趙曉麗　馬艷

[摘要] 目的 對不同廠家的復(fù)方丹參片中的三七皂苷含量進行分析，為臨床藥物廠商制藥改進和監(jiān)管部門加強監(jiān)管提供依據(jù)。 方法 采用HPLC法（高效液相色譜法）測定廣州白云山制藥、廣西日田藥業(yè)、安徽華佗國藥廠、通化頤生藥業(yè)、濟南宏濟堂制藥、長春新安藥業(yè)、北京北衛(wèi)藥業(yè)、吉林省百年六福堂藥業(yè)八個不同廠家復(fù)方丹參片中三七皂苷的含量，并比較不同廠家含量的差異性。 結(jié)果 八個廠家的復(fù)方丹參片中三七皂苷的含量分別為0.154%、0.175%、0.7773%、0.8311%、1.3297%、1.3912%、1.5217%、3.1245%，各廠家復(fù)方丹參片不同批號間三七皂苷含量無統(tǒng)計學(xué)差異，不同廠家復(fù)方丹參片中三七皂苷類含量具有顯著性差異，但含量普遍較低。 結(jié)論 各廠家應(yīng)提高復(fù)方丹參片中三七皂苷的含量，相關(guān)醫(yī)藥監(jiān)管部門應(yīng)加大該藥的規(guī)范生產(chǎn)力度，提高藥物中三七皂苷的含量，以更好的應(yīng)用于臨床。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)方丹參片；三七皂苷；高效液相色譜法；質(zhì)量標準

[中圖分類號] R286.0 [文獻標識碼] A [文章編號] 2095-0616（2015）19-75-04

[Abstract] Objective To analyze the content of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets of different manufactures and to provide references for the pharmaceutical improvement of clinical drug manufacturers and strengthening supervision of supervision departments. Methods The content of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets of 8 different manufactures including Guangzhou Baiyun Mountain Pharmaceutical，Guangxi Ritian Pharmaceutical，Anhui Hua Tuo Pharmaceutical Factory，Tonghua Yisheng Pharmaceutical，Jinan Hongjitang Pharmaceutical，Changchun Xinan Pharmaceutical，BeijingNorth Wei Pharmaceutical and Jilin Hundred-year Luk Fook Tong Pharmaceutical were detected by high performance liquid chromatography （HPLC） and differences in contents of manufactures were compared. Results Contents of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets of 8 different manufactures were 0.154%，0.175%，0.7773%，0.8311%，1.3297%，1.3912%，1.5217% and 3.1245% respectively.The content of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets of different batch numbers of one manufacture had no statistical difference.Contents of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets of different manufactures had significant differences but contents were commonly low. Conclusion Manufacturers should improve the content of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets and relevant drug supervision departments should strengthen the intensity of standardization of the drug production to improve the content of panax notoginseng saponins in compound salvia tablets in order to achieve a better clinical application.

[Key words] Compound salvia tablets；Panax notoginseng saponins；HPLC；Quality Standard

復(fù)方丹參片作為傳統(tǒng)的中藥制劑，多成分、多靶點是其主要特點[1]，由丹參、三七和冰片三種藥組成，臨床上具有擴張冠脈、保護心肌、抗心律失常、降血脂等藥理作用，在治療心腦血管系統(tǒng)疾病有明顯作用[2-3]。三七是組成復(fù)方丹參片的重要藥物，三七的主要有效成分是人參皂苷Rg1、人參皂苷Rb1、三七皂苷R1，筆者從事藥物檢驗研究多年，發(fā)現(xiàn)有廠家在制劑生產(chǎn)過程中為降低成本偷工減料而降低三七皂苷含量[4]，致使藥品質(zhì)量和療效產(chǎn)生很大得差異，現(xiàn)為全面考察復(fù)方丹參片的質(zhì)量狀況，采用HPLC法，對八個不同廠家的復(fù)方丹參片中三七皂苷類成分進行對比研究，過程概述如下。endprint

1 儀器與試藥

1.1 儀器與試劑

安捷倫1260高效液相色譜儀（ 250mm× 4.6mm，5μm），BP211D型電子分析天平（上海樹信儀器儀表有限公司），F(xiàn)W-80型高速萬能粉碎機（鶴壁市鑫天鶴儀器儀表有限公司），電熱恒溫水浴鍋（天津因特萊斯儀器有限公司）。對照品：三七皂苷（批號：110745-201318），中國食品藥品檢定研究院提供。

1.2 藥品分析來源

廣州白云山制藥、廣西日田藥業(yè)、安徽華佗國藥廠、通化頤生藥業(yè)、濟南宏濟堂制藥、長春新安藥業(yè)、北京北衛(wèi)藥業(yè)、吉林省百年六福堂藥業(yè)八個廠家所生產(chǎn)的各三個批次的復(fù)方丹參片作為質(zhì)量研究的樣品。

2 試驗方法

2.1 色譜準備

色譜柱：Thermo-C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.05%磷酸溶液梯度洗脫；流速1.0mL/min；柱溫17℃，紫外線檢測波長：203nm，進樣量為20μL。

