楊俊玲， 盧 軍， 劉 晶， 趙翡翠， 聶繼紅*

（1.新疆醫(yī)科大學(xué)，新疆烏魯木齊830011；2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，新疆烏魯木齊830000）

［科研報(bào)道］

白喉烏頭及其炮制品對(duì)佐劑致類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的實(shí)驗(yàn)研究

楊俊玲1， 盧 軍2， 劉 晶2， 趙翡翠2， 聶繼紅2*

（1.新疆醫(yī)科大學(xué)，新疆烏魯木齊830011；2.新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院，新疆烏魯木齊830000）

目的 探討白喉烏頭及其炮制品對(duì)佐劑致類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠的影響。方法 本研究應(yīng)用足趾容積測(cè)定儀檢測(cè)致炎前和致炎后第7、14、21、28天大鼠致炎側(cè)的關(guān)節(jié)腫脹度；通過X光片，觀察其骨性變化，并對(duì)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析；應(yīng)用HE染色觀察SD大鼠滑膜組織的病理學(xué)改變，并進(jìn)行病理學(xué)評(píng)分；采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法測(cè)定血清中C反應(yīng)蛋白（CRP）、類風(fēng)濕因子（RF）、皮質(zhì)醇（Hydrocortisone）水平。結(jié)果 造模7 d后，與對(duì)照組相比，模型組大鼠關(guān)節(jié)腫脹度顯著增加；給藥21 d后，與模型組相比，各給藥組關(guān)節(jié)腫脹度顯著降低，其中以加輔料共煮法高劑量組腫脹度下降最明顯 （P＜0.01）；給藥21 d后，給藥組白喉烏頭生品和加輔料共煮法炮制品與高壓蒸法和加熱水煮法炮制品間有差異 （P＜0.05），但各劑量組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，模型組各細(xì)胞總數(shù)明顯增加；與模型組相比，各給藥組細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著降低 （P＜0.05），且各給藥組間細(xì)胞計(jì)數(shù)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），但同一組內(nèi)不同劑量間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；X光片結(jié)果，與對(duì)照組比較，模型組關(guān)節(jié)炎大鼠軟組織腫脹明顯，關(guān)節(jié)間隙狹窄甚至消失，關(guān)節(jié)面模糊；各給藥組與模型組相比，上述病變癥狀較輕；各給藥組間相比，病變程度亦有差異，但同一組不同劑量間無(wú)明顯差異；HE染色結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組滑膜細(xì)胞過度增生，關(guān)節(jié)間隙狹窄甚至消失；與模型組相比，給藥組加輔料共煮法具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；各給藥組相比，加輔料共煮法與高壓蒸法中劑量組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與其他組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組皮質(zhì)醇水平降低，CRP水平升高；各給藥組與模型組相比，皮質(zhì)醇水平升高、CRP水平降低 （P＜0.05）；各給藥組比較，CRP水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），其中加輔料共煮法高劑量組與其他給藥組差異較顯著。結(jié)論 白喉烏頭及其炮制品對(duì)佐劑致類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎大鼠有不同程度的治療作用，且綜合上述各指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果顯示，白喉烏頭以加輔料共煮方法制備的炮制品在治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎方面效果較顯著。

白喉烏頭；炮制品；類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；滑膜組織；CRP；皮質(zhì)醇水平

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 藥物及試劑 白喉烏頭，采于新疆伊犁州尼勒克縣，經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院李永和主任中藥師鑒定為毛茛科植物白喉烏頭（Aconitum leucostomum Worosch.）的干燥根；草烏及制草烏 （購(gòu)自安徽賀林中藥飲片科技有限公司，生產(chǎn)批號(hào)120302）；醋酸地塞米松片 （天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號(hào)140421）；弗氏完全佐劑CFA（美國(guó)Sigm公司，批號(hào)101M8711）；血球試劑 （DREW Scientific，INC，KITCODE 030946022）；ELISA試劑盒：C反應(yīng)蛋白試劑盒 （CSB-E07922r），類風(fēng)濕因子試劑盒（CSB-E13666r），皮質(zhì)醇試劑盒 （CSB-E05112r），均購(gòu)自武漢華美生物工程有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 由新疆維吾爾自治區(qū)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供（許可證號(hào)SCXK［新］2011-0003），清潔級(jí)Sprague-

