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        Survivin和Livin在初診急性白血病患兒中的表達

        2015-12-09 07:53:24王留霞
        腫瘤基礎(chǔ)與臨床 2015年3期
        關(guān)鍵詞:血液病白血病免疫組化

        王留霞

        (鄢陵縣人民醫(yī)院兒科,河南 許昌461000)

        Wang Liuxia

        (Department of Pediatrics,the People’s Hospital of Yanling,Xuchang 461000,China)

        Survivin 和Livin 蛋白均是凋亡抑制蛋白家族成員,在多種腫瘤中均存在高表達,對腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移等具有明顯促進作用[1]。為進一步探討兒童急性白血病的發(fā)病機制,并為兒童急性白血病治療新方法的探討提供依據(jù),作者采用免疫組化S-P 法檢測了89 例初診急性白血病患兒中Survivin 和Livin 蛋白的表達,并探討兩者之間的相關(guān)性。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 收集鄭州市兒童醫(yī)院和鄢陵縣人民醫(yī)院2010年1月至2014年12月收治的經(jīng)臨床病理確診的急性白血病患兒89 例,均為初診患者,其中男49 例,女40 例;年齡9 個月~14 歲,中位年齡7.5 歲;急性淋巴細胞白血病58 例,急性髓細胞白血病31 例。收集同期住院的30 例非惡性血液病患兒作為對照,其中男17 例,女13 例;年齡2 ~15 歲,中位年齡8 歲;疾病類型:特發(fā)性血小板減少性紫癜21 例,營養(yǎng)性貧血9 例)。2 組性別、年齡等基本資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P >0.05),具有可比性。

        1.2 免疫組化S-P 法檢測Survivin 和Livin 蛋白 2組所有患兒均抽取骨髓標本,經(jīng)涂片、自然晾干后,用乙醇乙醚液固定,室溫晾干,保存于-30 ℃冰箱中待測。然后采用免疫組化S-P 法檢測骨髓細胞中Survivin 和Livin 蛋白表達情況,操作步驟參照試劑盒說明書進行,并以PBS 液代替一抗作為對照。Survivin和Livin 蛋白鼠抗人單克隆抗體及S-P 免疫組化試劑盒等均購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

        1.3 結(jié)果判定 以細胞被染成棕黃色且紅細胞及背景不著色為陽性,高倍鏡(×400)下觀察1 000 個細胞,計數(shù)陽性細胞數(shù),<5%為陰性,≥5%為陽性[3]。

        1.4 化療方案選擇及療效評估 急性淋巴細胞白血病采用VDLP 方案(長春新堿、柔紅霉素、門冬酰胺酶、強的松)方案進行誘導(dǎo)緩解化療,急性髓細胞白血病采用DAE 方案(柔紅霉素、阿糖胞苷、VP16)或HAD(高三尖衫酯堿、阿糖胞苷、柔紅霉素)方案進行誘導(dǎo)緩解治療?;煰熜Х譃橥耆徑狻⒉糠志徑?、未緩解,以完全緩解+部分緩解計算緩解率。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 13.0 進行統(tǒng)計分析,率的比較采用χ2檢驗,相關(guān)性分析選用Pearson 相關(guān)性分析方法,檢驗水準α=0.05。

        2 結(jié)果

        2.1 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達情況 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達陽性率分別為67.4%、69.7%,高于非惡性血液病患兒的6. 7%、13. 3% (χ2= 33. 180、28. 281,P <0.05)。見表1。

        表1 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達情況n(%)

        2.2 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達的相關(guān)性 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin蛋白表達呈正相關(guān)關(guān)系(r =0. 428,P <0. 05)。見表2。

        表2 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達的相關(guān)性

        2.3 初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達與化療緩解率的關(guān)系 所有確診白血病患兒接受白血病化療方案的常規(guī)化療后,Survivin 和Livin 蛋白陽性患 兒 緩 解 率 分 別 為45. 0% (27/60)、46. 8%(29/62),低于Survivin 和Livin 蛋白陰性患兒的93.1% (27/29)、96. 3% (26/27)(χ2= 18. 960、19.536,P <0.05)。

        3 討論

        白血病是嚴重威脅人類健康生命安全的血液系統(tǒng)惡性克隆性疾病,血液學(xué)指標以白血病細胞的失控性增殖為主要表現(xiàn),正常的造血功能受到抑制。近年來,隨著環(huán)境污染的加重,白血病的發(fā)病率呈逐年上升趨勢,且有低齡化趨勢,兒童白血病的發(fā)病率明顯增多。研究[2]證實,細胞凋亡的異常是在白血病的發(fā)生發(fā)展過程中具有重要作用,細胞凋亡抑制的發(fā)生是導(dǎo)致機體白細胞水平的急劇上升的關(guān)鍵。

