文 靜，袁小紅，劉 卓

(1.西南科技大學城市學院，四川綿陽 621000；2.西南科技大學生命科學與工程學院，四川綿陽 621000)

?

夾竹桃的化學成分研究

文 靜1，袁小紅2*，劉 卓2

(1.西南科技大學城市學院，四川綿陽 621000；2.西南科技大學生命科學與工程學院，四川綿陽 621000)

[目的]研究夾竹桃中的化學成分。[方法]采用硅膠柱、Sephadex LH-20色譜法等進行分離純化，并根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜特征鑒定了夾竹桃的化學結(jié)構(gòu)。[結(jié)果]從夾竹桃中分離得到5個化合物，經(jīng)過波譜解析確定化合物分別為(+)-羽扇豆醇、β-谷甾醇、槲皮素-3-O-洋槐苷、蘆丁和夾竹桃苷。[結(jié)論]該研究為夾竹桃的應用與開發(fā)奠定基礎(chǔ)。

夾竹桃；化學成分；分離

夾竹桃(NeriumindicumMill)是一種廣泛分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)的觀賞植物，在我國各地區(qū)均有栽植[1]。夾竹桃的葉、皮、根、花中含有多種生物活性成分，具有強心、利尿、抗癌、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗菌、消炎、化感等功能[2]，這些作用與夾竹桃中所含化學成分密切相關(guān)。夾竹桃化學成分的分析方法主要包括薄層色譜法、高效液相色譜法、氣-質(zhì)聯(lián)用法(GC-MS)和液-質(zhì)聯(lián)用法(LC-MS)等。Ali 等采用 GC-MS 技術(shù)對夾竹桃花的精油成分進行分析，共檢測出 64 種化合物[3]。國內(nèi)外研究者主要采用 LC-MS 技術(shù)分析鑒定夾竹桃中的夾竹桃苷以及相關(guān)化合物[4]。該試驗利用硅膠柱和核磁共振(NMR)技術(shù)，對夾竹桃葉甲醇提取物中的化學成分進行分離純化和結(jié)構(gòu)鑒定，以期為深入開發(fā)夾竹桃資源提供試驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象夾竹桃藥材采自于四川，經(jīng)西南科技大學候大斌教授鑒定為夾竹桃(NeriumindicumMill)的葉。

1.2 儀器Bruker Avance-600型核磁共振儀(德國布魯克公司，TMS為內(nèi)標)。

1.3 試劑柱層析用硅膠(60～100目、200～300目，青島海洋化工廠)；反相硅膠(0.040～0.075 mm，YMC公司)；Sephadex LH20(AmershamPhar-macia Biotech AB 公司)；試劑均為市售分析純。

1.4 試驗方法稱取10 kg夾竹桃干燥葉粗粉，用50 L 80%乙醇60 ℃加熱回流提取3次，每次4 h，合并，回收乙醇，再用乙酸乙酯萃取3次，10 L/次，合并，蒸干，得浸膏1 kg。浸膏用80%乙醇加熱溶解，放冷至室溫，過濾蒸干濾液得浸膏250 g。浸膏經(jīng)硅膠柱層析(石油醚氯仿2∶1-1∶1梯度洗脫)，得到A1-A4。A1部分經(jīng)硅膠柱層析(石油醚丙酮8∶1-3∶1梯度洗脫)，溶于丙酮，析出結(jié)晶，分別得到化合物1和化合物2；A2部分經(jīng)硅膠柱層析(石油醚乙酸乙酯2∶1-1∶1梯度洗脫)，得到B1-B5。B4部分經(jīng)硅膠柱層析(氯仿甲醇10∶1-1∶1梯度洗脫)，得到化合物3和化合物4；B5部分經(jīng)LH20柱層析(丙酮洗脫)，再反相柱層析(50%～100%乙腈水梯度洗脫)，溶于乙腈，析出結(jié)晶，得到化合物5。

