何新華張秋平潘娟

摘 要：實驗研究不同pH值對南美白對蝦蝦苗成活率的影響，得出以下結(jié)論：pH值7.0～9.0范圍內(nèi)蝦苗應(yīng)激較小，成活率較高。pH值低于7.0或高于9.0時，蝦苗初期死亡率普遍高于pH值7.0～9.0。pH值的高低會影響到蝦苗的成長健康以及成活率大小等問題，研究pH值對南美白對蝦苗成活率影響大小，為南美白對蝦養(yǎng)殖業(yè)提供了重要的科學(xué)依據(jù)。

關(guān)鍵詞：pH值；南美白對蝦；海水；pH值測定儀

1 實驗材料及方法

1.1 實驗用品及試劑

400 g海水晶，80 L大整理箱一個，天平一個，加熱棒一個，自來水，1 m長0.5 cm寬的軟管一個，曝氣裝置一個，50 mL燒杯兩個，500 mL燒杯一個，pH值測定儀一臺，pH值4.0，6.86試劑粉末各一包，吸紙一張，250 mL容量瓶兩個，試劑瓶兩個，玻璃棒一個，溫度計一個，膠頭滴管一個，鹽酸500 mL和氫氧化鈉500 g，16個盆，保鮮膜若干，抄網(wǎng)一個，藥匙一個，蝦料若干。

pH值溶液及其配制：pH值測定儀校準(zhǔn)液共有三種，分別是pH值4.0，pH值6.86，pH值91。正式實驗中用到了前兩種溶液。溶液的調(diào)配：將pH值試劑粉末放到燒杯中，用少許蒸餾水溶解，再用玻璃棒順時針攪勻。然后將玻璃棒轉(zhuǎn)移到容量瓶中，將燒杯中的pH值溶液順著玻璃棒緩慢地轉(zhuǎn)移到容量瓶中，將其定容為250 mL容量瓶中。

鹽酸和氫氧化鈉溶液及其配制：本實驗所用的鹽酸來自于天津市天河化學(xué)試劑廠，500 mL，分子量為36.46，無色透明液體，在空氣中易揮發(fā)，有刺激性酸味，在實驗中將其配置成10%的鹽酸溶液；實驗所用的氫氧化鈉來自上?；瘜W(xué)試劑有限公司試劑一廠，500 g，分子量為40.00，含量不少于96%，為白色片狀固體，容易吸收空氣中水分及二氧化碳，易溶于水，將其配置成濃度為10%的氫氧化鈉溶液。pH值測定儀測出pH值，用鹽酸溶液和氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值的高低，使pH值固定下來。

1.2 實驗動物

本實驗采用的是廈門新榮騰水產(chǎn)技術(shù)開發(fā)有限公司的SPF第一代南美白對蝦苗，蝦苗的體長普遍在0.8～1.2 cm。運來時的蝦苗非常活躍，袋中放著許多活性炭，目的是為了吸附水中有毒物質(zhì)，使蝦苗的體質(zhì)保持健康狀態(tài)。

1.3 實驗方法

1.3.1 pH值簡介 pH值即氫離子濃度指數(shù)，是指溶液中氫離子的總數(shù)和總物質(zhì)的量的和比。它的數(shù)值俗稱“pH值”。溶液酸性或堿性水平的數(shù)值，即所含氫離子濃度的常用對數(shù)的負值。pH值是水溶液最主要的理化參數(shù)之一。凡觸及水溶液的自然現(xiàn)象，工業(yè)化學(xué)和化學(xué)生產(chǎn)過程都與pH值有關(guān)。因此，在工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)、環(huán)保和科研范疇都需要研究及測定pH值。水的pH值是指水中氫離子活度的負對數(shù)值，表示為pH=-lg [H+]。pH值有時由于氫離子活度的數(shù)值往往很小，在應(yīng)用上很不方便，所以就用pH值也稱氫離子指數(shù)。

這一觀點作為水溶液酸性、堿性的判定指標(biāo)。并且，氫離子活度的負對數(shù)值能夠表示出酸性、堿性的變化幅度細微，這樣運用起來就非常便利。

1.3.2 pH值測定儀使用方法 將pH值測定儀連接好，插上電源預(yù)熱10 min，用pH值溶液校正。按校正鍵，Call1閃爍，把電極從保護溶液中取出，放到盛有蒸餾水的燒杯中，用玻璃棒順時針攪動后靜置一分鐘，取出電極后用濾紙稀吸干電極上的蒸餾水，然后將電極放入裝有pH值6.86溶液的50 mL燒杯中，靜止片刻讀出數(shù)值，對照pH值測定儀器使用說明書，正確后按校正鍵，Call2鍵閃爍，將電極用蒸餾水洗凈，放入pH值4.0溶液中，接下來的步驟基本一致，校正正確后開始測水體中的pH值高低，用鹽酸溶液和堿性高的氫氧化鈉溶液調(diào)pH值，經(jīng)常使用pH值測定儀校正兩次就可以。在使用pH值測定儀時一定要小心電極，電極極易損壞，實驗中一定要小心。

