林 燚張明方楊景華楊瑜斌王 馳陳超然

（1浙江省溫嶺市農(nóng)業(yè)林業(yè)局，浙江溫嶺 317500；2浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058；3浙江財政大學(xué)會計學(xué)院，浙江杭州 310018）

西瓜花粉長期保存與授粉技術(shù)

林 燚1張明方2楊景華2楊瑜斌1王 馳1陳超然3

（1浙江省溫嶺市農(nóng)業(yè)林業(yè)局，浙江溫嶺 317500；2浙江大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)學(xué)院，浙江杭州 310058；3浙江財政大學(xué)會計學(xué)院，浙江杭州 310018）

采用低溫真空保存西瓜花粉技術(shù)，西瓜花粉保存186～223 d（天）后，花粉活力保持在50.0%～61.5%，不僅解決了西瓜花粉長期保存的瓶頸問題和西瓜早熟栽培坐果難的問題，而且提高了早春栽培西瓜的品質(zhì)和效益。

西瓜在自然條件下雄花開放幾小時后花粉就失去生活力，國外曾對設(shè)施西瓜花粉長期保存與授粉技術(shù)進行了相關(guān)研究。Miyaji和Shirazawa于1977年報道，在溫度5 ℃和相對濕度20%～40%的條件下，西瓜花粉保存期可達60 d（天）；但多項研究報道表明，雖然在相對濕度和溫度較低的條件下可以延長花粉的壽命，但花粉活力有迅速降低的趨勢（McGutre，1952；Snope & Elliso，1963；Nath & Anderson，1975）。采用有機溶劑也是長期保存西瓜花粉的有效方法之一。據(jù)報道，在-20 ℃的溫度條件下，西瓜花粉在乙酸乙酯溶劑中保存30 d（天），花粉活力仍在40%左右（Morishita et al.，2000；Sugiyama & Morishita，2000）。然而，在西瓜生產(chǎn)實踐中，要把花粉從有機溶劑中提取出來、干燥后授粉是非常困難的。

為了解決 “中國大棚西瓜之鄉(xiāng)”——浙江省溫嶺市設(shè)施西瓜早熟栽培開花期遇低溫、陰雨、寡照天氣，出現(xiàn)有雌花而無雄花或有雄花而花粉活力低下，西瓜無法正常坐瓜或授粉受精不良、坐果率低等問題，筆者通過花粉保存溫度、保存方法、授粉方法等方面的試驗，研發(fā)出低溫真空保存西瓜花粉技術(shù)，成功解決了西瓜花粉長期保存的瓶頸問題和早熟栽培西瓜坐果難的問題，形成了西瓜花粉長期保存與授粉技術(shù)，獲國家發(fā)明專利（專利號：ZL 2012 1 0537616.3）。低溫真空保存西瓜花粉技術(shù)與國外同類技術(shù)相比，具有成本低、保存期長、活力高等優(yōu)點，西瓜花粉保存186～223 d（天）后，花粉活力保持在50.0%～61.5%。

1 花粉長期保存和授粉技術(shù)

1.1 操作程序 采集雄花—攤晾干燥—花粉收集—真空包裝—預(yù)冷處理—低溫保存—活化花粉—田間授粉。

1.2 操作方法

1.2.1 采集雄花 于7～10月的上午從西瓜田間采集新鮮雄花（圖1），裝入手提式冷藏箱，帶回室內(nèi)。

圖1 采集雄花

1.2.2 攤晾干燥 在室溫25 ℃下，將采集來的雄花薄薄鋪一層攤晾（圖2），干燥2 h（小時）。

1.2.3 收集花粉 西瓜為蟲媒花，其花粉的黏性很強，如何將花粉從花藥中分離收集起來是個難題，可以通過振動過篩的方法解決：用剪刀剪下雄蕊，放在16目篩孔的篩子上振動、過篩，篩下鋪一層包裝紙或承接花粉的容器（圖3）。

圖2 攤晾干燥

圖3 收集花粉

1.2.4 真空包裝 用不易吸水的包裝紙包裝花粉，每包不宜過多，一般0.1～0.2 g，然后裝入規(guī)格為20 cm×15 cm左右的鋁泊袋內(nèi)，用真空包裝機抽取空氣，封口，保持袋內(nèi)真空。

1.2.5 預(yù)冷處理 真空包裝后的花粉在4 ℃下預(yù)冷1 h（小時）。

1.2.6 低溫保存 預(yù)先將保存用的冰柜或冰箱設(shè)置到保存溫度-20 ℃或-25 ℃，然后將預(yù)冷后的花粉放入保存，低溫冰柜或冰箱不要經(jīng)常開啟。

1.2.7 檢測活力 每月檢測1次保存花粉的活力，采取三苯基氯化四氮唑（TTC）染色法。稱取0.5 g TTC，溶于少量水中，并定容至100 mL，取少量保存花粉置于載玻片上，加1～2滴TTC溶液，蓋上蓋玻片。將制片于35 ℃恒溫箱中放置15 min （分），然后置100倍的顯微鏡下觀察花粉染色情況，以確定花粉活力。

1.2.8 活化花粉 大田授粉前，將低溫保存的花粉從低溫冰柜或冰箱內(nèi)取出，置于室溫下（溫度一般為10～30 ℃）30 min（分），以激活花粉活力。

1.2.9 田間授粉 選擇天氣晴好的上午，等西瓜雌花開放后，用毛筆將預(yù)先活化后的花粉涂抹到柱頭上（圖4），然后做好標(biāo)記?；罨蟮幕ǚ凼诜鄄僮鲿r間不要超過20 min（分）。一般采集1朵雄花的花粉量只能授1朵雌花。

圖4 田間授粉

2 應(yīng)用效果

西瓜花粉長期保存與授粉技術(shù)已在溫嶺市及其周邊地區(qū)得到應(yīng)用。溫嶺市箬橫鎮(zhèn)鑫鑫大棚西瓜專業(yè)合作社及種植大戶應(yīng)用后，效果明顯。一是早春第1批設(shè)施西瓜生產(chǎn)不需用座瓜靈；二是能提高西瓜坐果率41.7%～61.5%；三是果實圓整，與新鮮花粉授粉果實相同，無畸形果、空心果、裂果的發(fā)生；四是授粉果實品質(zhì)比使用座瓜靈的果實更優(yōu)，瓤色一致，種子飽滿、褐色，中心可溶性固形物含量提高0.18～0.50個百分點；五是果實批發(fā)價增加0.4～0.5元·kg-1，每667 m2產(chǎn)值增加483元。

McGutre D C．1952．Storage of tomato pollen．Proc Am Soc Hor Sci，60：419-424．

Snope J A，Ellison J H．1963．Storage of asparagus pollen under various conditions of temperature，humidity and pressure．Am Soc Hor Sci，83：447-452．

Nath J，Anderson J O．1975．Effect of freezing and freeze-drying on the viability and storage of Lilium longiforum L．a(chǎn)nd Zea mays L．Pollen Cryobiology，12：81-88．

Morishita M，Hori T，Sakata Y，Sugiyama M．2000．Storage of pollen irradiated with soft X-ray for producing seedless watermelon．J Jpn Soc Hor Sci，69（2）：346．

5Sugiyama K，Morishita M．2000．Production of seedless watermelon using soft X-ray irradiated pollen．Sci Hor，84：255．

林燚，女，推廣研究員，專業(yè)方向：蔬菜栽培技術(shù)推廣，電話：0576-81608271，E-mail：wl6690@sina.com

2015-06-03；接受日期：2015-08-29

國家科技計劃項目（2011BAD12B00），溫嶺市科技項目（200915）