Dawley（SD）大鼠180只，體質(zhì)量180～220 g，雌雄各半。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 Leica Microsystems CMS GmbH DM 3000（德國(guó)Leica Microsystems公司）；飛利浦?jǐn)?shù)字化拍片機(jī)（DigitalDiagnost3，Hamburg/Germany）；美國(guó)HEMAVET 950FS系列五分類動(dòng)物血液分析儀（DREW Scientific，INC）；PV-200足趾容積測(cè)定儀 （成都泰盟科技有限公司）；洗板機(jī)、酶標(biāo)儀 （賽默飛世爾科技公司）。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 白喉烏頭炮制品的制備［6-9］參照藥典 （加熱水煮法）、文獻(xiàn) （高壓蒸法）報(bào)道及新疆哈薩克族民間炮制方法 （加輔料共煮法）進(jìn)行炮制。加熱水煮法：取凈白喉烏頭，用水浸泡使其內(nèi)無(wú)干心，加水煮至切開斷面無(wú)白心、口嘗微有麻舌感時(shí)，晾至六成干后切薄片，70℃低溫烘干，備用。高壓蒸法：將凈白喉烏頭清洗、悶潤(rùn)，126℃，0.15 MPa下蒸制90min，取出晾至六成干后切片，70℃低溫烘干，備用。加輔料共煮法：凈白喉烏頭用水泡至無(wú)苦味，加入8%甘草和10%黑豆?jié){與其共煮至內(nèi)無(wú)白心、口嘗微有麻舌感為度，取出晾至六成干后切片，70℃低溫烘干，備用。

2.2 白喉烏頭藥材及其炮制品水煎液的制備［10］取白喉烏頭及其三種炮制品，草烏、制草烏各1 000 g，以8倍量水浸泡1 h后文火煎30 min，4層紗布濾過，依次煎煮3次，合并濾液；加入40%水煎液體積的95%乙醇溶液，4℃冰箱內(nèi)靜置2 d，以2 000 r/min轉(zhuǎn)速離心10 min，上清液置于恒溫（65℃）水浴鍋內(nèi)濃縮，備用 （3 g生藥/mL）。

2.3 佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠模型建立［11］及分組給藥 SD大鼠180只，雌雄各半，除對(duì)照組10只注射0.1 mL生理鹽水外，其余各鼠均于左后足跖皮內(nèi)注射0.1 mL弗氏完全佐劑致炎，注射前用75%乙醇輕拭注射部位，造模7 d后按足趾容積從中篩選140只 （造模成功且組間無(wú)差異的）并隨機(jī)分為模型組、白喉烏頭、加熱水煮法炮制品、加輔料共煮法炮制品、高壓蒸法炮制品、草烏、制草烏中、高劑量組及陽(yáng)性組；并于分組當(dāng)天測(cè)完足趾容積后開始灌胃給藥，每天1次，連續(xù)灌胃23 d。

3 觀察項(xiàng)目及檢測(cè)方法

3.1 關(guān)節(jié)腫脹度的測(cè)定在致炎前和致炎后第7、14、21、28天，分別測(cè)定大鼠致炎側(cè) （左后足）足趾容積，應(yīng)用大鼠足趾容積測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定［12］，結(jié)果以左后足踝關(guān)節(jié)以下排開水的體積表示，每周1次，求出關(guān)節(jié)腫脹度 （ΔmL=致炎后容積-致炎前容積）［13］。

在每年的東北季風(fēng)期間，陽(yáng)西電廠附近的海況一般浪高1～3m，受持續(xù)的東北季風(fēng)影響，陽(yáng)西電廠的部分燈浮標(biāo)也逐浙偏離位置。陽(yáng)西電廠的1號(hào)、4號(hào)、6號(hào)、10號(hào)燈浮都曾經(jīng)受東北季風(fēng)的影響而發(fā)生過移位。