2 結(jié)果與分析

2.1 化合物1白色針晶，其1H-NMR與文獻報道(+)-羽扇豆醇吻合，且其Rf值與標準品一致，所以化合物1鑒定為(+)-羽扇豆醇[5]。

2.2 化合物2白色針晶，其1H-NMR與文獻報道β-谷甾醇數(shù)據(jù)吻合，且其Rf值與標準品一致，所以化合物2鑒定為β-谷甾醇(β-sitosterol)[6]。

2.3 化合物3黃色針晶，1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)的化學位移δ分別為12.61(1H，s，5-OH)、7.84(1H，dd，J=8.7，2.3 Hz，H-6′)、7.61(1H，d，J=2.4 Hz，H-2′)、6.80(1H，d，J=8.9 Hz，H -5′)、6.42(1H，d，J=2.1 Hz，H -8)、6.20(1H，d，J= 2.2 Hz，H-6)、5.33(1H，d，J=7.6 Hz，H -1″)、4.44(1H，s，H-1?)、1.05(3H，d，J=6.3 Hz，H3-6?)；13C-NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ分別為177.1(C-4)、164.9(C-7)、161.5(C-5)、156.0(C-9)、156.1(C-2)、148.7(C-4′)、144.9(C-3′)、133.2(C-3)、121.7(C-6′)、121.0(C-1′)、116.4(C-5′)、115.6(C-2′)、103.2(C-10)、102.8(C-1″)、100.7(C-1?)、98.9(C-6)、93.1(C-8)、73.5(C-5″)、73.2(C-3″)、71.7(C-4?)、71.5(C-2″)、70.4(C-3?)、70.8(C-2?)、68.9(C-4″)、68.7(C-5?)、65.9(C-6″)、17.3(C-6?)。以上數(shù)據(jù)與文獻[7]報道一致，故鑒定為槲皮素-3-O-洋槐苷。

2.4 化合物4黃色針晶，1H-NMR(DMSO-d6，600 MHz)δ分別為12.63(1H，s，5-OH)、10.80(1H，s，7-OH)、9.65(1H，s，4′-OH)、9.13(1H、s，3′-OH)、7.57(2H，m，H -2′，6′)、6.81(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)、6.43(1H，d，J=2.2 Hz，H-8)、6.23(1H，d，J=2.1 Hz，H-6)、5.36(1H，d，J=7.3 Hz，H -1″)、4.39(1H，s，H-1?)、0.97(3H，d，J=6 Hz，H 3 -6?)；13 C-NMR(DMSO-d6，150 MHz)δ分別為177.6(C-4)、164.1(C-7)、161.4(C-5)、156.9(C-9)、156.3(C-2)、148.7(C-4′)、144.9(C-3′)、133.1(C-3)、121.2(C-6′)、120.9(C-1′)、115.9(C-5′)、115.5(C-2′)、103.8(C-10)、101.9(C-1″)、101.3(C-1?)、98.1(C-6)、93.2(C-8)、76.9(C-3″)、76.1(C-5″)、74.4(C-2″)、71.6(C-4?)、70.2(C-3?)、70.9(C-2?)、69.8(C-4″)、68.4(C-5? )、67.1(C-6″)、17.9(C-6? )。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道一致，故鑒定為蘆丁。

2.5 化合物5白色針形晶體，1H-NMR(Methonal-d4，600 MHz)δ分別為5.45(1H，td，J=20.5，2.3 Hz，H-16)、5.03(1H each,dd,J=20.1,1.7 Hz,H-21a,21b)、4.93(1H each，dd，J=20.1，1.7 Hz，H-21a，21b)、3.92(1H，br s，H-3)、3.67(1H，m，3′-H)、3.47(1H，m，4′-H)、3.45( 3 H，s，OMe)、3.24(1H，d，J=8.9 Hz，H-17)、1.93(3 H，s，COCH3)、0.97(3H，s，H-18)、0.95(3H，s，H-19)；13C-NMR(Methonal-d4，150 MHz)δ分別為176.5(C-23)、172.0(C-20)、171.4(OCO-CH3)、122.1(C-22)、97.2(C-1′)、84.7(C-14)、79.4(C-3′)、77.5(C-21)、77.3(C-16)、75.8(C-3)、72.9(C-5′)、69.9(C-4′)、57.3(C-17)、57.2(-OCH3)、51.1(C-13)、42.3(C-18)、41.1(C-15)、39.8(C-12)、37.8(C-5)、36.1(C-2′)、36.4(C-19)、36.2(C-10)、31.6(C-4)、30.7(C-1)、27.9(C-2)、27.5(C-6)、24.1(C-19)、22.0(C-11)、21.7(C-7)、20.9(OCO-CH3)、18.4(C-6′)、16.1(C-18)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道一致，故鑒定為夾竹桃苷。

