王紅權(quán)，詹杰

(湖北省荊門市第二人民醫(yī)院血液風(fēng)濕免疫內(nèi)科，荊門 448000)

白芍總苷治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎藥理作用及機(jī)制

王紅權(quán)，詹杰

(湖北省荊門市第二人民醫(yī)院血液風(fēng)濕免疫內(nèi)科，荊門 448000)

近年研究表明白芍總苷(TGP)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)可取得理想療效。該文對(duì)TGP的抗炎作用、調(diào)節(jié)由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和由B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫等藥理作用，及治療RA的機(jī)制，如TGP對(duì)白細(xì)胞介素(IL)-1的抑制作用，TGP對(duì)IL-2的雙向調(diào)節(jié)作用，TGP對(duì)IL-17的調(diào)節(jié)作用，TGP對(duì)腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的抑制作用，TGP對(duì)核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)活化的調(diào)控作用，TGP對(duì)關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞增殖的抑制作用等予以綜述。

白芍總苷；關(guān)節(jié)炎，類風(fēng)濕；細(xì)胞因子

白芍總苷(total glucosides of Peony，TGP)是從傳統(tǒng)中藥白芍(PaeonialactifloraPall.)中提取的有效成分，其藥效成分單體主要為一組單萜糖苷類物質(zhì)，包括芍藥苷(paeoniflorin，PF)、芍藥內(nèi)酯苷(albiflorin)、羥基芍藥苷(oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍藥苷(benzoylpaeoniflorin)，其中PF是主要有效活性成分[1-2]，約占90%以上。有資料表明，TGP除具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗應(yīng)激、保肝等作用外，還能多途徑有效抑制自身免疫反應(yīng)，對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)有確切療效，且安全、不良反應(yīng)少[3-4]。TGP是具有較好應(yīng)用前景的、改善病情的植物類慢作用抗風(fēng)濕藥。筆者對(duì)TGP治療RA的藥理作用及其機(jī)制進(jìn)行綜述。

1 TGP治療RA的藥理作用

1.1 抗炎作用 對(duì)于實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型，如膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎(collagen-induced arthritis，CIA)和佐劑性關(guān)節(jié)炎(adjuvant arthritis，AA)，TGP可明顯減輕和有效抑制繼發(fā)性足腫脹、關(guān)節(jié)疼痛、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎等急性炎癥反應(yīng)，并能明顯改善其關(guān)節(jié)炎癥程度[5-8]、炎性細(xì)胞浸潤和血管翳增生現(xiàn)象[9]，以及抑制關(guān)節(jié)滑膜基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)的表達(dá)及前列腺素E2(prostaglandin E2，PGE2)等炎性因子的產(chǎn)生，從而有效抑制其炎癥應(yīng)答[10]。

1.1.1 TGP對(duì)MMPs的抑制作用 MMPs在RA患者關(guān)節(jié)受損局部及滑膜高表達(dá)。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TGP大、中劑量(100，50 mg·kg-1)可顯著抑制CIA大鼠關(guān)節(jié)炎足爪中MMP-9蛋白的表達(dá)[8-9]和關(guān)節(jié)滑膜中MMP-1、MMP-3的表達(dá)[6]，均呈現(xiàn)明顯劑量依賴性。由此推測，TGP可通過調(diào)節(jié)MMPs在RA滑膜組織中的表達(dá)而減輕關(guān)節(jié)炎癥反應(yīng)，達(dá)到緩解并控制RA關(guān)節(jié)滑膜炎和對(duì)RA關(guān)節(jié)軟骨侵蝕性破壞的目的。

1.1.2 TGP對(duì)PGE2的調(diào)節(jié)作用 PGE2主要通過其受體EP2(E-prostanoid 2)和EP4介導(dǎo)興奮G蛋白(stimulatory G protein，Gs)信號(hào)通路調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate，cAMP)水平和DNA合成發(fā)揮明顯致炎及致痛作用。在體外培養(yǎng)的大鼠滑膜成纖維樣細(xì)胞(fibroblast-like synoviocytes，F(xiàn)LS)中，TGP可通過升高細(xì)胞膜EP2受體水平，改善Gs信號(hào)通路而提高FLS內(nèi)cAMP水平，從而抑制PGE2刺激致FLS過度增殖致關(guān)節(jié)滑膜炎[11]。還可通過調(diào)節(jié)CIA大鼠體內(nèi)G蛋白-AC-cAMP信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路[10]、抑制AA大鼠滑膜細(xì)胞[12]和由脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞生成PGE2[13]。在體外體系中，不同濃度TGP能不同程度地抑制由rIL-1α體外刺激下誘導(dǎo)的CIA大鼠FLS產(chǎn)生PGE2，提高cAMP表達(dá)水平，從而發(fā)揮抗炎作用[14]。