1.3.3 實驗用水配制及蝦苗的暫養(yǎng) 在大整理箱內(nèi)放入80 L的水，將海水晶袋撕開，插上天平，找一個500 mL燒杯放在天平上去皮歸零，然后稱取400 g的海水晶，拿一個盆在大整理箱內(nèi)取出半盆水，將盛有海水晶的燒杯放到盆中，使海水晶充分溶解，把溶解后的海水倒入大整理箱內(nèi)，插上電熱棒放入水中加溫，溫度設(shè)置在24 ℃，用曝氣裝置的兩個曝氣管曝氣，排除掉水中的其它雜物。

蝦苗的暫養(yǎng)：剛運輸過來的蝦苗因為袋中的溫度較高，不宜直接放入到兌好的海水中，使用加熱棒將兌好的海水加熱到一定溫度，與袋中的溫度差不到1 ℃時，可以將其倒入，倒入時必須留有一定的原海水，使蝦苗有一個對環(huán)境轉(zhuǎn)變適應(yīng)的過程。暫養(yǎng)的蝦苗每天喂三頓，餌料的量為用藥匙取一勺，放入燒杯中加水溶解，然后倒入盛蝦苗的大整理箱內(nèi)。時間分別固定在早晨8：00，中午12：00，下午18：00。

1.3.4 實驗步驟 實驗容器為直徑35 cm的盆，每個盆內(nèi)用保鮮膜套好，放入勾兌好的海水5 L，實驗蝦苗規(guī)格普遍在0.8～1.2 cm，無節(jié)幼體在盆中適應(yīng)6 h后選取健康的蝦苗進行實驗，實驗前停止投餌。

根據(jù)金春華所做實驗[1]而設(shè)定pH值梯度，正式實驗共設(shè)置8個pH值梯度。以0.5為間隔，pH梯度分別為6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0。在8個pH值梯度中各個環(huán)節(jié)設(shè)1組平行，水中的pH值用10%的鹽酸溶液和10%的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)好，隨即從運來蝦苗的袋中依次選取50尾健康的蝦苗放入勾兌好的海水中。

實驗采用靜水觀察法，實驗期間不充氣，溫度為23 ℃。實驗在10 L盆中進行，實驗水體為5 L，實驗用水為：經(jīng)沉淀、消毒、曝氣處理，用海水晶兌成千分之五的海水，海水比重為1.003（20 ℃），pH為8.53。觀察并記錄蝦苗在不同的pH值水體中生存時間的長短及成活率的大小，采用靜水式觀察法得出一系列的數(shù)據(jù)并對實驗相關(guān)一系列數(shù)據(jù)進行歸納總結(jié)。

實驗時間為48 h，分別在12 h記錄一次，48 h記錄一次。每個盆用若干保鮮膜套好，防止盆壁中以前做毒理實驗殘留下的有毒化學(xué)物質(zhì)而導(dǎo)致實驗誤差，依次選取50尾體質(zhì)健康、活躍度高的蝦苗放入每個套好的保鮮膜盆中。觀察并記錄蝦苗在不同階段不同pH值范圍活力及死亡數(shù)據(jù)。

2 實驗結(jié)果與分析

2.1 死亡率的修正

當(dāng)對照組中實驗蝦苗出現(xiàn)偶爾死亡時，各pH值組的死亡率按下面公式加以修正。修正后得出相應(yīng)數(shù)據(jù)記錄。

校正后的死亡百分?jǐn)?shù)=（實驗組死亡百分?jǐn)?shù)—對照組死亡百分?jǐn)?shù)）/（1—對照組死亡百分?jǐn)?shù)）×100%。

2.2 不同pH值對南美白對蝦苗的影響

當(dāng)pH為 6.5時，放入水中的蝦苗的應(yīng)激性表現(xiàn)劇烈，應(yīng)激性特別大，蝦苗的彈跳能力超強，迅速彈跳，掙扎抽搐現(xiàn)象明顯，圍繞盆壁四周一個方向游動，在12 h出現(xiàn)死亡情況。通過觀察，蝦苗死亡之前蝦身僵直，蝦體通透，蝦須來回迅速抖動。死亡后胃部通紅。不同pH值12 h南美白對蝦蝦苗死亡情況見表1，pH值24 h南美白對蝦蝦苗死亡情況見表2，pH值48 h南美白對蝦蝦苗死亡情況見表3。

根據(jù)上述實驗結(jié)果，得出這樣的結(jié)論，在南美白對蝦苗中pH值控制在7.0到9.0范圍內(nèi)，放入水中的蝦苗應(yīng)激性較小，蝦苗的存活率較高，為蝦苗的適宜環(huán)境。在7.0以下以及9.0以上，蝦苗的應(yīng)激性非常大，掙扎抽搐劇烈彈跳現(xiàn)象明顯，蝦苗不適應(yīng)此環(huán)境。蝦苗在pH值8.0，8.5最適宜生存。