3.2 血常規(guī)［14］及炎性因子的測(cè)定［15-18］末次給藥2 h后，腹主動(dòng)脈采血檢測(cè)白細(xì)胞總數(shù) （WBC）、中性粒細(xì)胞（NE）、單核細(xì)胞數(shù) （MO）、淋巴細(xì)胞總數(shù) （LY）及通過ELISA方法，測(cè)定類風(fēng)濕因子（rheumatoid factor，RF）、C反應(yīng)蛋白（C-reactionprotein，CRP）、皮質(zhì)醇（Hydrocortisone）水平的變化。

3.3 大鼠踝關(guān)節(jié)X線片及組織病理學(xué)觀察［19-23］將各組大鼠麻醉后置于X線下拍片，觀察軟組織腫脹程度、關(guān)節(jié)間隙大小、骨侵蝕變化等情況并進(jìn)行關(guān)節(jié)評(píng)分［24］。

摘取大鼠左側(cè)踝關(guān)節(jié)處的滑膜組織通過HE染色，觀察其病理變化并進(jìn)行病理評(píng)分。踝關(guān)節(jié)病理評(píng)分主要從滑膜細(xì)胞增生、血管擴(kuò)張、炎性浸潤(rùn)評(píng)分［24］。

3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 連續(xù)型變量服從正態(tài)分布，采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差表示；組間比較，采用單因素方差分析；不符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)采用中位數(shù)及四分位間距M（P25，P75），組間比較采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)。關(guān)節(jié)腫脹度采用重復(fù)測(cè)量方差分析。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，雙側(cè)檢驗(yàn)，α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

4 結(jié)果

4.1 關(guān)節(jié)腫脹度測(cè)定結(jié)果 造模7 d后，與對(duì)照組相比，模型組大鼠關(guān)節(jié)腫脹度顯著增加，視造模成功；第14、21和28天后，其他各給藥組關(guān)節(jié)腫脹度顯著低于模型組，其中以加輔料共煮法高劑量組腫脹度下降較明顯 （P＜0.01）；且第28天，給藥組白喉烏頭生品與高壓蒸法和加熱水煮法間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），加輔料共煮法與高壓蒸法和加熱水煮法間亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），其他給藥組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見圖1。

圖1 各組大鼠給藥后關(guān)節(jié)腫脹度的變化 （n=10）

4.2 血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果 檢測(cè)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，模型組各組的白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞總數(shù)和單核細(xì)胞數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯增加 （P＜0.05）。與模型組相比，給藥組白細(xì)胞總數(shù)、淋巴細(xì)胞總數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)除制草烏高劑量組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其他給藥組均顯著降低 （P＜0.05）（圖2、圖4），但同一組內(nèi)不同劑量間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞數(shù)細(xì)胞計(jì)數(shù)中，模型組除與白喉烏頭生品高劑量、高壓蒸法中劑量、加水共煮法中劑量及草烏高劑量組有差異，與其他給藥組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，詳見圖3、圖5。

圖2 給藥21 d后白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)的變化

圖3 給藥21 d后中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)的變化

圖4 給藥21 d后淋巴細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)的變化

4.3 X-光片結(jié)果 X-光片評(píng)分及拍攝的圖片結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組關(guān)節(jié)炎大鼠軟組織腫脹明顯，關(guān)節(jié)間隙狹窄甚至消失，關(guān)節(jié)面模糊，甚至出現(xiàn)部分骨侵蝕現(xiàn)象；

圖5 給藥21 d后單核細(xì)胞數(shù)計(jì)數(shù)的變化

各給藥組與模型組相比，上述病變程度明顯減輕，其中以加輔料共煮法炮制品和加熱水煮法制得的炮制品病變程度較輕，；各給藥組間相比，在關(guān)節(jié)軟組織腫脹差異中，加輔料共煮法炮制品和加熱水煮法制得的炮制品與高壓蒸法炮制品間有明顯的差異。詳見表1、圖6。

