張曉勇　魏琳琳　(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧　錦州　121000)

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子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中claudin3、7和E-cadherin的表達(dá)及關(guān)系

張曉勇魏琳琳(遼寧醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧錦州121000)

〔摘要〕目的檢測(cè)子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中claudin3蛋白(claudin3)、claudin7蛋白(claudin7)和上皮型鈣黏素(E-cadherin)的表達(dá)，關(guān)注其相關(guān)性。方法63例子宮內(nèi)膜樣腺癌患者臨床資料及術(shù)后標(biāo)本作為觀察組，46例子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生患者的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組1，46例子宮內(nèi)膜單純性增生患者的子宮內(nèi)膜作為對(duì)照組2。應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)3組claudin3、7和E-cadherin的表達(dá)。結(jié)果3組中claudin3、7和E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性率差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組中claudin3、7和E-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤最大徑、肌層浸潤(rùn)深度及脈管內(nèi)瘤栓相關(guān)。claudin3、7與腫瘤的分化程度相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中claudin3和E-cadherin、claudin7和E-cadherin均具有正相關(guān)性。結(jié)論子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中claudin3、7和E-cadherin低表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤性病變的形成及進(jìn)展有一定意義，三者可能具有協(xié)同作用。

〔關(guān)鍵詞〕子宮內(nèi)膜樣腺癌; claudin3; claudin7; E-cadherin

子宮內(nèi)膜樣腺癌是女性生殖道常見(jiàn)的侵襲性癌，發(fā)病高峰年齡是55～65歲。腫瘤進(jìn)展中細(xì)胞間的黏附力丟失常導(dǎo)致細(xì)胞連接的破壞，腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)〔1〕。緊密連接是正常上皮細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的關(guān)鍵結(jié)構(gòu)，緊密連接的完整性直接影響細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)攝取、細(xì)胞增殖的遷移，而claudins家族是緊密連接的封閉蛋白〔2〕。claudin3蛋白(claudin3)、claudin7蛋白(claudin7)是家族中的重要蛋白，對(duì)調(diào)控上皮細(xì)胞的黏附、極性及微環(huán)境均有重要作用〔3，4〕。上皮型黏附素(E-cadherin)是細(xì)胞黏附的重要蛋白，正常情況下高表達(dá)，可以維持上皮細(xì)胞間的結(jié)構(gòu)、信息傳遞的功能〔5〕。本文擬分析子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織claudin3、7和E-cadherin的表達(dá)及相關(guān)性。

1　資料與方法

1. 1臨床資料2012年1月至2014年12月在我院行手術(shù)根治的子宮內(nèi)膜樣腺癌患者作為觀察組，術(shù)后常規(guī)留取蠟塊組織，并經(jīng)病理醫(yī)師閱片復(fù)診，同時(shí)符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，共63例，年齡37～79歲，平均(62. 1±7. 9)歲。46例子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生患者的子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照組1，年齡40～70歲，平均(60. 9±6. 8)歲。46例子宮內(nèi)膜單純性增生患者的子宮內(nèi)膜作為對(duì)照組2，年齡42～75歲，平均(59. 6±7. 5)歲。3組年齡無(wú)明顯差異。

1. 2 claudin3、7和E-cadherin的檢測(cè)應(yīng)用免疫組化SP法，應(yīng)用DAB顯色，嚴(yán)格按實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行，做好質(zhì)控工作。

1. 3 claudin3、7和E-cadherin結(jié)果的判定方法claudin3、7均以細(xì)胞膜和(或)細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，E-cadherin以細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞，選擇5個(gè)染色較為集中的上皮細(xì)胞區(qū)域進(jìn)行觀察，取其平均值，以≥10%為陽(yáng)性，以＜10%為陰性，計(jì)算陽(yáng)性率。

1. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SAS6. 12軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)和線性相關(guān)性分析。

2　結(jié)果

2. 1三組中claudin3、7和E-cadherin表達(dá)的比較對(duì)照組2、對(duì)照組1和觀察組中claudin3、7和E-cadherin的表達(dá)依次下降(P＜0. 000 1)。見(jiàn)表1。

2. 2 claudin3、7和E-cadherin在不同臨床特征中的表達(dá)觀察組中claudin3、7和E-cadherin表達(dá)的陽(yáng)性率與腫瘤的最大徑、肌層浸潤(rùn)深度及脈管內(nèi)瘤栓相關(guān)，claudin3、7與腫瘤的分化程度相關(guān)。見(jiàn)表2。

表1　三組中claudin3、7和E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)的比較〔n(%)〕

