周 敏，汪偉光，杜 雪，劉 淼,2，普建新，孫漢董

(1.中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所 植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650201;2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 100039；3.云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國(guó)家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500)

間斷香茶菜中松香烷二萜成分研究

周 敏1,2,3，汪偉光1，杜 雪1，劉 淼1,2，普建新1，孫漢董1

(1.中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所 植物化學(xué)與西部植物資源持續(xù)利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650201;2.中國(guó)科學(xué)院大學(xué)，北京 100039；3.云南民族大學(xué) 民族藥資源化學(xué)國(guó)家民委-教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，云南 昆明 650500)

首次對(duì)間斷香茶菜(Isodoninterrupta)70%丙酮水提取物開(kāi)展了化學(xué)成分研究，從該植物中分離得到了6個(gè)松香烷型二萜類化合物，通過(guò)波譜方法分別鑒定為15-hydroxy-dehydro-abietic acid(1)，podocarpa-8,11,13-triene-7α,18-diol(2)，7β-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(3)，7α-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(4)，abieta-8,11,13-trien-18-oic acid(5)，和15-acetoxy-7-oxodehydroabietic acid(6).

間斷香茶菜；松香烷型二萜；化學(xué)成分

唇形科香茶菜屬(Isodon)植物主要分布于亞熱帶、溫帶和寒溫帶地區(qū)，全球有96種10變種，中國(guó)分布有77種10變種，該屬植物資源非常豐富，我國(guó)橫斷山脈地區(qū)被認(rèn)為是其現(xiàn)代分布中心.香茶菜屬植物約有30余種在我國(guó)和日本民間有藥用記載，它們大都具有清熱解毒，抗炎抗菌，抗腫瘤等功效[1-2].

香茶菜屬植物富含二萜類成分，其類型具有一定的分類學(xué)意義.研究表明，其中絕大多數(shù)香茶菜屬植物富含對(duì)映-貝殼杉烷型四環(huán)二萜，小部分香茶菜屬植物(如德欽大葉香茶菜I.grandifolia和線紋香茶菜I.lophanthoides)以松香烷型三環(huán)二萜為主[2].綜上所述，對(duì)該屬植物化學(xué)成分的系統(tǒng)性研究，不僅能為該屬植物的化學(xué)分類學(xué)提供科學(xué)依據(jù)，而且為合理開(kāi)發(fā)和利用該屬藥用植物資源提供新的化學(xué)物質(zhì)基礎(chǔ).正是基于以上結(jié)論，我們首次對(duì)產(chǎn)自四川馬爾康縣的間斷香茶菜(I.interrupta)開(kāi)展了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究.

1 材料和方法

1.1 植物來(lái)源

實(shí)驗(yàn)所用植物2011年9月采于四川省馬爾康縣，經(jīng)昆明植物研究所李錫文研究員鑒定為間斷香茶菜(I.interrupta)，植物標(biāo)本存放于中國(guó)科學(xué)院昆明物所植化學(xué)與西部資源持續(xù)利用國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室.

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

柱層析硅膠及薄層層析硅膠板為青島海洋化工廠生產(chǎn).反相硅膠RP-18由Merck公司生產(chǎn).凝膠Sephadex LH-20為日本FUJI公司生產(chǎn).MCI CHP20P為Mitsubishi Chemical 公司生產(chǎn).安捷倫1200 型高效液相色譜儀，色譜柱為Agilent公司的ZORBAX SB-C18(9.4 mm × 250 mm，5 μm)反相柱.Buchi R-210 型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、V-700真空泵;EYELA CA冷卻水循環(huán)裝置;流動(dòng)相過(guò)濾裝置，0.45 μm 微孔過(guò)濾膜.顯色劑為10%的硫酸乙醇溶液.核磁圖譜由Bruker AM-400測(cè)定，TMS作為內(nèi)標(biāo).

1.3 提取和分離

間斷香茶菜樣品0.5 kg，風(fēng)干粉碎后用70% 的丙酮水溶液室溫下浸泡3次，每次5升，提取液合并，減壓蒸餾除去溶劑，粗提物懸浮于水中.乙酸乙酯萃取液合并減壓濃縮得浸膏25g.MCI凝膠脫色后得干膏14g.用 50 g 80～100目硅膠拌樣經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-丙酮梯度洗脫，用TLC進(jìn)行檢測(cè)，合并相同部分，得到7個(gè)組分(Fr.I～Fr.Ⅶ).主要部分Fr.Ⅱ(15 g)，通過(guò)MCI脫色，經(jīng)正相色譜柱，以石油醚/丙酮分為4部分，各部分再通過(guò)中壓反相色譜，中壓制備色譜(甲醇洗脫)，最后通過(guò)半制備(乙腈和水洗脫)，依次得到化合物1(125 mg)，2(5 mg)，3(13 mg)，4(8 mg)，5(20 mg)和6(12 mg).

