李國偉，呂彥萌

(1.太康縣人民醫(yī)院，河南 周口461400;2.鄭州大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)系，河南 鄭州450052)

膀胱癌具有高復(fù)發(fā)率和轉(zhuǎn)移率的特性，早期發(fā)現(xiàn)并手術(shù)切除是保證良好預(yù)后的關(guān)鍵［1］。本研究采用免疫組化S-P 法檢測上皮性膀胱癌及其癌旁組織中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)和基質(zhì)金屬蛋白酶－2(matrix metalloproteinase-2，MMP-2)的表達(dá)水平，并探討兩者與上皮性膀胱癌臨床病理特征的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1月至2015年1月來源于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院和太康縣人民醫(yī)院的經(jīng)病理證實(shí)的上皮性膀胱癌患者67 例，男43 例，女24 例;年齡39 ～76 歲，中位年齡54 歲;病理分級(jí):G126 例，G224 例，G317 例;臨床分期:Tis期14 例，T1期19 例，T2期12 例，T3期18 例，T4期6 例。同時(shí)收集67 例患者的癌旁組織作為對(duì)照。

1.2 免疫組化S-P 法檢測VEGF 和MMP-2 所有上皮性膀胱癌及其癌旁組織均用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%甲醛固定，常規(guī)石蠟包埋，連續(xù)切片，HE 染色，然后按照免疫組化S-P 試劑盒說明書檢測上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 表達(dá)水平，并以已知陽性組織切片作為陽性對(duì)照，以PBS 代替一抗作為陰性對(duì)照。鼠抗人VEGF 和MMP-2 單克隆抗體及免疫組化S-P 試劑盒均購自福州邁新生物工程有限公司。

1.3 結(jié)果評(píng)判 用全自動(dòng)彩色病理圖像分析儀測定所有切片陽性表達(dá)的灰度值，所有切片均在高倍鏡下隨機(jī)取5 個(gè)視野進(jìn)行灰度值的測定，然后以其平均值進(jìn)行灰度值比較，灰度值越高，表達(dá)水平越低;灰度值越低，表達(dá)水平越高。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0 進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料用±s 表示，比較用t 檢驗(yàn)，兩者表達(dá)相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)分析法，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 不同膀胱組織中VEGF 和MMP-2 的的表達(dá)65 例上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的灰度值為99.2 ±8. 1、78. 3 ±5. 0，均低于相關(guān)癌旁組織的136.6 ±10.2、110.7 ±6.8，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 均＜0.05)，提示上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的表達(dá)高于相關(guān)癌旁組織。

2.2 上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系 見表1。

表1 上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系 n

2.3 上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 表達(dá)的相關(guān)性 上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.468，P ＜0.05)。

3 討論

VEGF 是一種血管內(nèi)皮細(xì)胞素，正常細(xì)胞中表達(dá)一定水平的VEGF，以促進(jìn)新生血管形成，包括促進(jìn)血管新生、傷口愈合等，而在腫瘤細(xì)胞中存在明顯的高表達(dá)，其高水平表達(dá)能夠促進(jìn)腫瘤新生血管的形成，為腫瘤組織提供血液供應(yīng)和促進(jìn)腫瘤組織的快速增殖［2－3］。研究［3－4］證實(shí)，VEGF 高表達(dá)的腫瘤組織，其復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)明顯高于VEGF 低表達(dá)的腫瘤組織。本文結(jié)果顯示，上皮性膀胱癌組織中VEGF 的表達(dá)均高于癌旁組織;上皮性膀胱癌組織中VEGF 的表達(dá)隨著病理分級(jí)和臨床分期的進(jìn)展而升高。

MMP-2 以酶原形式分泌，經(jīng)過激活后發(fā)揮作用，一定量的MMP-2 能夠維持正常機(jī)體細(xì)胞外基質(zhì)的一種平衡，而在腫瘤組織中，經(jīng)過激活后具有破壞細(xì)胞外基質(zhì)的作用，能夠促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移［5］。本文結(jié)果顯示，上皮性膀胱癌組織中MMP-2 的表達(dá)均高于癌旁組織;上皮性膀胱癌組織中MMP-2 的表達(dá)隨著病理分級(jí)和臨床分期的進(jìn)展而升高。

另外，本文結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，提示兩者在上皮性膀胱癌中可能具有協(xié)同作用。

總之，上皮性膀胱癌組織中VEGF 和MMP-2 高表達(dá)，且兩者可能參與了上皮性膀胱癌的疾病進(jìn)展，這為上皮性膀胱癌的發(fā)生機(jī)制研究提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

［1］劉國元，陳凌武，徐慶春，等. 膀胱癌組織中miRNA-720、miRNA-191 差異表達(dá)的意義［J］. 現(xiàn)代泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤雜志，2014，6(3):164－167，177.

［2］于樂，丁雪貞，孫雅靜，等.CD90 和VEGF 在肝細(xì)胞癌組織中的表達(dá)［J］.腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2014，27(2):102－104.

［3］楚荷瑩，白勇，楊睿，等. 恩度聯(lián)合順鉑對(duì)老年晚期非小細(xì)胞肺癌患者血清MMP-2 和VEGF 水平的影響［J］. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2014，27(4):300－301.

［4］張勇，李同飛，張蕾，等.VEGF、COX-2、MMP-9 在乳腺癌組織中的表達(dá)對(duì)乳腺鉬靶X 線征象的影響［J］. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床，2014，27(1):16－19.

［5］Wang Y，Lin T，Zhang W，et al. A Prodrug-type，MMP-2-targeting Nanoprobe for Tumor Detection and Imaging［J］. Theranostics，2015，5(8):787－795.