艾小慶　李永川　劉玉嵚　青措吉　(青海紅十字醫(yī)院婦三科，青?！∥鲗帯?10000)

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子宮內(nèi)膜樣腺癌中低氧誘導(dǎo)因子-1α、-2α和Survivin的表達(dá)

艾小慶李永川劉玉嵚青措吉(青海紅十字醫(yī)院婦三科，青海西寧810000)

〔摘要〕目的檢測子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α、2α和生存素(Survivin)的表達(dá)特征。方法64例子宮內(nèi)膜樣腺癌患者的臨床資料和術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，56例子宮脫垂行子宮全切術(shù)后的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組。應(yīng)用免疫組化SP法檢測兩組中HIF-1α、-2α和Survivin的表達(dá)。結(jié)果兩組中HIF-1α、-2α和Survivin表達(dá)的陽性率差別顯著。觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的陽性率均與腫瘤最大徑及肌層浸潤深度密切相關(guān)，HIF-1α、-2α的表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)。線性相關(guān)分析顯示觀察組中HIF-1α和Survivin、HIF-2α和Survivin的表達(dá)具有正相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中HIF-1α、-2α和Survivin高表達(dá)，三者對(duì)促進(jìn)腫瘤的形成和進(jìn)展均有重要作用。HIF-1α、-2α均與Survivin有協(xié)同正向作用。

〔關(guān)鍵詞〕子宮內(nèi)膜樣腺癌;低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α; HIF-2α; Survivin;免疫組化

低氧誘導(dǎo)因子(HIF)-1α和-2α是細(xì)胞為了適應(yīng)低氧條件而產(chǎn)生的核轉(zhuǎn)錄因子，它在多種人類腫瘤中的表達(dá)升高〔1，2〕。HIF-1α和-2α的大量表達(dá)可以增加腫瘤細(xì)胞的侵襲性和降低腫瘤細(xì)胞對(duì)放、化療藥物的敏感性〔3〕。生存素(Survivin)與腫瘤的凋亡和形成有關(guān)，也是腫瘤進(jìn)展中重要的調(diào)節(jié)蛋白〔4〕。本實(shí)驗(yàn)探討子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中HIF-1α、-2α和Survivin的表達(dá)特征，分析三者在不同臨床病理特征中的差別及相關(guān)性。

1　資料與方法

1. 1一般資料2013年1月至2014年12月行子宮內(nèi)膜樣腺癌手術(shù)根治患者的臨床資料及術(shù)后蠟塊組織作為觀察組，共64例，納入均經(jīng)病理醫(yī)師按WHO中子宮內(nèi)膜樣腺癌的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。年齡43～86歲，平均(62. 6±7. 6)歲。56例子宮脫垂行子宮全切術(shù)后的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組，年齡45～87歲，平均(60. 9±7. 9)歲。兩組一般資料差別無顯著性。

1. 2 HIF-1α、-2α和Survivin的檢測方法HIF-1α、-2α和Survivin抗體均應(yīng)用0. 1 ml的濃縮液。先行預(yù)實(shí)驗(yàn)，選擇最理想的配比濃度用在正式實(shí)驗(yàn)。兩組正式實(shí)驗(yàn)中HIF-1α、-2α和Survivin的檢測均應(yīng)用免疫組化SP法，嚴(yán)格按說明書進(jìn)行操作，減少誤差，做好免疫組化的質(zhì)控。

1. 3 HIF-1α、-2α和Survivin結(jié)果的判讀標(biāo)準(zhǔn)HIF-1α、-2α和Survivin的陽性部位均定位在細(xì)胞質(zhì)，以染成棕黃色為陽性細(xì)胞。選擇上皮細(xì)胞集中的區(qū)域進(jìn)行計(jì)數(shù)，選擇10個(gè)高倍視野(400倍)，計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞的百分率，取平均值，以＜10%定為陰性，以≥10%定為陽性。

1. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SAS6. 12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)或線性相關(guān)分析。

2　結(jié)果

2. 1兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率的比較兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率差別顯著(P＜0. 000 1)。見表1。

表1　兩組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性率比較〔n(%)〕

2. 2觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin在不同臨床特征中的比較觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的陽性率均與腫瘤最大徑及肌層浸潤深度密切相關(guān)，HIF-1α、-2α的表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)。見表2。

表2　觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin陽性表達(dá)在不同臨床特征中的比較〔n(%)〕