表1 佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠X光片評(píng)分結(jié)果比較

表1 佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠X光片評(píng)分結(jié)果比較

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05；各給藥組比較，與高壓蒸法 （高）比較，*P＜0.05；與高壓蒸法

組別 例數(shù) 軟組織腫脹 關(guān)節(jié)間隙 骨侵蝕對(duì)照組10 1.8±0.63 1.7±0.67 1.8±0.79 10 0.2±0.42 0.1±0.32 0模型組 10 2.5±0.53* 1.9±0.88*2.0±0.82*陽(yáng)性組 10 1.4±0.97 1.0±0.67 1.1±0.99白喉烏頭（高） 10 1.9±0.74 1.4±0.97 1.3±0.67白喉烏頭（中） 10 2.2±0.63 1.5±0.71 1.4±1.17加輔料共煮（高） 10 1.5±0.71#*△1.1±0.99#1.3±0.95加輔料共煮（中） 10 1.7±0.95#*△1.3±0.95 1.3±0.95高壓蒸法（高） 10 2.4±0.7 1.7±0.95 1.6±1.17高壓蒸法（中） 10 2.5±0.71 1.8±1.03 1.6±0.84加熱水煮法（高） 10 1.6±0.97#*△1.1±0.57#1.3±0.48加熱水煮法（中） 10 1.8±1.03#△ 1.4±1.07 1.3±1.06生草烏（高） 10 2.1±0.74 1.9±0.74 1.6±0.84生草烏（中） 10 2.3±0.82 2.0±0.82 1.8±0.79制草烏（高） 10 1.9±0.88 1.7±0.67 1.5±0.85制草烏（中）

（中）比較，△P＜0.05

4.4 大鼠滑膜組織HE染色結(jié)果 滑膜組織HE染色結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組滑膜細(xì)胞過度增生；與模型組相比，給藥組中加輔料共煮法與其具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；各給藥組相比，加輔料共煮法炮制品與高壓蒸法中劑量組炮制品具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其他各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。詳見表2、圖7。

圖6 各組X光片結(jié)果的比較

表2 滑膜組織HE染色結(jié)果病理評(píng)分表

表2 滑膜組織HE染色結(jié)果病理評(píng)分表

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與模型組比較，#P＜0.05；與高壓蒸法 （中）比較，*P＜0.05；與加輔料共煮 （中）比較，△P＜0.05

例數(shù) 滑膜增生 血管擴(kuò)張?jiān)錾M別炎性浸潤(rùn)對(duì)照組10 0.3±0.48 0.4±0.52 0.5±0.53模型組 10 2.0±0.67* 1.7±0.82* 2.3±0.82*陽(yáng)性組 10 1.3±0.48 0.8±0.42 1.3±0.48白喉烏頭（高） 10 1.6±0.84 1.2±0.42 1.8±0.79白喉烏頭（中） 10 1.6±0.7 1.2±0.63 1.7±0.67加輔料共煮（高） 10 1.2±0.42#* 1.0±0.47#* 1.4±0.7#*加輔料共煮（中） 10 1.3±0.82#* 0.8±0.63#* 1.5±0.53#*高壓蒸法（高） 10 1.9±0.99 1.5±0.71△ 1.9±0.88高壓蒸法（中） 10 2.0±0.82 1.6±0.52 2.2±0.63加熱水煮法（高） 10 1.3±0.82#* 1.4±0.52△ 1.7±0.48加熱水煮法（中） 10 1.5±0.71 1.3±0.48 1.6±0.7#生草烏（高） 10 1.8±0.92 1.5±0.71 1.9±0.74生草烏（中） 10 1.7±0.67 1.4±0.7 1.7±0.82制草烏（高） 10 1.6±0.52 1.1±0.74 1.6±0.7制草烏 （中）10 1.6±0.7 1.1±0.74 1.5±0.97