1.2 免疫調(diào)節(jié)作用

1.2.1 對(duì)B淋巴細(xì)胞介導(dǎo)體液免疫的調(diào)節(jié)作用 將不同濃度TGP經(jīng)體內(nèi)和體外兩種途徑給藥后均能降低由異源性雞Ⅱ型膠原(CⅡ)誘導(dǎo)CIA大鼠增高的B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)和血清中抗CⅡ抗體水平，并可防止動(dòng)物體內(nèi)針對(duì)自身CⅡ的IgG抗體在關(guān)節(jié)軟骨處沉積后形成免疫復(fù)合物所致的關(guān)節(jié)及組織的損傷和破壞，這些特征與人類RA更為接近[5]。在臨床中發(fā)現(xiàn)TGP可通過下調(diào)RA患者血液中作為B淋巴細(xì)胞活化標(biāo)志的可溶性CD23(sCD23)的表達(dá)水平而抑制B細(xì)胞增殖活化，從而有效抑制這種前炎癥細(xì)胞因子釋放腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-1、IL-6等[15]。

1.2.2 對(duì)T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞免疫的調(diào)節(jié)作用 梁君山等[16]研究發(fā)現(xiàn)，TGP對(duì)AA大鼠低下的脾臟T細(xì)胞功能有促進(jìn)和調(diào)節(jié)作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度TGP體內(nèi)外兩種途徑給藥時(shí)均能降低CIA大鼠增高的T淋巴細(xì)胞增殖[5]。還可通過抑制外周血T淋巴細(xì)胞表達(dá)破骨細(xì)胞分化因子(RANKL)而抑制破骨細(xì)胞(Osteoclast，OC)的分化，阻斷炎癥及骨質(zhì)損害的病理基礎(chǔ)，減輕實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的關(guān)節(jié)炎性反應(yīng)，減緩由RANKL介導(dǎo)的關(guān)節(jié)骨質(zhì)破壞[17]，且已有臨床資料證實(shí)[18]?？梢酝茰y，TGP可通過促進(jìn)或抑制由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫在RA炎癥及骨質(zhì)破壞中發(fā)揮多途徑的雙向調(diào)節(jié)作用而達(dá)到治療目的。

2 TGP治療RA的主要作用機(jī)制

2.1 TGP對(duì)IL-1的抑制作用 研究發(fā)現(xiàn)將TGP按50 mg·kg-1·d-1灌胃給藥可使AA大鼠腹腔巨噬細(xì)胞升高產(chǎn)生的IL-1水平下降[16]。近年研究發(fā)現(xiàn)，如將不同濃度TGP通過體內(nèi)給藥(50，100 mg·kg-1)和體外給藥后，均可顯著降低由LPS誘導(dǎo)的CIA 大鼠腹腔巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的IL-1水平[5]，還可顯著抑制CIA大鼠滑膜細(xì)胞中因滑膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變而產(chǎn)生的IL-1[6]和血清中IL-1β的水平[8，19]，并呈濃度相關(guān)性。提示TGP不同濃度和不同給藥途徑均對(duì)實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎大鼠因巨噬細(xì)胞升高和滑膜細(xì)胞改變所產(chǎn)生的IL-1和IL-1β有抑制或調(diào)節(jié)作用。

2.2 TGP對(duì)IL-2的雙向調(diào)節(jié)作用 由輔助性T細(xì)胞-1(helper T cell-1，Th1)分泌的IL-2廣泛參與免疫應(yīng)答的各種調(diào)節(jié)，是主要正性細(xì)胞調(diào)節(jié)因子。梁君山等[16]灌胃AA大鼠TGP 50 mg·kg-1·d-1后可使其低下的IL-2恢復(fù)到正常水平。在近年來的研究中發(fā)現(xiàn)將不同濃度TGP體內(nèi)(50，100 mg·kg-1)和體外(2.5，12.5，62.5 mg·kg-1)給藥后均可降低由刀豆蛋白(concanavalin，Con A)誘導(dǎo)的CIA大鼠脾淋巴細(xì)胞升高的IL-2水平[5]?？梢奣GP可對(duì)IL-2具有雙向調(diào)節(jié)作用。

2.3 TGP對(duì)IL-17的調(diào)節(jié)作用 IL-17作為一種前炎性細(xì)胞因子，在RA的炎癥及滑膜增生中可通過磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)激活核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)進(jìn)而促進(jìn)成纖維細(xì)胞釋放IL-6等炎性因子，促進(jìn)骨的侵蝕與破壞。劉國玲等[20]研究發(fā)現(xiàn)，TGP可通過抑制NF-κB/P65的表達(dá)下調(diào)IL-17在AA大鼠血清中的含量。由此推測，TGP可以通過間接下調(diào)IL-17這個(gè)前炎性因子的含量而降低其在RA中的致炎活性，從而減輕或阻止RA的骨質(zhì)破壞和病情進(jìn)展。