        細胞凋亡蛋白是整個細胞凋亡控制系統(tǒng)的關(guān)鍵控制因素,包括促進凋亡的蛋白和抑制凋亡的蛋白。其中凋亡抑制蛋白是抑制細胞凋亡的一類蛋白,該蛋白氨基末端均包含一個BIR 結(jié)構(gòu),該蛋白水平異常升高導(dǎo)致細胞凋亡的不足,進而促進腫瘤的發(fā)生和進展[3]。Survivin 和Livin 均是凋亡抑制蛋白家族的重要成員。Survivin 的相對分子質(zhì)量為16 500,為相對分子質(zhì)量最小的凋亡抑制蛋白,主要通過與其他蛋白結(jié)合形成染色體通道蛋白復(fù)合體參與調(diào)控紡錘體的組裝和細胞周期檢測點的調(diào)控[4]。于廣倩等[5]的研究發(fā)現(xiàn),Survivin 蛋白在急性白血病的骨髓細胞中存在高表達,明顯高于非血液病患者,且白血病的急性期Survivin 蛋白表達水平高于緩解期。Livin 蛋白分為Livinα 和Livinβ,兩者在人體內(nèi)的表達部位及水平具有明顯差異。Livin 蛋白主要通過與其下游效應(yīng)分子Caspase 結(jié)合形成復(fù)合物發(fā)揮抗凋亡作用,主要Caspase 分子為Caspase3 和Caspase7[6]。Livin 蛋白特異性表達于人的胚胎組織、胎盤組織以及大多數(shù)人類實體瘤細胞,在胎兒發(fā)育過程中多種組織高表達,如胸腺、腦、腎和肝;在正常成人體內(nèi),Livin 蛋白主要表達于心臟、肺、腦、脾、卵巢、骨骼肌和淋巴細胞,但表達水平較低[7]。馬彩云等[8]研究發(fā)現(xiàn),Livin 蛋白在急性白血病患兒骨髓細胞中的表達明顯高于非惡性血液病患兒,且陽性表達Livin 蛋白的急性白血病患兒的緩解率明顯低于陰性表達Livin 蛋白的患兒。

        本文結(jié)果顯示,初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達陽性率分別為67.4%、69.7%,高于非惡性血液病患兒的6.7%、13.3%,提示急性白血病患兒體內(nèi)存在Survivin 和Livin 蛋白的高表達。初診急性白血病患兒Survivin 和Livin 蛋白表達呈正相關(guān)關(guān)系,提示在白血病的發(fā)生發(fā)展過程中可能具有協(xié)同促進作用。Survivin 和Livin 蛋白陽性患兒緩解率分別為45.0%、46.8%,低于Survivin 和Livin 蛋白陰性患兒,提示Survivin 和Livin 蛋白陽性表達患兒可能對化療不甚敏感。本研究以往研究[6-9]報道的結(jié)果相似。

        總之,Survivin 和Livin 蛋白在初診急性白血病患兒中高表達,可能協(xié)同參與了兒童急性白血病的發(fā)生、發(fā)展,兩者聯(lián)合檢測可用于兒童急性白血病的輔助診斷,而且根據(jù)本文關(guān)于化療緩解率與Survivin 和Livin蛋白緩表達情況的關(guān)系研究也可為兒童急性白血病的化療方案選擇提供一定的參考依據(jù)。

        [1]冷秀梅,劉皓,馮小可,等.基于Survivin、Livin 凋亡抑制蛋白探討化痰消瘀方逆轉(zhuǎn)胃癌癌前病變的作用機制[J]. 世界華人消化雜志,2014,22(33):5047-5055.

        [2]劉群策,殷小成,劉丹莉,等.C-jun 在二烯丙基二硫誘導(dǎo)白血病細胞K562 凋亡過程中的作用[J]. 腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2013,26(1):5-8.

        [3]楊波,崔平.Apollon 凋亡抑制蛋白與腫瘤治療的研究進展[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2013,26(2):178-180.

        [4]何小婷,李娟,柴曉靜,等.Survivin 基因在急性白血病患者中的表達及其臨床意義[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2014,22(2):408-412.

        [5]于廣晴,趙田華,倪蕾,等.Survivin 和PLK1 在急性白血病中的表達及臨床意義[J]. 黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2014,37(3):15-16,18.

        [6]王艷,李改英,張靜楠,等.急性和慢性白血病Livin 基因表達的研究[J].軍醫(yī)進修學(xué)院學(xué)報,2009,30(1):99-101.

        [7]Vucic D,Stennieke HR,Pisabarro MT,et al. ML-IAP,a novel inhibitor of apoptosis that is preferentially expressed in human melanomas[J].Curr Biol,2000,10(21):1359-1366.

        [8]馬彩云,張德甫.Livin 蛋白在兒童急性白血病中的表達及臨床意義[J].腫瘤基礎(chǔ)與臨床,2009,22(5):382-384.

        [9]梁芝玲,王志強.Survivin 基因的表達在小兒急性白血病發(fā)病過程中的意義[J].中國婦幼保健,2014,29(15):2354-2356.

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