張寅生

普利生凝血試劑在Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀上的應(yīng)用評價(jià)

張寅生

目的：比對國產(chǎn)普利生凝血試劑與原裝進(jìn)口Siemens試劑在日本Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀上使用結(jié)果有無顯著差異。方法：分別用普利生凝血酶時(shí)間（prothrombin time，PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（actived partial thromboplastin time，APTT）測定試劑與原裝Siemens試劑檢測臨床標(biāo)本，統(tǒng)計(jì)結(jié)果后進(jìn)行分析。結(jié)果：國產(chǎn)普利生PT和APTT測定試劑與原裝Siemens試劑檢測結(jié)果無顯著差異，PT、國際化標(biāo)準(zhǔn)比率（international normalized，INR）與APTT值偏差均符合美國CLIA＇88標(biāo)準(zhǔn)要求。結(jié)論：國產(chǎn)普利生PT和APTT測定試劑與原裝試劑相關(guān)性良好，可以替代Siemens試劑在Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀上使用。

凝血試劑；全自動(dòng)血凝儀；應(yīng)用

0 引言

Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀經(jīng)濟(jì)實(shí)用，可同時(shí)開展多項(xiàng)凝血檢測，是中小型實(shí)驗(yàn)室開展血栓與止血實(shí)驗(yàn)的適合機(jī)型[1]。原裝進(jìn)口Siemens試劑價(jià)格較昂貴，而國產(chǎn)血凝商品化試劑盒價(jià)格相對低廉。但按照美國國家臨床實(shí)驗(yàn)室EP9文件的要求，非配套試劑需與配套試劑的測定結(jié)果進(jìn)行比對分析，驗(yàn)證其有效性[2]。本組在Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀上使用國產(chǎn)普利生凝血試劑與原裝進(jìn)口Siemens試劑對同批的血漿樣本進(jìn)行檢測，對結(jié)果進(jìn)行分析研究。

1 檢測材料及方法

1.1 儀器與試劑

儀器：日本Sysmex CA-530全自動(dòng)血凝儀；試劑：國產(chǎn)普利生凝血酶原時(shí)間（prothrombin time，PT）和活化部分凝血活酶時(shí)間（activated partial thromboplastin time，APTT）凝血測定試劑與原裝進(jìn)口Siemens試劑。

1.2 質(zhì)量控制

在儀器運(yùn)轉(zhuǎn)正常的情況下，分別對每種試劑進(jìn)行室內(nèi)高、中、低值質(zhì)控測定，質(zhì)控良好后進(jìn)行檢測。

1.3 檢測方法

要求采血者嚴(yán)格按照操作規(guī)范抽取臨床患者標(biāo)本[3]（為防止樣本水平過于集中，注意收集包括術(shù)前正常體檢、口服抗凝藥、住院輸注肝素、血栓前高凝狀態(tài)等多水平人群標(biāo)本），真空采血管準(zhǔn)確1∶9抗凝，充分混勻，即刻3 000 r/min離心10 min后分離血漿。選擇合格標(biāo)本，每日上午及下午各檢測10例。上午10例進(jìn)行PT比對檢測，下午10例進(jìn)行APTT比對檢測，每種試劑均測定2次，試劑按ABBA順序更換，次日按BAAB順序更換，記錄結(jié)果，取平均值。在室溫下標(biāo)本放置時(shí)間過長會(huì)導(dǎo)致凝血因子不穩(wěn)定，故要求所有比對測定在2 h內(nèi)完成[4]。在每種試劑進(jìn)行比對測定過程中同樣進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控測定，以保證即時(shí)結(jié)果的可靠性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以進(jìn)口原裝Siemens試劑檢測結(jié)果為x軸，以國產(chǎn)普利生PT凝血測定試劑為y軸，以均值（x）、偏差（BT%）、標(biāo)準(zhǔn)差（s）、相關(guān)系數(shù)（r）、回歸方程（y=bx+a）表示。參考美國CLIA′88的要求，繪制回歸曲線，計(jì)算偏差，驗(yàn)證國產(chǎn)普利生血凝試劑結(jié)果在Sysmex血凝儀上使用是否符合相關(guān)要求[5]。