2.4 TGP對(duì)TNF-α的抑制作用 TNF-α是造成RA長期關(guān)節(jié)滑膜炎癥及關(guān)節(jié)軟骨破壞的重要促炎性細(xì)胞因子。TGP可呈濃度依賴性地降低或抑制CIA大鼠外周血[7-8,19]和滑膜細(xì)胞中因滑膜細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變而產(chǎn)生的TNF-α的水平[6]。還可顯著下調(diào)RA患者外周血中可溶性腫瘤壞死因子受體Ⅰ的表達(dá)[15]，從而降低TNF-α的活化狀態(tài)。

2.5 TGP對(duì)NF-κB活化的調(diào)控作用 在RA中NF-κB活化后，可啟動(dòng)多種促炎基因轉(zhuǎn)錄，如IL-1、IL-2、IL-6、TNF-α、COX-2等。TGP能明顯抑制炎癥時(shí)NF-κB的核轉(zhuǎn)移，拮抗由LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞NF-κB與DNA的結(jié)合活性，通過作用于多個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)達(dá)到抑制巨噬細(xì)胞NF-κB的活化[13]。還可通過阻遏NF-κB p65蛋白的核轉(zhuǎn)移和下調(diào)其表達(dá)而達(dá)到抑制由LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞NF-κB的活化[21]和TNF-α、IL-1β、IL-17等炎性細(xì)胞因子的釋放及NF-κB與細(xì)胞因子作用的相互網(wǎng)絡(luò)來抑制AA大鼠關(guān)節(jié)炎癥和病理改變[19-20]。但只有大、中劑量TGP(100，50 mg·kg-1)才能顯著抑制CIA大鼠軟骨組織內(nèi)NF-κB/p65蛋白在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)表達(dá)，小劑量(25 mg·kg-1)與對(duì)照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[19]。表明TGP可呈濃度相關(guān)性的通過抑制NF-κB的活化及NF-κB p65蛋白的表達(dá)而阻止炎癥因子釋放所觸發(fā)的免疫炎性反應(yīng)來發(fā)揮效應(yīng)。

2.6 TGP對(duì)關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞增殖的抑制作用 將不同劑量TGP(50，100 mg·kg-1)體內(nèi)給藥[22]和體外給藥[23]后可顯著抑制CIA大鼠和兔佐劑性關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞增殖，還對(duì)CIA大鼠滑膜細(xì)胞亢進(jìn)的分泌功能[24]和代謝能力[6]有明顯改善作用，并呈劑量依賴性。由此表明，TGP可能通過抑制關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞的過度異常增殖和分泌來阻止某些致炎因子觸發(fā)免疫應(yīng)答，緩解或減輕滑膜炎對(duì)關(guān)節(jié)軟骨及骨質(zhì)破壞，從而發(fā)揮其對(duì)關(guān)節(jié)滑膜的保護(hù)功能，并以關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞為靶細(xì)胞發(fā)揮其治療作用。

3 結(jié)束語

以上表明，TGP在對(duì)RA的治療過程中可從多個(gè)環(huán)節(jié)發(fā)揮其有效藥理效應(yīng)，并通過影響RA的炎癥過程、細(xì)胞免疫和體液免疫以及調(diào)控多種炎性細(xì)胞因子而減輕自身免疫性炎癥反應(yīng)。TGP作為抗炎免疫調(diào)節(jié)藥，在調(diào)節(jié)RA異常的免疫功能和炎癥反應(yīng)中發(fā)揮雙向免疫調(diào)節(jié)作用，并能有效抑制關(guān)節(jié)滑膜炎癥，減緩并阻止關(guān)節(jié)及軟骨骨質(zhì)破壞，并呈現(xiàn)出濃度(劑量)依賴性的特點(diǎn)，是RA治療中具有獨(dú)特價(jià)值的一種免疫調(diào)節(jié)藥。但目前有關(guān)TGP治療RA的作用機(jī)制基礎(chǔ)研究多局限于某些細(xì)胞因子，有待從分子和基因?qū)用娓钊腙U明其治療RA的作用機(jī)制。此外，TGP與其他抗風(fēng)濕藥物聯(lián)用治療RA是否具有協(xié)同作用，機(jī)制如何等，有待更深入研究，為臨床聯(lián)合用藥提供科學(xué)依據(jù)。

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DOI 10.3870/yydb.2015.02.016

2014-08-25

2014-10-24

王紅權(quán)(1982-)，男，湖北宣恩人，醫(yī)師，碩士，主要從事中西醫(yī)結(jié)合防治風(fēng)濕病的臨床與基礎(chǔ)研究。電話：(0)15926139779，E-mail：479049726@qq.com。

R593.22；R285.6

A

1004-0781(2015)02-0199-03

DOI 10.3870/yydb.2015.02.015