沈睿，李婉怡，張莉莉，劉永立(浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州310058)

花葉開(kāi)唇蘭(Anoectochilus roxburghii(Wall.)Lindl)是蘭科花葉蘭屬多年生植物，為陸生蘭，又名金線蓮(通稱(chēng))、金錢(qián)草、鳥(niǎo)人參。金線蓮性喜涼爽、蔭濕［1］，在我國(guó)主要分布于亞熱帶地區(qū)，即福建、廣東、廣西、浙江、江西、海南、云南、四川、貴州以及西藏南部等省區(qū)。金線蓮是我國(guó)傳統(tǒng)的珍貴藥材，可全草入藥，味甘微苦、性平微寒，具有清熱解毒、潤(rùn)肺止咳和祛風(fēng)利濕等功效，因此受到醫(yī)藥行業(yè)的廣泛重視。目前金線蓮的人工繁殖主要是靠組織培養(yǎng)育苗后進(jìn)行大田移栽，金線蓮的組織培養(yǎng)已有報(bào)道［2－4］，然而如何高效且節(jié)能地進(jìn)行擴(kuò)繁金線蓮是值得進(jìn)一步探討的課題。該研究以福建金線蓮為材料，研究了基本培養(yǎng)基、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑以及光照對(duì)其繁殖的影響，為金線蓮快繁技術(shù)體系的優(yōu)化和生產(chǎn)應(yīng)用提供了參考。

1 材料與方法

取自實(shí)驗(yàn)室原有的金線蓮組培苗的幼嫩帶腋芽莖段為外植體材料，該材料為福建品種?；九囵B(yǎng)基為改良MS培養(yǎng)基(硝酸銨減半)和1/2MS培養(yǎng)基(大量元素減半)，添加不同濃度的萘乙酸(NAA)和6-BA，pH調(diào)整為5.8，在121℃下滅菌20 min。培養(yǎng)條件為溫度(25±2)℃、光照3 000 lx、時(shí)間12 h/d、環(huán)境濕度60% ～80%。

表1 不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)金線蓮增殖培養(yǎng)的影響

2 結(jié)果與分析

2.1 不同植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)金線蓮增殖的影響 由表1可見(jiàn)，培養(yǎng)基中沒(méi)有添加6-BA時(shí)，NAA的濃度對(duì)金線蓮芽數(shù)增殖的影響不大，隨著6-BA添加濃度的增加，金線蓮芽數(shù)增殖數(shù)量也隨之增加;芽數(shù)在第8組(改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L)最多，即6-BA的濃度在1 mg/L時(shí)最佳，超過(guò)1 mg/L時(shí)，效果反而下降。不論6-BA的濃度變化，株高總是隨NAA的濃度(在0～0.4 mg/L濃度范圍內(nèi))增大而增高，隨6-BA濃度(在0～8 mg/L范圍內(nèi))增大而增大(表1)，在NAA 0.4 mg/L+6-BA 8 mg/L添加區(qū)為最高。只有在不添加6-BA時(shí)才生根。生根數(shù)隨NAA濃度(在0～0.4 mg/L濃度范圍內(nèi))增大而增多。

2.2 不同光照條件對(duì)金線蓮增殖和生長(zhǎng)的影響 從表2可看出，不同光照條件對(duì)金線蓮增殖芽數(shù)沒(méi)有顯著影響，但株高明顯增加，節(jié)間顯著加長(zhǎng)，植株白化細(xì)長(zhǎng)呈現(xiàn)徒長(zhǎng)狀態(tài)，特別有利于進(jìn)一步切割繁殖。在遮光條件下，節(jié)約能源，組培室溫度也極易控制。

表2 不同光照條件對(duì)金線蓮增殖和生長(zhǎng)的影響

2.3 不同培養(yǎng)基和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)金線蓮生根培養(yǎng)的影響 從表3可以看出，改良MS培養(yǎng)基與1/2MS培養(yǎng)基相比，無(wú)論生根數(shù)還是根長(zhǎng)均相對(duì)較好，生根數(shù)是改良MS培養(yǎng)基 +IBA 0.4 mg/L 最佳，根長(zhǎng)是改良MS+NAA 0.2 mg/L;在該試驗(yàn)中，IBA和NAA對(duì)金線蓮的生根均有較好的作用，二者無(wú)大差異。經(jīng)過(guò)馴化的金線蓮組培苗，移栽到以草炭為基質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)缽中，1個(gè)月以后生長(zhǎng)旺盛。

表3 不同培養(yǎng)基、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)金線蓮生根培養(yǎng)的影響

3 總結(jié)

該試驗(yàn)以金線蓮無(wú)菌苗為研究材料，建立起一條金線蓮的快速繁殖途徑。用改良MS培養(yǎng)基，添加不同濃度的NAA和6-BA，得出最佳的增殖培養(yǎng)配方為改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.4 mg/L+6-BA 1 mg/L。

生根試驗(yàn)中，用改良MS培養(yǎng)基和1/2MS培養(yǎng)基，用不同濃度的NAA和IBA，培養(yǎng)無(wú)菌苗，統(tǒng)計(jì)生根數(shù)和根長(zhǎng)。生根數(shù)是改良MS培養(yǎng)基+IBA 0.4 mg/L最佳，而根長(zhǎng)是改良MS培養(yǎng)基+NAA 0.2 mg/L，但兩者差異不大。

［1］陳泳和，饒寶蓉，江文清，等.武夷山金線蓮特征特性及林下栽培技術(shù)［J］.福建農(nóng)業(yè)科技，2013(12):32 －34.

［2］范子南，肖華山，范曉紅，等.金線蓮的組織培養(yǎng)研究［J］.福建師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，1997，13(2):82 －87.

［3］李秀軍，陳穗云，王玉梅，等.臺(tái)灣金線蓮的組培快繁研究［J］.青海師范大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版，2004(3):91－93.

［4］韓曉紅，王春龍，段春紅，等.不同激素水平對(duì)金線蓮組織培養(yǎng)的影響［J］.廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012(18):94－98.