李紹條 孫蕾蕾 林興園

·流行病學(xué)調(diào)查·

女性HPV基因型分布與宮頸病變的相關(guān)性分析

李紹條 孫蕾蕾 林興園

目的 觀察浙江省蒼南縣女性人乳頭瘤病毒（HPV）基因型的分布特點(diǎn)，并分析其與宮頸病變之間的相關(guān)性。方法 采用HybriMax和液基薄層細(xì)胞學(xué)（TCT）檢測2126例門診體檢婦女。結(jié)果 2126例體檢者HPV陽性率為14.91%（317/2126），其中20例為雙重感染，7例為三重感染。除HPV43、HPV44、HPV73等HPV基因亞型未檢出外，其余均被檢出，其中HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發(fā)生率最高，是宮頸感染HPV的主要亞型；TCT檢測陽性率為6.63%（141/2126），TCT陽性的HPV感染率為67.38%（95/141），其中慢性炎癥為60.0%（51/85），宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅰ為68.0% （17/25）、CINⅡ為80.0%（12/15）、CINⅢ為91.67%（11/12）、宮頸鱗狀細(xì)胞癌（SCC）為100%（4/4）；HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴(yán)重程度增加而明顯升高（P＜0.05）。結(jié)論 HPV基因分型檢測對HPV感染的流行病學(xué)調(diào)查、HPV不同基因亞型的感染歷程及HPV感染在宮頸病變發(fā)生、發(fā)展過程中的作用等均具有十分重要的意義。

人乳頭瘤病毒 流行病學(xué) 基因分型 宮頸癌 液基薄層細(xì)胞學(xué)

宮頸癌的發(fā)生率僅低于乳腺癌的女性惡性腫瘤疾病，而導(dǎo)致宮頸癌及其癌前病變發(fā)生的重要誘發(fā)因素主要為高危型人乳頭瘤病毒（HPV）持續(xù)性感染［1，2］。相關(guān)文獻(xiàn)報道認(rèn)為［3］，不同HPV基因型所致感染均有顯著的地域差異性，且致病能力和造成的病情預(yù)后情況亦有明顯的差異性。因此本文擬觀察浙江省蒼南縣女性HPV基因型的分布特點(diǎn)，并分析其與宮頸癌、癌前病變之間的相關(guān)性。

1 臨床資料

1.1 一般資料 2126例婦女均為本院門診2013年1月至2014年3月期間行HPV基因分型檢測和液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測（TCT）的體檢者，平均年齡為（37.5±8.7）歲，上述所有婦女均來自浙江蒼南縣地區(qū)。

1.2 實(shí)驗儀器及試劑 PCR擴(kuò)增儀（美國ABI 9700型PCR擴(kuò)增儀），核酸分子快速導(dǎo)流雜交儀（HybriMax）為潮州凱普生物科技有限公司產(chǎn)品，儀器TIB1000液基細(xì)胞學(xué)制片機(jī)（廈門泰普生物有限公司），HPV基因微陣列分型檢測試劑盒（香港凱普公司）。

1.3 HPV基因型檢測方法 采用專用刷收集所有體檢者宮頸移行帶部位的脫落細(xì)胞，使用細(xì)胞存儲液將上述細(xì)胞標(biāo)本予以保留，3d內(nèi)采用HybriMax法對HPV基因型進(jìn)行檢測，可同時檢出23種HPV-DNA亞型基因，其中18種高危型HPV：HPV16、HPV18、HPV31、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV59、HPV66、HPV68、HPV73、HPV83、HPVMM4；5種低危型HPV：HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV44。

1.4 TCT檢測方法及結(jié)果判斷 （1）TCT檢測方法：首先清除干凈體檢婦女宮頸表面的黏液組織，采用專用刷順時針轉(zhuǎn)動3～5圈以收集宮頸轉(zhuǎn)化區(qū)細(xì)胞，立即將上述細(xì)胞標(biāo)本保存在專用保存瓶中，隨后上機(jī)行薄片涂片染色，TCT制片結(jié)束后均在顯微鏡下由病理醫(yī)生閱片予以診斷。（2）TCT結(jié)果判斷：根據(jù)病理學(xué)診斷對宮頸病變予以評判，分為：慢性炎癥；宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及宮頸鱗狀細(xì)胞癌（SCC）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV檢測結(jié)果 2126例體檢者行HPV檢測共檢出317例陽性結(jié)果，HPV陽性率為14.91%（317/2126），其中20例為雙重感染，7例為三重感染。除HPV43、HPV44、HPV73等HPV基因亞型未檢出外，其余均被檢出，其中HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發(fā)生率最高，是宮頸感染HPV的主要亞型。見表1。