2 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1黃色粉末;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:7.19(1H,br s,H-11),7.19(1H,br s,H-12),7.12(1H,s,H-14),1.49(6H,s,Me-16,17),1.26(3H,s,Me-20),1.19(3H,s,Me-19).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:182.6(s,C-18),148.8(s,C-9),147.6(s,C-13),135.4(s,C-8),126.0(d,C-11),125.0(d,C-12),123.3(d,C-14),72.8(s,C-15),48.6(s,C-4),46.5(d,C-5),39.4(t,C-1),38.0(t,C-3),38.0(s,C-10),31.9(q,C-17),31.9(q,C-16),31.4(t,C-7),25.6(q,C-20),22.9(t,C-6),19.7(t,C-2),17.1(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[3]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物1為15-hydroxydehydroabietic acid.

化合物2黃色油狀物;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:7.19(1H,d,J=8.4 Hz,H-11),7.17(1H,d,J=1.8 Hz,H-14),7.08(1H,dd,J=8.4,1.8 Hz,H-12),4.72(1H,d,J=2.8 Hz,H-7),3.39 and 3.22(2H,d,J=8.9 Hz,H-6a,6b),1.22(6H,d,J=7.2 Hz,Me-16,17),1.16(3H,s,Me-20),0.97(3H,s,Me-19).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:148.5(s,C-9),147.2(s,C-13),137.1(s,C-8),129.2(d,C-14),127.1(d,C-11),125.2(d,C-12),72.4(t,C-18),68.7(d,C-7),40.1(d,C-5),39.5(t,C-1),38.8(s,C-10),38.5(s,C-4),36.3(t,C-3),34.9(d,C-15),29.7(t,C-6),24.9(q,C-20),24.5(q,C-17),24.5(q,C-16),19.7(t,C-2),17.6(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物2為podocarpa-8,11,13-triene-7α,18-diol.

化合物3黃色粉末;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:7.36(1H,d,J=1.5 Hz,H-14),7.15(1H,d,J=8.4 Hz,H-11),7.05(1H,dd,J=8.4,1.5 Hz,H-12),4.74(1H,br t,J=9.2 Hz,H-7),1.22(3H,s,Me-20),1.22(3H,s,Me-19),1.21(6H,d,J=6.7 Hz,Me-16,17).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:182.2(s,C-18),148.1(s,C-9),147.3(s,C-13),139.0(s,C-8),126.6(d,C-14),126.4(d,C-11),125.1(d,C-12),71.3(t,C-7),48.2(s,C-4),45.0(d,C-5),39.4(t,C-1),38.7(s,C-10),37.8(t,C-3),35.1(d,C-15),33.4(t,C-6),25.8(q,C-20),24.5(q,C-17),24.5(q,C-16),19.5(t,C-2),17.0(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物3為7β-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid.

化合物4白色粉末;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:7.21(1H,d,J=1.8 Hz,H-14),7.17(1H,d,J=8.4 Hz,H-11),7.09(1H,dd,J=8.4,1.8 Hz,H-12),4.69(1H,br d,J=3.2 Hz,H-7),1.25(3H,s,Me-20),1.21(6H,d,J=6.7 Hz,Me-16,17),1.15(3H,s,Me-19).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:182.2(s,C-18),148.2(s,C-9),147.3(s,C-13),137.0(s,C-8),129.4(d,C-14),127.2(d,C-11),125.0(d,C-12),68.5(t,C-7),48.3(s,C-4),40.9(d,C-5),39.0(t,C-1),38.5(s,C-10),37.6(t,C-3),34.9(d,C-15),32.3(t,C-6),24.8(q,C-20),24.5(q,C-17),24.5(q,C-16),19.7(t,C-2),17.1(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物4為7α-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid.

化合物5黃色油狀物;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:7.12(1H,d,J=8.2 Hz,H-11),6.93(1H,dd,J=8.2,1.6 Hz,H-12),6.82(1H,d,J=1.6 Hz,H-14),1.26(3H,s,Me-20),1.23(3H,s,Me-19),1.17(6H,d,J=6.9 Hz,Me-16,17).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:182.6(s,C-18),148.1(s,C-9),146.8(s,C-13),135.6(s,C-8),127.8(d,C-14),125.2(d,C-11),124.9(d,C-12),48.4(s,C-4),46.5(d,C-5),39.4(t,C-1),38.0(s,C-10),38.0(t,C-3),34.8(d,C-15),31.2(t,C-7),25.6(q,C-20),24.5(q,C-17),24.5(q,C-16),22.9(t,C-7),19.6(t,C-2),17.0(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[4]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物5為abieta-8,11,13-trien-18-oic acid.

