(jié)果分析

霍金耀，鄭逢梅

（河南省諸美種豬育種集團有限公司，河南 駐馬店 463612）

為了解豬瘟、豬藍耳病的免疫狀況、評價免疫效果、制定合理免疫程序與防控措施。筆者于2014年分4次對某規(guī)?；i場采血進行豬瘟、豬藍耳病抗體檢測。結(jié)果顯示該場母豬的豬瘟、豬藍耳病抗體水平合格；產(chǎn)房仔豬豬瘟抗體水平合格，豬藍耳病抗體水平較低；保育階段豬瘟和豬藍耳病抗體水平均較低；育肥階段豬瘟抗體水平較低，豬藍耳病抗體水平偏高，且標準差大。結(jié)合該場免疫程序，表明仔豬的豬瘟首免日齡應根據(jù)抗體消長情況推遲，同時應考慮對仔豬免疫豬藍耳病疫苗。

豬瘟抗體；豬藍耳病抗體；檢測分析

疫苗接種是規(guī)?；i場預防和控制重大傳染病的重要途徑，特別是不同的豬場需要制定一套因地制宜、切實可行的免疫程序以及免疫評價系統(tǒng)。免疫監(jiān)測是為了監(jiān)測接種豬群的免疫效果，并根據(jù)免疫效果合理地調(diào)整免疫接種方案，是指導與制定免疫程序的重要參考依據(jù)。豬瘟、豬藍耳病是當前危害養(yǎng)豬生產(chǎn)的重大傳染病，嚴重影響著規(guī)模化豬場的豬群健康與成績。為了監(jiān)測某規(guī)?；i場豬瘟、豬藍耳病的抗體水平，掌握豬場流行病學動態(tài)及免疫效果，每季度抽取該豬場血樣120份左右，進行豬瘟、豬藍耳病的抗體水平檢測。

1 材料與方法

1.1 樣品來源及主要試劑和儀器

2014年3、6、9、12月對某規(guī)?；i場進行抽樣調(diào)查，每頭采取血樣5 mL，每次采集血樣120份左右。

豬瘟、豬藍耳病抗體ELISA檢測試劑盒均為美國IDEXX公司產(chǎn)品。酶標儀、移液器、臺式離心機（凱達TGL-16）。

1.2 試驗方法

1.2.1 組別分群 該場為養(yǎng)豬一條龍模式生產(chǎn)線，按照豬群所在區(qū)域人為劃分為產(chǎn)房階段、保育階段、育肥階段；母豬群劃分為后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬。

1.2.2 血樣采集 前腔靜脈采血，標記后置于30～37 ℃孵育30 min，待血液凝固、血清析出，帶回實驗室分離血清。

1.2.3 血清制備 將帶回的一次性采

血注射器室溫靜置30 min后，將析出的血清分別放入對應編號的滅菌EP管中，分組編號，冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.4 豬瘟、豬藍耳病抗體檢測方法與結(jié)果判定 按照豬瘟、豬藍耳病ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行抗體檢測與結(jié)果判定，豬瘟抗體結(jié)果為阻斷率%＞40判為陽性，豬藍耳病抗體結(jié)果為S/P值＞0.4判為陽性。每組設2個陰性血清對照和2個陽性血清對照。

1.3 豬瘟、豬藍耳病免疫程序調(diào)查

對該規(guī)模化豬場的豬瘟、豬藍耳病免疫程序進行調(diào)查，該場2014年全年免疫程序一致，結(jié)果見表1。

表1 豬瘟、豬藍耳病免疫程序

2 試驗結(jié)果

2.1 豬瘟抗體檢測結(jié)果

結(jié)果顯示，1、2、3季度中，均表現(xiàn)為保育豬抗體水平最低，4季度中育肥豬抗體水平最低。1、2、3季度的產(chǎn)房仔豬抗體水平較好，但是4季度的產(chǎn)房仔豬抗體水平偏低。母豬的抗體水平全年均達到90%以上的水平，但是4季度的抗體水平較前3個季度略低。

根據(jù)豬瘟抗體平均值結(jié)果，前3季度中平均值最低的為保育豬，分別為66.3、46.5和50.2，4季度中平均值最低的為育肥豬的49.4。標準差結(jié)果中，保育、育肥的標準差普遍最高，4個季度中標準差最高的階段均為育肥豬，分別是30.4、20.9、24.9、24.8。母豬的抗體平均值均處于較高水平，其中4個季度中后備母豬的標準差均明顯高于經(jīng)產(chǎn)母豬的標準差。

表2 4個季度各個階段豬瘟抗體檢測結(jié)果

2.2 豬藍耳病抗體檢測結(jié)果

由表4可以看出，4個季度產(chǎn)房、保育階段豬藍耳病抗體的陽性率較低，育肥、后備母豬、經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體陽性率高。育肥豬在四個季度中抗體陽性率幾乎全部為100%，3、4季度后備母豬的陽性率由1、2季度的100%下降到60%，經(jīng)產(chǎn)母豬的在前3季度的陽性率達92%以上，4季度下降為75%。