3 結(jié)論

采用硅膠柱、Sephadex LH-20色譜法等進行分離純化，并根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜特征鑒定了夾竹桃的化學結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明，從夾竹桃中分離得到5個化合物，經(jīng)過波譜解析確定化合物分別為(+)-羽扇豆醇、β-谷甾醇、槲皮素-3-O-洋槐苷、蘆丁和夾竹桃苷。

[1] SIDDIQUI B S，KHATOON N，BEGUM S，et al.Flavonoid and cardenolide glycosides and a pentacyclic triterpene from the leaves of Nerium oleander and evaluation of cytotoxicity [J].Phytochemistry，2012，77：238-244.

[2] 郭春雨.夾竹桃葉中的甾體類化學成分及其細胞毒活性的研究[D].上海：華東理工大學，2010：1-11

[3] ALI H F M，EL-ELLA F M A，NASR N F.Screening of chemical analysis，antioxidant antimicrobial and antitumor activities of essential oil of oleander (Nerium oleander)flower [J].Journal of Biological Chemistry，2010，4(4)：190-202.

[4] WANG X M，PLOMLEY J B，NEWMAN R A，et al.LC / MS / MS analysis of an oleander extract for cancer treatment [J].Analytical Chemistry，2000，72(15)：3547-3552.

[5] YANG G F，HAO G L，MENG S Q.A review of pharmacological activity of alkaloids inSophoraflavence[J].Heilongjiang Medicine and Pharmacy，2004，17(1)：41-42.

[6] 羅永明，劉愛華，余邦偉，等.中藥草珊瑚的化學成分研究[J].中國藥學雜志，2005，40(17)：1296-1298.

[7] 章光文，周國平，謝二磊，等.山香圓葉中黃酮類成分研究[J].中國中藥雜志，2009，34(12)：1603-1604.

[8] 王祝舉，唐力英，付梅紅，等.夏枯草中的黃酮類化合物研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19(8)：1966-1967.

[9] BANERJEE A A，VASU K K，PANCHOLI H，et al.Detoxification ofNeriumindicumroots based on Indian system of medicine：phytochemical and toxicity evaluations [J].Acta Poloniae Pharmaceutica，2011，68(6)：905-911.

Study on the Chemical Constituents ofNeriumindicumMill

WEN Jing1, YUAN Xiao-hong2*, LIU Zhuo2

(1. City College,Southwest University of Science and Technology, Mianyang,Sichuan 621000;2. School of Life Science and Engineering, Southwest University of Science and Technology, Mianyang,Sichuan 621000)

[Objective] The research aimed to study the chemical constituents ofNeriumindicumMill. [Method]Compounds fromNeriumindicumMill were isolated by silica gel and Sephadex LH-20 column, and identified by physicochemical data and spectral methods..[Result]Five compounds were isolated and identified as lupeol, sitosterol, 3-O-robinobioside, rutin and oleandrin.[Conclusion] The study lay a foundation for the application and development ofNeriumindicumMill.

NeriumindicumMill;Chemical constituents;Isolation

文靜(1994- )，女，四川成都人，?？粕?，專業(yè)：城鎮(zhèn)規(guī)劃。*通訊作者，教授，碩士生導師，從事植物化學研究。

2015-02-05

S 567

A

0517-6611(2015)09-065-02