4.5 血清中RF、CRP、皮質(zhì)醇等的檢測(cè)結(jié)果 血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組皮質(zhì)醇水平降低，CRP水平升高；各給藥組與模型組相比，皮質(zhì)醇水平升高、CRP水平降低 （P＜0.05）；各給藥組比較，皮質(zhì)醇水平無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，CRP水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異 （P＜0.05），其中加輔料共煮法高劑量組與其他給藥組差異較顯著 （見表3）。經(jīng)檢測(cè)，RF水平普遍較低甚至低于最低檢測(cè)限，有待繼續(xù)檢測(cè)，數(shù)據(jù)未列出。

圖7 佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠HE染色 （×100）

表3 血清中皮質(zhì)醇、C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)結(jié)果

表3 血清中皮質(zhì)醇、C反應(yīng)蛋白的檢測(cè)結(jié)果

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與加輔料共煮 （高）比較，*P＜0.05

組別 劑量/（g.kg-1） 動(dòng)物數(shù)/只 皮質(zhì)醇/（ng.m L-1） C反應(yīng)蛋白/（ng.mL-1）對(duì)照組 — 10 45.42±13.47 119.03±33.11#模型組 — 10 34.29±7.24 327.67±81.89*#陽(yáng)性組 0.006 10 46.69±16.86 153.85±68.85#白喉烏頭（高） 0.4 10 59.18±10.31*# 232.89±44.93*#*白喉烏頭（中） 0.2 10 58.46±8.22# 157.79±31.09#加輔料共煮（高） 1.2 10 43.76±19.28 96.99±30.62#加輔料共煮（中） 0.6 10 54.36±13.69# 222.3±65.99*#*加熱水煮法（高） 1.0 10 48.82±18.48# 192.76±43.03*#*加熱水煮法（中） 0.5 10 62.97±4.58*# 527.88±88.7*#*高壓蒸法（高） 5.44 10 60.23±11.31*# 206.25±48.76*#*高壓蒸法（中） 2.72 10 66.81±3.33*# 182.25±51.33*#*生草烏（高） 1.3 10 60.34±4.01*# 198.73±38.1*#生草烏（中） 0.65 10 55.06±5.76# 211.01±44.74*#制草烏（高） 4.0 10 51.81±7.4# 162.06±29.68#制草烏（中） 2.0 10 62.24±8.1*# 103.85±25.33#

5 討論

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是一種以慢性、破壞性關(guān)節(jié)滑膜炎為主要特征的系統(tǒng)性免疫疾?。?5］，現(xiàn)階段對(duì)其病因病機(jī)的研究仍在繼續(xù)，治療方法也僅限于抗炎和對(duì)癥治療［26-27］，運(yùn)用動(dòng)物模型篩選治療該病的方法及藥物具有重要的意義。佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型，既能體現(xiàn)關(guān)節(jié)局部的炎癥反應(yīng)，又有其全身的癥狀表現(xiàn)，更重要的是其病理及免疫學(xué)指標(biāo)與人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎有許多相似之處，是研究類風(fēng)濕性關(guān)

節(jié)炎及篩選抗炎免疫藥物的較理想動(dòng)物模型之一［28］。本研究建立SD大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎模型，在藥物干預(yù)前通過比較造模前后關(guān)節(jié)腫脹度的變化，評(píng)價(jià)模型是否成功。

由于本研究中白喉烏頭及其炮制品在臨床中暫未使用，故依據(jù)前期的毒性試驗(yàn)LD50值［29］和該實(shí)驗(yàn)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)定本次各給藥組劑量。各組高劑量為其1/5的LD50，中劑量為其1/10的LD50。與已有藥典規(guī)定的制草烏的劑量相比，白喉烏頭中劑量相當(dāng)于制草烏的1倍，加熱水煮法中劑量相當(dāng)于制草烏的2倍，高壓蒸法中劑量相當(dāng)于制草烏的9倍，加輔料共煮法中劑量相當(dāng)于制草烏的2倍。相比之下，高壓蒸法提取物毒性較小，但藥效也較差；而加輔料共煮法在毒性與其他炮制品相當(dāng)?shù)那疤嵯掳l(fā)揮了較好的藥效，對(duì)于其成分的研究有待繼續(xù)。同時(shí)，由于白喉烏頭的毒性成分可能與制草烏不同，故在劑量方面必然會(huì)有差異，對(duì)于其毒性成分及安全性的考察后期也會(huì)繼續(xù)深入研究。

