鄭佳 盛顯倉 吳婧婧 張艷

ADAM10在結(jié)直腸癌患者血清中的表達(dá)和臨床意義

鄭佳 盛顯倉 吳婧婧 張艷

目的 探討去整合素-金屬蛋白酶10（ADAM10）在結(jié)直腸癌患者血清中的表達(dá)水平與結(jié)直腸癌發(fā)生、轉(zhuǎn)移的關(guān)系及臨床意義。方法 采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測158例結(jié)直腸癌患者、98例結(jié)直腸息肉患者及110例正常對(duì)照組中血清ADAM10、糖類抗原19-9（CA19-9）和癌胚抗原（CEA）濃度。結(jié)果 結(jié)直腸癌組血清ADAM10水平顯著高于結(jié)直腸息肉組和對(duì)照組（P＜0.001），腫瘤Dukes分期增加，結(jié)直腸癌組血清ADAM10水平進(jìn)行性升高。結(jié)直腸癌患者血清ADAM10表達(dá)水平與性別、年齡、組織類型無關(guān)（P＞0.05），與分化程度、腫瘤的浸潤深度、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P＜0.01）。ADAM10聯(lián)合CEA、CA19-9檢測，可以顯著提高腫瘤診斷的準(zhǔn)確性。結(jié)論 ADAM10在結(jié)直腸癌的診斷中有臨床應(yīng)用價(jià)值，有潛力成為新的腫瘤標(biāo)志物。

去整合素-金屬蛋白酶10 結(jié)直腸癌 腫瘤標(biāo)志物

結(jié)直腸癌是常見的消化道腫瘤，其發(fā)病率在我國逐年升高，嚴(yán)重威脅人類健康。去整合素-金屬蛋白酶10（ADAM10）屬于整合素金屬蛋白酶，在重塑細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞遷移中有重要作用［1］。有資料顯示，ADAM10能夠參與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的病理過程［2］，在胃癌、前列腺癌、乳腺癌、肺癌、血液系統(tǒng)惡性腫瘤中的表達(dá)水平異常增高［3，4］，但在結(jié)腸癌中的表達(dá)情況少有報(bào)道。本文采用ELISA法探究ADAMl0在結(jié)腸癌患者血清中的表達(dá)情況及臨床意義。報(bào)道如下。

1 臨床資料

1.1 一般資料 選擇2010年6月至2014年3月在本院就診的結(jié)直腸癌患者158例，男93例，女65例；平均年齡59.3歲。所有患者均未行放化療，經(jīng)病理檢查結(jié)果證實(shí)為結(jié)直腸癌。結(jié)直腸息肉患者98例，男57例，女41例；平均年齡51歲。經(jīng)病理檢查結(jié)果證實(shí)為結(jié)直腸腺瘤性息肉。正常對(duì)照組共110例，男64例，女46例；平均年齡43歲。腸鏡檢查陰性，各項(xiàng)生化指標(biāo)正常。

1.2 ADAM10、糖類抗原19-9（CA19-9）和癌胚抗原（CEA）檢測 （1）所有對(duì)象的血標(biāo)本，均于次日晨空腹采集靜脈血4ml于EDTA真空采血管中，4000rpm離心15min后分離血清，于-80℃保存待測。（2）ADAM10檢測試劑盒購自上海晶美生物技術(shù)公司，CEA及CA199試劑盒由羅氏公司提供。（3）結(jié)直腸癌組、結(jié)直腸息肉組及健康對(duì)照組ADAM10血清濃度經(jīng)ELISA方法測定后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算上述三組樣本中血清ADAM10濃度。每個(gè)樣本的最小值重復(fù)測量2次，保證變異系數(shù)始終＜10%。取結(jié)直腸癌組、結(jié)直腸息肉組及對(duì)照組血清約1ml，采用IMMUL ITE 1000 分析系統(tǒng)（美國DPC公司）分析血清中CEA及CA19-9水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（x±s）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清中ADAM10、CEA、CA19-9表達(dá)情況 見表1。

表1 三組血清AM10、CEA、CA19-9表達(dá)水平比較（x±s）

2.2 結(jié)直腸癌患者血清ADAM10水平與Dukes分期關(guān)系 結(jié)直腸癌患者Dukes A、B、C、D期患者血清ADAM10水平分別為（193.3±20.7） pg/ml、（277.1±28.5）pg/ml、（332.8±31.9） pg/ml、（384.4±36.1） pg/ml。Dukes分期增加，結(jié)直腸癌組血清ADAM10表達(dá)水平呈進(jìn)行性上述趨勢，結(jié)直腸癌患者血清ADAM10表達(dá)水平與腫瘤Dukes分期呈正相關(guān)（P＜0.05）。