化合物6黃色粉末;1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ:8.01(1H,s,H-14),7.72(1H,dd,J=8.4,2.2 Hz,H-12),7.53(1H,d,J=8.4 Hz,H-11),2.10(3H,s,OAc),1.83(6H,d,J=6.9 Hz,Me-16,17),1.32(3H,s,Me-19),1.21(3H,s,Me-20).13C NMR(100 MHz,CD3OD)δ:200.6(s,C-7),181.5(s,C-18),171.8(s,OAc),156.0(s,C-9),145.6(s,C-13),131.8(d,C-12),131.5(s,C-8),125.3(d,C-11),123.9(d,C-14),82.4(s,C-15),47.5(s,C-4),45.4(d,C-5),38.9(t,C-1),38.7(s,C-10),38.4(t,C-6),37.9(t,C-3),28.9(q,C-17),28.9(q,C-16),23.7(q,C-20),22.1(q,OAc),19.2(t,C-2),16.9(q,C-19).以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[5]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物6為15-acetoxy-7-oxodehydroabietic acid.

3 結(jié)語(yǔ)

首次對(duì)間斷香茶菜開(kāi)展了化學(xué)成分研究，從中分離得到了6個(gè)松香烷型二萜類化合物，分別為15-hydroxy-dehydroabietic acid(1)，podocarpa-8,11,13-triene-7α,18-diol(2)，7β-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(3)，7α-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(4)，abieta-8,11,13-trien-18-oic acid(5)，和15-acetoxy-7-oxo-dehydroabietic acid(6).

從化學(xué)分類學(xué)的角度來(lái)看，該植物的主要成分并非該屬的特征性成分(對(duì)映-貝殼杉烷四環(huán)二萜)，而是相對(duì)原始的松香烷三環(huán)二萜類化合物，說(shuō)明了該植物是相對(duì)原始的種.該研究進(jìn)一步加深了對(duì)香茶菜屬植物化學(xué)成分的認(rèn)識(shí)，為深入研究開(kāi)發(fā)該屬植物藥用化學(xué)成分提供了一定的物質(zhì)基礎(chǔ).

[1] SUN Han-dong,XU Yun-long,JIANG Bei.Diterpenoids from Isodon species[M].Beijing:Science Press,2001.

[2] SUNHan-dong,HUANG Sheng-xiong,HAN Qun-bin.Diterpenoids from Isodon species and their biological activities[J].Natural Product Reports,2006,23:673-698.

[3] YANG Xian-wen,FENG Lin,LI Su-mei,et al.Isolation,structure,and bioactivities of abiesadines A-Y,25 new diterpenes from Abies georgei Orr[J].Bioorganic , Medicinal Chemistry,2010,18:744-754.

[4] MIGUEL DEL CORRAL J M,GORDALIZA M,SALINERO M A,et al.13C NMR data for abieta-8,11,13-triene diterpenoids[J].Magnetic Resonance in Chemistry,1994,32:774-781.

[5] KUO Yueh-hsiung,YEH Ming-hsi,LIN Hsiu-chuan,et al.New abietane-type diterpenes from the heartwood of Picea morrisonicola[J].Chemical , Pharmaceutical Bulletin,2004,52(7):861-863.

(責(zé)任編輯 王 琳)

Studies on abietane-type diterpenoids fromIsodoninterrupta

ZHOU Min1,2,3,WANG Wei-guang1,DU Xue1,LIU Miao1,2,PU Jian-xin1,SUN Han-dong1

(1.State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources in West China,Kunming Institute of Botany,Chinese Academy of Sciences,Kunming 650201,China;2.University of Chinese Academy of Sciences,Beijing 100039,China; 3.Key Laboratory of Chemistry in Ethnic Medicinal resources,State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education of China,Yunnan Minzu University,Kunming 650500,China)

The chemical analysis of the plant ofIsodoninterruptaled to the isolation of six abietane-type diterpenoids. On the basis of spectral data and physiochemical properties,their structures were identified as 15-hydroxydehydro--abietic acid(1),podocarpa-8,11,13-triene-7α,18-diol(2),7β-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(3),7α-hydroxyabieta-8,11,13-trien-18-oic acid(4),abieta-8,11,13-trien-18-oic acid(5),and 15-acetoxy-7-oxo-dehydroabietic acid(6).

Isodoninterrupta; abietane-type diterpenoids; chemical constituent

2014-11-24.

國(guó)家自然科學(xué)基金(81172939).

周敏(1984-)，男，博士研究生.主要研究方向:天然藥物化學(xué).

孫漢董(1939-)，男，研究員，博士，博士生導(dǎo)師.主要研究方向:天然藥物化學(xué). 普建新(1978-)，男，研究員，博士，碩士生導(dǎo)師.主要研究方向:天然藥物化學(xué).

F284.1

A

1672-8513(2015)02-0091-03