2 結(jié)果比對分析

2.1 國產(chǎn)試劑在Sysmex CA-530血凝儀上的比對

用國產(chǎn)普利生凝血試劑與原裝進(jìn)口Siemens試劑分別測定臨床標(biāo)本，數(shù)據(jù)見表1、2。

表1 國產(chǎn)普利生凝血試劑在Sysmex血凝儀上的比對

表2 國產(chǎn)凝血試劑與原裝試劑驗(yàn)證分析

由表1可以看出，與原裝試劑相比，國產(chǎn)試劑相關(guān)系數(shù)分別為：（1）PT試劑：r=0.962，y=1.111x-0.987；（2）國際化標(biāo)準(zhǔn)比率（international normalized ratio，INR）：r=0.964，y=1.042x-0.061；（3）APTT試劑：r=0.972，y=1.090x-1.045。檢測結(jié)果具有良好的相關(guān)性。

2.2 國產(chǎn)凝血試劑與原裝試劑驗(yàn)證分析

由表2可看出，使用Sysmex CA-530血凝儀進(jìn)行檢測，通過低、高、均值線性回歸計(jì)算y值，國產(chǎn)普利生試劑的檢測結(jié)果與原裝Siemens試劑相比，PT檢測結(jié)果低值、高值及均值的偏差（BT）分別為1.05%、8.07%和3.28%；INR結(jié)果低值、高值及均值的偏差（BT）分別為-2.30%、2.14%和-0.90%；APTT檢測結(jié)果低值、高值及均值的偏差（BT）分別為2.89%、7.67%和5.38%。在全部高值、低值及均值的偏差中，最大偏差為7.67%，實(shí)際偏差最大為PT高值（14.60%），均在±15%范圍內(nèi)，未超出美國CLIA′88能力對比檢驗(yàn)的要求。

3 討論

（1）從表1、2可得出，與原裝Siemens試劑相比，國產(chǎn)普利生試劑PT、INR及APTT檢測相關(guān)性較好，偏差均在±15%范圍內(nèi)，符合美國CLIA′88能力對比分析檢驗(yàn)的質(zhì)量要求。

（2）從表1可看出，相對原裝試劑而言，國產(chǎn)試劑標(biāo)準(zhǔn)差均偏大，離散程度較高，因此應(yīng)注意高值及低值結(jié)果的檢測。建議實(shí)驗(yàn)室在使用國產(chǎn)試劑的同時(shí)應(yīng)有進(jìn)口試劑備份，以對異常結(jié)果進(jìn)行監(jiān)測。

（3）從表2可看出，在PT高值時(shí)實(shí)際偏差較大，達(dá)14.60%，但同樣的標(biāo)本INR偏差為6.79%，偏差趨小。這是因?yàn)椴煌瑥S家試劑的正常均值各不相同，且國際敏感指數(shù)（international sensitivity index，ISI）值也存在明顯差異。對PT的比對要綜合分析，有人提出區(qū)域性ISI值的概念[6]。本文建議：①對于正常范圍內(nèi)的結(jié)果，PT及INR無明顯差異，可選任一項(xiàng)進(jìn)行報(bào)告，對于高值患者應(yīng)取用INR值[7]。②盡量使用ISI值接近1的試劑。本文在使用國產(chǎn)普利生試劑中發(fā)現(xiàn)ISI差距較大（0.94～1.14），國產(chǎn)廠家應(yīng)注意此問題。

（4）原裝試劑與國產(chǎn)試劑均需注意規(guī)范使用。因?yàn)镾ysmex CA-530血凝儀多在中小實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用，標(biāo)本量小且送檢不集中。本實(shí)驗(yàn)室在做比對實(shí)驗(yàn)及日常工作中均發(fā)現(xiàn)因試劑問題導(dǎo)致質(zhì)控失控的情況。因此，本文建議：①每天早上根據(jù)經(jīng)驗(yàn)估算臨床標(biāo)本量添加試劑，試劑循環(huán)使用最多不超過1 d。②在沒有標(biāo)本的情況下將試劑盤放入2～8℃冰箱封蓋保存，使用前復(fù)溫20 min。③試劑不能循環(huán)添加。尤其注意APTT檢測中的CaCl2，理論上非常穩(wěn)定，很多實(shí)驗(yàn)室忽視對CaCl2的使用，導(dǎo)致CaCl2失活，APTT結(jié)果批量延長。④注意跟隨標(biāo)準(zhǔn)化質(zhì)控血清。