3 討論

3.1 影響實驗結(jié)果偏差因素及處理

正式實驗用到的盆都是被保鮮膜套好的塑料盆，之前做的預(yù)備試驗中，兩組平行實驗未加任何化學(xué)試劑，觀察后得出的結(jié)果具有很大差距。一個pH值8.5的盆中6 h后成活率100%，一個pH值8.5的盆中成活率為0%，通過對照兩個盆，發(fā)現(xiàn)盆壁上貼有菊酯類有毒物質(zhì)標(biāo)簽，所以采用保鮮膜套盆的方法減少實驗數(shù)據(jù)的誤差。鋪膜后放入水中的蝦苗應(yīng)激性與不鋪膜比較，應(yīng)激性會小些，活躍度高，存活時間更長，實驗數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確。大整理箱曝氣的長短也會影響到蝦苗成活率高低，在實驗前期用曝氣裝置連續(xù)兩天充分曝氣，減少蝦苗因水質(zhì)問題出現(xiàn)死亡。因為正式實驗為48 h，連續(xù)性非常強，會受到天氣等因素的影響，在實驗中把加熱棒調(diào)到固定值24 ℃，減少因溫度的變化而引起蝦苗活動力降低，減少實驗結(jié)果的影響。在實驗中用到的蝦苗體質(zhì)需健康，用網(wǎng)抄撈到的蝦苗需活躍度非常強且體長普遍一致，保證實驗動物的一致性，有助于實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。調(diào)節(jié)好水體的pH值，過一段時間，pH值會有所上升，酸性較高的pH值會普遍上升0.5，數(shù)值甚至?xí)?，溫度的變化是一個因素，精準(zhǔn)pH值測定儀使用也是一個因素，在實驗進行中，每隔2 h，用pH值測定儀測量pH值一次，高了用鹽酸溶液調(diào)低。保持pH值在一個固定值，觀察并記錄好實驗數(shù)據(jù)。

3.2 pH值對南美白對蝦苗成活率的影響

pH值6.5時，放入水中的蝦苗應(yīng)激性較大，蝦苗入水彈跳力很強，在很短的時間內(nèi)迅速從盆壁彈跳到盆的中間，12 h后死亡數(shù)達到14尾，48 h后死亡率為100%，蝦苗在pH值6.5不能長時間存活；pH值7.0時，蝦苗的應(yīng)激性較小，入水后在盆壁及四周緩慢游動甚至很少彈跳，12 h后死亡尾數(shù)4尾，48 h后死亡率為13%，蝦苗能適應(yīng)pH值7.0的環(huán)境；pH值為7.5、8.0、8.5時，蝦苗放入水中的應(yīng)激性都比較小，與pH值7.0相似，死亡尾數(shù)大致相同，說明蝦苗在pH值7.0～8.5范圍，能長時間存活。pH值為9.0時，放入水中蝦苗應(yīng)激性較前邊幾組數(shù)值大，但蝦苗能在2 h內(nèi)適應(yīng)pH值9.0的環(huán)境，12 h后死亡數(shù)達到14尾，48 h候死亡率為25%，蝦苗也能適應(yīng)這樣的環(huán)境；當(dāng)pH值為9.5時，放入水中的蝦苗和pH值6.5時放入蝦苗的情況很相似，應(yīng)激性大，狂游，6 h后大部分蝦苗抽搐，12 h后死亡尾數(shù)為33尾，48 h候死亡率為89.02%，蝦苗不適宜在pH值9.5范圍存活；pH值為10.0時，情況和pH值9.5相似但更為劇烈，48 h后的死亡率為100%。說明選取的最低值和最高值成功，整體實驗數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。得出以下結(jié)論：pH值7.0～90范圍內(nèi)蝦苗應(yīng)激性較小，蝦苗成活率較高；pH值低于7.0或高于9.0時，蝦苗初期死亡率普遍高于pH值7.0～9.0，為蝦的不適應(yīng)范圍值，在pH值8.0，8.5最適宜生存。pH值的高低會影響到蝦苗的成長健康以及成活率大小等問題，研究pH值對南美白對蝦苗成活率影響大小，為養(yǎng)殖南美白對蝦提供良好的生長環(huán)境[2]，為南美白對蝦養(yǎng)殖業(yè)提供了重要的科學(xué)依據(jù)[3]。

參考文獻：

[1] 江錦波，金春華.pH值突變對南美白對蝦仔蝦淡化培育成活率的影響[J].齊魯漁業(yè)，2005，（12）：29-30

[2] 查廣才.凡納對蝦淡化養(yǎng)殖蝦池水體生態(tài)環(huán)境及調(diào)控研究[J].生態(tài)學(xué)，2004（6）：12-13

[3] 楊軍.南美白對蝦單雙造池塘養(yǎng)殖效益分析[J].內(nèi)陸水產(chǎn)，2005（12）：22-24