2.2 試驗配置

對照品三七皂苷配置：稱取對照品3.0mg，加甲醇得 61.00μg/mL。

不同廠家復(fù)方丹參片試驗品溶液的制備：糖衣片刮去糖衣，研細（過篩），精密0.5g，加入乙醚10mL，超聲5min，過濾，濾渣揮干溶劑，稱重，過夜，置80℃水浴2h，精密吸取上清液1.00mL，加于StrataTMC18-E固相萃取小柱上進行洗脫，收集洗脫液，水浴蒸干，用甲醇補足丟失，充分混合，濾過，取濾液。

陰性對照配置：按2010版藥典[5]中復(fù)方丹參片處方，取除三七外的剩余藥材制成缺三七的陰性對照品，按上述不同廠商的復(fù)方丹參片的試驗溶液配置方案進行配置。

2.3 標準曲線

三七皂苷：取標準對照品溶液，分別稀釋成82，60、62.35、43.25、32.15、20.25、12.25μg/mL的對照品溶液，進樣，按2.1中條件所述測定峰面積。坐標中以信號強度為Y軸，三七皂苷質(zhì)量濃度為X軸繪成曲線，求得Y=1004.4X-0.7496。r=0.9994，線性范圍12.25～82.60μg/mL。見圖1。

2.4 精密度分析

取對照品溶液20μL，五次進樣，測峰面積，計算RSD，得0.51%，表明精密度良好。

2.5 穩(wěn)定性分析

將2.2項下制備的試驗品溶液，24h 內(nèi)每隔4h測定峰面積。峰面積RSD為 0.21%，表明在一天內(nèi)測定是穩(wěn)定準確的。

2.6 重復(fù)性分析

將2.2項下制備的試驗品溶液，平行處理6份，按照應(yīng)用高效液相色譜法測定峰面積。得峰面積RSD為0.81%，說明重復(fù)性復(fù)合要求。

2.7 樣品檢測

將2.2項下制備試驗品溶液，按照2.1項下色譜條件測定，計算樣品含量，每個廠家的三個批次的三七皂苷成分計算取平均值，然后將每個廠家的平均測定值進行對比研究。

2.8 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)整理和分析，對八個廠家生產(chǎn)的復(fù)方丹參片的三七皂苷含量進行聚類分析，并繪制樹狀圖，廠內(nèi)不同批次之間進行組內(nèi)方差檢測，應(yīng)用SNK檢驗法對各個廠家的樣本均值含量兩兩比較，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 含量比較

8個不同廠家復(fù)方丹參片中三七皂苷含量平均值比較，F(xiàn)=155.231，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

3.2 SNK檢驗結(jié)果

北京北衛(wèi)藥業(yè)、濟南宏濟堂與長春新安藥業(yè)復(fù)方丹參片皂苷類含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），安徽華佗、通化頤生藥業(yè)樣品皂苷類含量兩兩比較后差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），廣州白云山制藥與廣西日田藥業(yè)樣品皂苷類含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），其余各廠家兩兩之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

4 討論

復(fù)方丹參片中三七藥材的比例僅次于丹參，是該復(fù)方制劑的重要成分[6-7]，2010年版《中國藥典》[8]只規(guī)定了丹酚酸B、丹參酮ⅡA的含量限度，對三七皂苷的則無具體限定，而三七皂苷具有肝腎功能保護、抗肺纖維化等作用[9-10]，其成分的含量比例意義重大，故分析三七皂苷類成分含量在復(fù)方丹參片質(zhì)量控制上具有重要的臨床意義。

實驗結(jié)果顯示，同一廠家不同批號間含量無統(tǒng)計學(xué)差異，然而不同廠家差異很大，其中北京同仁堂樣品含量最高，達3.124%，吉林百年六福堂藥業(yè)生產(chǎn)的樣品，含量不足0.3%。不同廠家生產(chǎn)的三七皂苷成分相差10倍之多，這就明顯影響了復(fù)方丹參片的治療有效率。劉再娥等[12]的研究顯示建議復(fù)方丹參片中皂苷含量之和達到0.6%以上能取得較好的臨床療效。

由于同一種藥材，不同的產(chǎn)地，不同的品種（野生或栽培），不同的生長環(huán)境、土壤、氣候等的影響，使藥材的質(zhì)量差異較大，同時，如果生產(chǎn)廠家生產(chǎn)工藝及管理不當，也會造成有效成分得損失[11-13]，所以建議含量較低得廠家，應(yīng)重視藥材的來源及質(zhì)量，完善制備工藝，提供產(chǎn)品質(zhì)量。同時現(xiàn)在不乏有為降低成本而偷工減料的廠家，由于三七屬于貴細藥材，一些廠家為了降低成本，采用少投料，用劣藥來降低成本，惡意競爭[14]，對此藥品監(jiān)管部門應(yīng)引起高度重視。三七皂苷含量目前沒有一定的質(zhì)量標準[15-16]，為了臨床用藥的有效，建議新版藥典添加三七皂苷含量限度，以更好地為臨床患者服務(wù)。當然，高效液相色譜法分析復(fù)方丹參片三七皂苷類成分含量也有一定的不足，這也需要我們進行改進。

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（收稿日期：2015-07-25）endprint