由表5可以看出，第1季度中，豬藍耳病抗體平均值最高的為經(jīng)產(chǎn)母豬（1.9），2、3、4季度中抗體平均值最高的均為育肥豬（分別為2.0、2.0、1.6）；1、2季度中經(jīng)產(chǎn)母豬的標準差為同一時期不同階段的最高值，3、4季度中保育豬的標準差為最高值。

表3 4個季度各個階段豬瘟抗體平均值與標準差

表4 4個季度各個階段豬藍耳病抗體檢測結(jié)果

3 結(jié)果分析

3.1 豬瘟抗體結(jié)果分析

4個季度的豬瘟抗體水平總體規(guī)律相似，但是仍有一定差異，前3個季度的豬瘟抗體陽性率最低值均在保育，產(chǎn)房階段以及母豬階段的抗體水平均較高，表示該場的仔豬首次免疫時間偏早，該場在20日齡首免豬瘟疫苗，此時產(chǎn)房階段的抗體平均值和陽性率都處于較高水平，免疫豬瘟疫苗之后，部分疫苗毒與體內(nèi)的部分豬瘟抗體發(fā)生中和反應，從而使體內(nèi)的豬瘟抗體水平下降。

4季度的豬瘟抗體平均值與前3個季度相比偏低，經(jīng)詢問，該場9月份開始使用與之前同一廠家不同批號的豬瘟疫苗，推測為疫苗批次質(zhì)量問題（后經(jīng)送檢證實），9月份之后使用的疫苗抗原含量偏低，導致4季度母豬、產(chǎn)房仔豬的抗體水平下降。但是4季度保育豬的抗體陽性率有所升高，同時4季度抗體陽性率最低的則為育肥豬，推測疫苗抗原含量下降導致豬瘟首免時與疫苗毒中和的抗體數(shù)量也大幅度下降，從而使保育豬的抗體陽性率升高，而豬瘟二免時由于疫苗抗原含量低，因此免疫效果不理想，育肥豬的抗體陽性率下降。

4個季度中育肥豬的標準差均為同一時期不同階段豬群的最高值，表示育肥豬階段為豬瘟抗體最不穩(wěn)定時期，這與該場的實際情況有著密切關系，該場為種豬場，因挑選后備、測定后備等程序的影響，使得育肥周期偏長，育肥前期豬瘟抗體水平較高，但是育肥后期豬瘟抗體逐漸消減，使得整個育肥階段的抗體水平變化較大。

3.2 豬藍耳病抗體結(jié)果分析

1季度中豬藍耳病抗體陽性率最低值在保育階段，2、3、4季度的陽性率最低值均在產(chǎn)房階段，這與仔豬不免疫豬藍耳病疫苗有密切關系。產(chǎn)房仔豬由于不免疫豬藍耳病疫苗，因此產(chǎn)房仔豬的抗體水平與經(jīng)產(chǎn)母豬的抗體水平密切相關，4個季度相互對比，發(fā)現(xiàn)經(jīng)產(chǎn)母豬抗體陽性率升高時產(chǎn)房仔豬的抗體陽性率也升高，反之亦然。

產(chǎn)房、保育、育肥3個階段的豬藍耳病抗體陽性率基本上呈遞增趨勢（1季度產(chǎn)房陽性率比保育略高，應該與同一時期母豬抗體水平也最高相關），由于沒有免疫疫苗，表示保育和育肥豬藍耳病抗體的升高是野毒感染造成的。保育的抗體陽性率升高，到育肥階段豬藍耳病抗體陽性率均達到或接近100%，且育肥豬的抗體平均值在同一時期的不同階段中幾乎全部為最大值，表示保育階段豬群幾乎全部被豬藍耳病野毒感染。

表5 4個季度各個階段豬藍耳病抗體平均值與標準差

1、2季度母豬的豬藍耳病抗體平均值和標準差均處于較高程度，表示1、2季度母豬的豬藍耳病抗體也不太穩(wěn)定，說明母豬群中也存在豬藍耳病野毒的感染。3、4季度母豬的抗體平均值有所下降，標準差也有所降低，表示下半年母豬群的豬藍耳病野毒活躍程度降低，抗體值與理論情況下疫苗免疫的抗體值較為接近。

4 討論

4.1 豬瘟防控策略

近年來豬瘟的發(fā)生和流行特征以慢性、非典性、溫和性、隱性等類型為主，公豬、基礎母豬多表現(xiàn)為隱性感染，仔豬最容易經(jīng)過垂直傳播感染，這些感染豬都是能夠持續(xù)排毒的傳染源，同時，病豬愈后24～57 d仍有帶毒和排毒現(xiàn)象，這點在飼養(yǎng)管理中必須引起足夠的重視[1，2]。