2.2 TCT檢測結(jié)果 體檢婦女TCT檢測陽性率為6.63%（141/2126），TCT陽性的HPV感染率為67.38%（95/141），其中慢性炎癥為60.0%（51/85），CINⅠ為68.0%（17/25）、CINⅡ為80.0%（12/15）、CINⅢ為91.67%（11/12）、SCC為100%（4/4）。

2.3 宮頸病變患者與HPV感染的相關(guān)性 HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴(yán)重程度增加而明顯升高（P＜0.05），見表2。

表1 HPV陽性體檢者中HPV基因亞型分布及其TCT陽性比例

表2 宮頸病變患者與HPV感染的相關(guān)性

3 討論

流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，女性人群中HPV感染發(fā)生率可＞20%［4］，而行HPV DNA檢測對早期發(fā)現(xiàn)宮頸癌前病變、判斷預(yù)后情況、早期選擇治療方案和減少疾病發(fā)生率、患者病死率等均具有十分重要的意義。但HPV基因型在不同國家和地區(qū)宮頸癌婦女的表達(dá)存在顯著性差異［5］。

HybriMax技術(shù)檢測HPV基因型的作用原理為將針對不同HPV基因型的特異HPV探針固定在芯片膜上，樣本組織PCR擴(kuò)增產(chǎn)物變性后經(jīng)負(fù)壓導(dǎo)流作用穿過芯片膜，與膜中HPV特異性探針相互結(jié)合從而形成復(fù)合物，最后使用酶底物與探針中的酶反應(yīng)顯色對HPV基因型予以檢測，此方法可檢出23種HPV基因型［6，7］。本資料結(jié)果顯示，2126例體檢者HPV陽性率為14.91%（317/2126），HPV感染陽性率隨宮頸病變病理類型的嚴(yán)重程度增加而明顯升高（P＜0.05），提示高危型HPV感染與宮頸病變病理類型程度呈正相關(guān)。此外，HPV16（17.03%）、HPV58（17.35%）和HPV52（11.67%）感染發(fā)生率最高，是宮頸HPV感染的主要基因亞型，提示HPV16、HPV58、HPV52均具有較高的危險性和致病性，與我國東南地區(qū)相關(guān)文獻(xiàn)報道一致［8］，而與國外研究存在較大差異性，進(jìn)一步證實(shí)HPV感染存在較大的地區(qū)差異性［9］。因此在宮頸癌早期篩查方面，HPV基因分型具有較高的檢測意義，在TCT檢測結(jié)果陰性篩查出高危型HPV感染的人群，有助于病情監(jiān)控、早期發(fā)現(xiàn)和治療宮頸組織病變?？蓪PV、TCT檢查結(jié)果為陰性者的篩查間隔延長至3年/次。

1 黃珍花．人乳頭瘤病毒感染與宮頸病變關(guān)系研究進(jìn)展．國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(2):221～222．

2 王貴宇,劉春江,彭倩,等．人乳頭狀瘤病毒感染與子宮頸病變的關(guān)系探討．中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2010,20(11):1628～1630．

3 Munoz N, Bosch FX, Sanjose S, et al． Epidemiologic classification of human papillomavirus types associated with cervical cancer．N Engl J Med,2003,348(6):518～5274．

4 Damasus AG,Freeman WT．Human papillomavirus and cervical screening．Current Opinion in Obstetrics and Gynecology,2003,15(6): 473～477．

5 張麗娜,周蓓蓓,陳昕華,等．區(qū)域性人乳頭瘤病毒基因型別檢測臨床研究．中國婦幼保健,2010,25(16):1147～1149．

6 廖秦平,趙康．人乳頭瘤病毒分型檢測在臨床工作中的應(yīng)用．中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2010,26(5):331～333．

7 黃杰,曲守方,包蕾．人乳頭瘤病毒基因分型檢測方法進(jìn)展．藥物分析雜志,2010,30(8):1562～1566．

8 趙戴君,龔向真．上海市社區(qū)子宮頸人乳頭瘤病毒感染現(xiàn)況及危險因素研究．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2010,37(10):1867～1872．

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浙江省蒼南縣科技計劃項目（2013S03）

235802浙江省蒼南縣第二人民醫(yī)院病理科