（5）Sysmex CA-530血凝儀凝固法基于光學(xué)檢測法，經(jīng)檢測，發(fā)現(xiàn)因纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白導(dǎo)致混合物的濁度增加，從而引起散射光濁度的變化。在測定中應(yīng)做到：①重視儀器的維護(hù)與保養(yǎng)；②專人負(fù)責(zé)儀器的使用與管理；③重視儀器報(bào)警，及時(shí)查找原因；④注意標(biāo)本因素對檢測的干擾影響，加強(qiáng)對采血者檢測者的培訓(xùn)；⑤作為臨床實(shí)驗(yàn)室檢測者，應(yīng)通曉凝血理論基礎(chǔ)，對于異常結(jié)果具體分析[8]；⑥出現(xiàn)危急值及時(shí)與臨床溝通，與臨床不符時(shí)需對儀器、試劑、樣本進(jìn)行全面檢查分析，報(bào)告危急值需做到審慎、準(zhǔn)確、及時(shí)。

4 結(jié)語

PT和APTT作為凝血檢測最重要的檢測項(xiàng)目，前者是篩檢外源性凝血系統(tǒng)的唯一試驗(yàn)，后者是篩檢內(nèi)源性凝血的系統(tǒng)試驗(yàn)，其結(jié)果的可靠和穩(wěn)定性對臨床尤為重要[9]。如何保證凝血結(jié)果的準(zhǔn)確性、減少誤差，成為檢驗(yàn)工作者需重視的課題。通過本文的

（????）（????）比對分析，可得出：國產(chǎn)普利生PT和APTT凝血試劑與原裝試劑相比具有良好的相關(guān)性，且價(jià)格相對低廉，偏差在允許范圍內(nèi)，因此中小實(shí)驗(yàn)室在做好室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評的情況下可使用國產(chǎn)試劑代替原裝試劑進(jìn)行檢測。

[1]劉曉峰，葉定兒.SysmexCA-530全自動(dòng)血凝儀的應(yīng)用體會(huì)[J].江西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)，2002，20（6）：407，393.

[2]邱春紅，張?jiān)?，李德?載脂蛋白B檢測試劑比對研究[J].國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，31（7）：760-761.

[3]趙建宏，戴二黑.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本留取指南[M].北京：中國科學(xué)技術(shù)出版社，2007：68-70.

[4]郭光輝，束振華.影響凝血四項(xiàng)測定結(jié)果的分析前因素[J].海南醫(yī)學(xué)，2010，21（24）：108-109.

[5]林云，施雄飛.國產(chǎn)液體試劑在Stago血凝儀上的性能評價(jià)[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，9（22）：1 716-1 717.

[6]王學(xué)鋒，王鴻利.血栓與止血的檢測及應(yīng)用[M].上海：世界圖書出版公司，2002：105.

[7]叢玉隆.關(guān)于衛(wèi)生部出凝血時(shí)間操作規(guī)程《通知》的理解[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2001，24（3）：183-185.

[8]許文榮，王建中.臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2009：407-408.

[9]熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：70-71.

（收稿：2014-03-10 修回：2014-07-20）

（欄目責(zé)任編校：李 影）

Application evaluation of domestic Precil coagulation reagent in Japan Sysmex coagulometer

ZHANG Yin-sheng
(Department of Clinical Laboratory,Xinglong County People's Hospital,Xinglong 067300,Hebei Province,China)

ObjectiveTo investigate the difference between domestic Precil coagulation reagent and imported reagent Siemens used in Japan SysmexCA-530 automated coagulometer.MethodsThe clinical specimens were tested for prothrombin time(PT)and activated partial thromboplastin time(APTT)with Precil reagents and Siemens reagents respectively, and then the results were analyzed statistically.ResultsThere were no significant differences between the results of PT and APTT by Precil and Siemens reagents,and Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988 (CLIA'88)was met in biases of PT,international normalized ratio (INR)and APTT.ConclusionThere is high correlation between Precil PT and APTT reagents and the original ones,which can replace Siemens reagents for Sysmex Coagulometer.[Chinese Medical Equipment Journal，2015，36（3）：105-106，135]

coagulation reagent;fully automatic blood coagulation analyzer;application

R318.6；TH776

A

1003-8868（2015）03-0105-03

10.7687/J.ISSN1003-8868.2015.03.105

張寅生（1977—），女，副主任檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)方面的研究工作。

067300河北興隆，興隆縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科（張寅生）