該場全年豬瘟抗體檢測結(jié)果相對穩(wěn)定，表示疫苗免疫接種水平良好，保育豬的豬瘟抗體水平偏低，應檢測產(chǎn)房仔豬母源抗體的消減規(guī)律，根據(jù)母源抗體的消減程度，在豬瘟抗體阻斷率40%～45%左右時進行首免，之后，監(jiān)測首免后抗體消長規(guī)律，在抗體值下降過程中，選擇抗體阻斷率在40%～45%時進行二免。而不能一味的照搬使用傳統(tǒng)20+60日齡免疫程序，應根據(jù)自身豬場的實際抗體檢測情況制定免疫程序。育肥階段由于生產(chǎn)周期較長，可適當在育肥中后期加強免疫一次，從而使育肥后期抗體維持較高水平。

針對疫苗批次差異產(chǎn)生的影響，在購進疫苗前一定要對疫苗的抗原含量進行檢測，推薦使用TCID50檢測病毒效價或者使用熒光定量RT-PCR檢測疫苗中核酸含量，選擇效價高或抗原含量高的疫苗批次。

4.2 豬藍耳病防治對策

對河南大中型、規(guī)?；i場豬藍耳病感染情況調(diào)查，絕大多數(shù)豬場屬于豬藍耳病陽性穩(wěn)定場，生產(chǎn)管理水平直接決定著豬藍耳病的防控效果[3]。豬場中存在豬藍耳病野毒時，豬群容易造成隱性感染且不表現(xiàn)臨床癥狀，當感染的豬藍耳病病毒毒力較強或病毒活躍期以及一旦飼養(yǎng)管理失當、飼養(yǎng)條件變化等不穩(wěn)定因素存在，極易引起豬藍耳病的暴發(fā)，因此，疫苗免疫以及配套的抗體檢測顯得尤為重要。

通過抗體檢測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)該場的保育階段為豬藍耳病最為活躍階段，因此加強保育階段的飼養(yǎng)管理與群防群控為該場防控豬藍耳病的關鍵點。育肥階段豬藍耳病均已感染，因此要格外注意育肥階段是否有類似于豬藍耳病臨床癥狀出現(xiàn)，如高熱稽留、呼吸道疾病等，若有疑似豬藍耳病例應立刻采樣進行豬藍耳病病原檢測，同時大群投藥治療，確診為豬藍耳病后應加強病豬隔離，防止傳染給健康豬只，感染豬藍耳病的豬群不再留作種用。

該場仔豬未免疫豬藍耳病疫苗，建議檢測產(chǎn)房、保育仔豬的母源抗體消減規(guī)律，制定合理的豬藍耳病免疫程序，主動免疫能夠降低感染性野毒在接種動物體內(nèi)的復制效率，減少發(fā)病病例，保護豬群健康[4，5]。

4.3 豬場綜合防控措施與生物安全體系建設

規(guī)?；i場穩(wěn)定生產(chǎn)與持續(xù)發(fā)展是以種豬的健康穩(wěn)定為前提，豬場豬瘟和豬藍耳病控制的好壞直接關系到整個種豬群的健康狀況。種豬群攜帶豬瘟、豬藍耳病病毒或機體免疫受到抑制，仔豬先天性感染豬瘟或者豬藍耳病，或者仔豬得不到母源抗體的充分保護，很容易感染各種病原，成為豬場的隱患。

規(guī)?；i場應建立完善的衛(wèi)生防疫與生物安全體系，避免病原自外界傳入與病原在豬場內(nèi)部傳播是疫病防控的出發(fā)點與著力點。定期進行血清學監(jiān)測，根據(jù)檢測結(jié)果及時調(diào)整免疫程序，對可疑豬隔離治療，對確診為重大傳染病豬只立刻上報疫情或無害化處理。

有條件的種豬場，在做好抗體檢測的同時應做好病原檢測，尤其是種用后備公母豬引種之前以及引種后的隔離期應該分2次逐頭檢測重大動物疫病病原，如豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病毒、口蹄疫病毒，對病原陽性的后備種豬應堅決淘汰處理，以免病毒傳染給豬場其他豬群，對于經(jīng)產(chǎn)母豬也應定期采樣，檢測重大動物疫病病原，建立健全疫病監(jiān)測監(jiān)督機制，對病原陽性的經(jīng)產(chǎn)母豬也應做淘汰或不做種用處理。商品豬場也應該定期進行病原檢測，了解本場疫病感染情況，有助于制定合理的防疫程序與防范措施，若發(fā)生疫情時也有助于采取對應措施。

[1] 李嬌，沈志強，祖立闖，等.間接ELISA在豬瘟抗體檢測上的應用[J].動物醫(yī)學進展，2012，33(6)：126-129.

[2] 劉建，湯德元，李春燕，等.我國豬瘟流行新趨勢與防控措施[J].中國豬業(yè)，2013(2)：37-39.

[3] 謝偉濤，梁躍，喬松林，等.豬場藍耳病檢測結(jié)果與案例分析[J].今日養(yǎng)豬業(yè)，2015(3)：72-73.

[4] 吳億春.豬繁殖與呼吸綜合征疫苗研究新進展[J].中國畜牧獸醫(yī)，2011，38(11)：191-194.

[5] 于桂芳，王國良，溫富勇.高致病性豬藍耳病免疫抗體監(jiān)測分析報告[J].當代畜牧，2011(4)：14-15.

2015-05-20）