2. 3觀察組中HIF-1α、-2α和Survivin的相關(guān)性觀察組中HIF-1α和Survivin(r = 0. 48，P = 0. 029 1)、HIF-2α和Survivin(r=0. 46，P=0. 018 0)的表達(dá)具有正相關(guān)性。

3　討論

子宮內(nèi)膜樣腺癌是由子宮內(nèi)膜發(fā)生的原發(fā)性上皮性惡性腫瘤，伴有腺體分化、具有浸潤子宮肌壁及遠(yuǎn)處擴(kuò)散的潛能。病變時(shí)腫瘤呈一系列組織分化，經(jīng)典學(xué)說認(rèn)為其由非典型復(fù)雜性增生轉(zhuǎn)變而來，現(xiàn)在認(rèn)為除了復(fù)雜性增生，單純性增生伴有非典型增生的腺體也可能引起腫瘤的形成。腺體由單層或假復(fù)層柱狀細(xì)胞被覆，并以其長軸垂直排列于基底膜上，腫瘤細(xì)胞核輕度增大并具有一定的極向。當(dāng)腺體分化減少并被實(shí)性巢或成片的細(xì)胞取代時(shí)，腫瘤表達(dá)為低分化，也有學(xué)者〔5〕認(rèn)為此時(shí)腫瘤為高級(jí)別的狀態(tài)，侵襲性和惡性程度均明顯升高。病變形成過程中，腫瘤表現(xiàn)為蛋白表達(dá)的失調(diào)，其中與缺氧相關(guān)的蛋白表達(dá)異常較為明顯。HIF-1α、-2α是HIFs家族的重要成員，廣泛存在〔6，7〕。目前認(rèn)為HIF-1α、-2α是腫瘤生長的正向調(diào)節(jié)因子，其可能調(diào)節(jié)機(jī)制包括:①轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)和蛋白穩(wěn)定;②蛋白的磷酸化水平〔8，9〕;③氧依賴的HIF-α降解;④配體的結(jié)合能力和在細(xì)胞內(nèi)的定位。缺氧的條件對(duì)正常細(xì)胞的生長是不利的，然而對(duì)于腫瘤細(xì)胞，缺氧的條件則會(huì)對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生不同的影響。首先，缺氧的條件可以導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生長受到抑制，繼而出現(xiàn)局部壞死等表現(xiàn)〔10，11〕。其次，腫瘤內(nèi)部的一些缺血缺氧部位的細(xì)胞生長受到抑制〔12〕。HIF-1α、-2α高表達(dá)時(shí)可以引起血管內(nèi)皮生長因子分泌增多，并可以引起腫瘤間質(zhì)的血管生成增多，進(jìn)而使腫瘤組織供氧增多，有利于腫瘤的生長〔13〕。Survivin基因定位于17q25，編碼含有142個(gè)氨基酸，分子量16. 5 kD。其發(fā)揮作用是通過效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體1來調(diào)節(jié)凋亡進(jìn)程的〔14〕。近年來顯示Survivin的作用可能更多，如對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖的調(diào)控作用，對(duì)血管生成的誘導(dǎo)作用等〔15，16〕。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示HIF-1α、-2α和Survivin高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成和進(jìn)展重要因素。HIF-1α、-2α和Survivin高表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的生長，使腫瘤的生長加速，腫瘤的體積增大。HIF-1α、-2α和Survivin高表達(dá)時(shí)可以促進(jìn)腫瘤侵襲生長，使腫瘤的浸潤能力增強(qiáng)。HIF-1α、-2α高表達(dá)時(shí)可以使腫瘤的分化低，腫瘤的異型性明顯，細(xì)胞更幼稚。HIF-1α、-2α均可能與Survivin具有協(xié)同正向作用。HIF-1α/Survivin、HIF-2α/Survivin的協(xié)同作用可能和橋接通路有關(guān)〔17〕，如HIF-1α、-2α和Survivin均可以對(duì)血管內(nèi)皮生長因子有明顯作用，因此VEGF可能是其協(xié)同作用的中介蛋白〔18，19〕，但是具體機(jī)制有待更多實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)。

綜上，子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中HIF-1α、-2α和Survivin高表達(dá)，三者對(duì)促進(jìn)腫瘤的形成和進(jìn)展均有重要作用。HIF-1α、-2α均與Survivin有協(xié)同正向作用。

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〔2014-07-19修回〕

(編輯苑云杰)

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015)20-5821-02;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 066

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔中圖分類號(hào)〕R737. 33

第一作者:艾小慶(1981-)，女，主治醫(yī)師，主要從事婦產(chǎn)科疾病研究。