2.3 ADAM10與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 見表2。

表2 結(jié)直腸癌患者血清ADAM10表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系

2.4 ADAM10、CEA及CA19-9診斷結(jié)直腸癌的價(jià)值及聯(lián)合檢測的意義 根據(jù)試劑盒說明書，確定ADAM10、CEA、CA19-9的臨界值分別為150pg/ml、5ng/ml、37U/ml，大于臨界值則為陽性。檢測結(jié)直腸癌組和對(duì)照組血清ADAM10、CEA、CA19-9水平，作ROC曲線。結(jié)果顯示，結(jié)直腸癌患者血清ADAM10的ROC曲線下面積顯著大于CEA和CA19-9（P＜0.05）。ADAM10、CEA、CA19-9單個(gè)指標(biāo)檢測結(jié)直腸癌的敏感性分別為43.07%、28.5%、37.3%。三者聯(lián)合檢測結(jié)直腸癌的敏感性為60.7%。結(jié)果提示，ADAM10聯(lián)合其他腫瘤標(biāo)志物檢測，能顯著增強(qiáng)腫瘤診斷的敏感性。

3 討論

結(jié)直腸癌的臨床表現(xiàn)常缺乏典型癥狀，一旦發(fā)現(xiàn)癥狀多屬中晚期。因此，早發(fā)現(xiàn)、早治療是提高該病治愈率的關(guān)鍵。有資料顯示，ADAM10在惡性腫瘤中有過表達(dá)現(xiàn)象，能與癌癥發(fā)生發(fā)展相關(guān)的關(guān)鍵信號(hào)分子相互作用［5］。WU等［6］報(bào)道ADAM10在腫瘤中表達(dá)升高，Black等認(rèn)為ADAM10在重塑細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞遷移過程中有重要的作用［1］。據(jù)國內(nèi)外相關(guān)研究報(bào)道，ADAM10在腫瘤細(xì)胞生長、浸潤及轉(zhuǎn)移過程中，主要通過自身蛋白酶降解胞外基質(zhì)蛋白，使癌細(xì)胞從腫瘤原發(fā)灶中游離出來，并通過自身整合素介導(dǎo)癌細(xì)胞與正常細(xì)胞反應(yīng)，介導(dǎo)胞間信號(hào)傳遞，進(jìn)而促進(jìn)癌細(xì)胞向鄰近及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移［7］，如ADAM10可通過介導(dǎo)神經(jīng)型鈣粘蛋白（N-cadherin）裂解從而促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移［8］。Millichip等［9］研究發(fā)現(xiàn)ADAM10能降解基底膜IV型膠原，促進(jìn)惡性腫瘤轉(zhuǎn)移。另有學(xué)者報(bào)道ADAM10可以降解淀粉前體蛋白和L1粘附分子，這有利腫瘤細(xì)胞突破細(xì)胞外基質(zhì)而利于腫瘤轉(zhuǎn)移［10，11］。本文結(jié)果顯示Dukes分期增加，結(jié)直腸癌患者血清ADAM10水平進(jìn)行性升高，提示ADAM10的過度表達(dá)與腫瘤的發(fā)生、生長、浸潤、轉(zhuǎn)移有關(guān)。單項(xiàng)檢測結(jié)直腸癌患者血清中ADAM10水平，其敏感性達(dá)43.0%，優(yōu)于CEA和CA19-9。結(jié)直腸癌患者血清ADAM10聯(lián)合CEA及CA19-9檢測，診斷敏感性達(dá)60.7%，顯著高于單項(xiàng)檢測（P＜0.05）。傳統(tǒng)的腫瘤標(biāo)志物CEA及CA19-9在結(jié)直腸癌組血清中的表達(dá)水平較結(jié)直腸息肉組和健康組明顯升高（P＜0.01）。結(jié)直腸癌患者血清ADAM10表達(dá)水平與患者的性別、年齡、組織類型無關(guān)（P＞0.05），與腫瘤的分化程度、腫瘤浸潤深度，有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.01），提示ADAM10在結(jié)直腸腫瘤的生長演化過程中起到重要作用。

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Objective To investigate the relationship between the expression lever of ADAM10 in serum of patients with occurrence and metastasis of colorectal carcinoma，and analyse its clinical significance. Methods Serum samples from 158 patients with colorectal cancer，98 patients with colorctal polyps and 110 healthy human were detected by double antibody sandwich ELISA method. At the same time，to determine the serum CA19-9，CEA evels in specimens. Results ADAM10 level in colorectal cancer patients was significantly higher than that patients with colorctal polyps and normal control.（P＜0.001）.Following with the increased Dukes stage，the serum ADAM10 level was increased. Serum ADAM10 level in the colorectal carcinoma was correlated with the differentiation，infiltration extent，lymphoid node diversion，distant metastasize（P＜0.01），and it was no relationship with the sex，age，structure type（P＞0.05）. ADAM10 combinations of CEA and CA19-9 can increased the positive diagnosis rate of tumor. Conclusion ADAM10 has a certain clinical value in diagnosis of colorectal cancer，has the potential to become a nover tumor marker.

ADAM10 colorectal cancer tumor marker

浙江省臺(tái)州市黃巖區(qū)基金（2011062-3）

318020浙江省臺(tái)州市第一人民醫(yī)院消化內(nèi)科