表2　觀察組claudin3、7和E-cadherin在不同臨床特征中的陽(yáng)性表達(dá)〔n(%)〕

2. 3觀察組中claudin3、7和E-cadherin的相關(guān)性觀察組中claudin3和E-cadherin(r=0. 51，P=0. 036 4)、claudin7和E-cadherin(r=0. 49，P=0. 046 5)均具有正相關(guān)性。

3　討論

子宮內(nèi)膜樣腺癌占子宮內(nèi)膜癌的90%，腫瘤常由癌前期病變發(fā)展而來(lái)，如子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生〔6〕。腫瘤形成后組織學(xué)上以明確的腺體被覆以惡性的上皮細(xì)胞為特征。腺體常表現(xiàn)為篩狀生長(zhǎng)、缺乏單個(gè)腺體完整性、呈絨毛腺管狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)腫瘤分化程度較低時(shí)，可見(jiàn)完整腺體與惡性細(xì)胞實(shí)性片狀混合，細(xì)胞伴有更多的異型性，腫瘤的侵襲性更明顯〔7〕。無(wú)論哪種結(jié)構(gòu)及生物學(xué)行為變化，細(xì)胞間緊密連接均在細(xì)胞極性方面有異常。claudin3和7是構(gòu)成緊密連接的骨架蛋白，可以維持緊密連接所特有的柵欄和屏障功能〔8，9〕。也有研究顯示claudin3、7的表達(dá)有高度的組織學(xué)特異性，腫瘤通常會(huì)伴隨著緊密連接的破壞而發(fā)生，此時(shí)腫瘤細(xì)胞的侵襲力增強(qiáng)及細(xì)胞間黏附減弱〔10〕。癌細(xì)胞常缺乏高度有序的特性，當(dāng)腫瘤性進(jìn)展時(shí)，緊密連接完整性破壞，可能是導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)因子及其他因子擴(kuò)散的原因〔11〕。細(xì)胞黏附既有連接結(jié)構(gòu)的參與，也有黏附分子的協(xié)同作用，claudin3、7的潛在作用在于限制支持癌細(xì)胞的營(yíng)養(yǎng)因子和生長(zhǎng)因子的供應(yīng)，在惡性腫瘤中失去緊密連接蛋白claudin3、7在膜上的定位，這也是腫瘤發(fā)展進(jìn)程中的關(guān)鍵〔12，13〕。E-cadherin是介導(dǎo)同型細(xì)胞相互黏附的跨膜糖蛋白，含16個(gè)外顯子和15個(gè)內(nèi)含子〔14〕。E-cadherin廣泛分布于胚胎組織和成熟組織的上皮細(xì)胞中，除具有調(diào)節(jié)胚胎組織的發(fā)育、組織形成、參與細(xì)胞與細(xì)胞間信息傳遞交流等作用外，對(duì)促進(jìn)細(xì)胞黏附、維持上皮形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整性也至關(guān)重要〔15，16〕。

本研究提示claudin3、7和E-cadherin三種蛋白低表達(dá)在上皮細(xì)胞癌變及進(jìn)展過(guò)程中起重要的促進(jìn)作用。三種蛋白表達(dá)丟失或下降是促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)的重要因素。三種蛋白異常表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤向肌層及更遠(yuǎn)隔的部位侵襲。三種蛋白對(duì)腫瘤經(jīng)脈管播散有重要的促進(jìn)作用。claudin3、7參與腫瘤細(xì)胞由幼稚到成熟的過(guò)程中，可能對(duì)細(xì)胞的異常分化有重要的調(diào)節(jié)作用，claudin3、7可能是一種多功能蛋白。claudin3、7均與E-cadherin為主的黏附調(diào)節(jié)有協(xié)同作用，這也是腫瘤細(xì)胞遷移及播散的基礎(chǔ)〔17〕。在腫瘤性因素的作用下，緊密連接程度丟失，細(xì)胞間的黏附力下降，腫瘤細(xì)胞間的連接松散，不僅易于離開原發(fā)灶，還易于進(jìn)入周圍間質(zhì)中的脈管，使其對(duì)轉(zhuǎn)移潛能升高，形成浸潤(rùn)灶和轉(zhuǎn)移灶，腫瘤的惡性程度增加，預(yù)后不理想〔18〕。綜上，子宮內(nèi)膜樣腺癌術(shù)后組織中claudin3、7和E-cadherin低表達(dá)對(duì)促進(jìn)腫瘤性病變的形成及進(jìn)展有一定意義，三者可能具有協(xié)同作用。

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〔2014-07-09修回〕

(編輯苑云杰)

〔文章編號(hào)〕1005-9202(2015)20-5813-03;

doi:10. 3969/j. issn. 1005-9202. 2015. 20. 062

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔中圖分類號(hào)〕R737

第一作者:張曉勇(1971-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事婦科腫瘤研究。