本研究采用佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎模型，通過足趾容積測(cè)定儀測(cè)量SD大鼠造模前后的足趾容積，以關(guān)節(jié)腫脹度的變化情況評(píng)價(jià)炎癥的發(fā)展程度，結(jié)果顯示，造模7 d后，各造模組大鼠足趾紅腫較明顯；給藥21 d后，各給藥組關(guān)節(jié)腫脹度與模型組有顯著性差異，其中以加輔料共煮法高劑量組腫脹度下降最明顯；X-光片結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組關(guān)節(jié)炎大鼠軟組織腫脹明顯，關(guān)節(jié)間隙狹窄甚至消失，關(guān)節(jié)面模糊；各給藥組與模型組相比，上述病變程度明顯減輕；各給藥組間相比，部分關(guān)節(jié)軟組織腫脹有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；滑膜組織HE染色結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，模型組滑膜細(xì)胞過度增生；與模型組相比，給藥組中加輔料共煮法與其具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；各給藥組相比，加輔料共煮法炮制品與高壓蒸法中劑量組炮制品具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，其他各組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。綜合上述各指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果，認(rèn)為白喉烏頭及其炮制品對(duì)佐劑性關(guān)節(jié)炎模型大鼠類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎有一定的治療作用，且以加輔料共煮法制得的炮制品高劑量組治療效果較顯著，推測(cè)可能與其炮制時(shí)所加的輔料甘草和黑豆有關(guān)。研究發(fā)現(xiàn)，甘草具有清熱解毒、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等作用，其中起抗炎作用的成分可能與甘草黃酮、甘草多糖等有關(guān)［24］，而且，甘草本身還具有緩和藥性的作用，對(duì)于白喉烏頭的減毒也會(huì)起到一定的作用；而黑豆的藥理作用表明其具有抗腫瘤，調(diào)節(jié)免疫的作用［30］，故兩者與具有毒性的白喉烏頭一起共煮，無(wú)疑會(huì)起到協(xié)同作用，充分的驗(yàn)證了中藥炮制減毒的機(jī)理。

目前研究對(duì)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的診斷指標(biāo)未見統(tǒng)一報(bào)道，特征性指標(biāo)和輔助性診斷指標(biāo)也有很多，故不能以其中的某一項(xiàng)作為最終的診斷結(jié)果，所以對(duì)于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的早期診斷、治療及藥物篩選無(wú)疑是一障礙。另外，通過本次研究發(fā)現(xiàn)，外在炎性癥狀的輕重并不等同于內(nèi)在炎性因子檢測(cè)結(jié)果的高低，且各檢測(cè)結(jié)果很大程度上受炎癥活動(dòng)期的影響。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，白喉烏頭及其炮制品對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療確有效果，其中，以加輔料共煮法制得的炮制品治療效果最佳，說明其內(nèi)可能存在有效的抗類風(fēng)濕活性物質(zhì)，具有深入研究的現(xiàn)實(shí)意義。

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1001-1528（2015）11-2495-07

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.11.035

2015-04-07

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目 （81160498）

楊俊玲 （1989—），女，碩士生，研究方向?yàn)橹兴帉W(xué)。Tel：13699379849，E-mail：1250292504@qq.com

*通信作者：聶繼紅 （1962—），女，教授，主任藥師，從事中藥復(fù)方制劑的新藥研發(fā)。Tel：（0991）5810646，E-mail：xjnjh411@163.com