文│余海波（湖北省武漢市農(nóng)業(yè)學(xué)校）

豬流行性腹瀉的診斷方法與防控措施

文│余海波（湖北省武漢市農(nóng)業(yè)學(xué)校）

豬流行性腹瀉（PED）是由豬流行性腹瀉病毒（PEDV）引起的一種急性接觸性腸道傳染病，以水瀉、嘔吐和脫水為特征。我國于20世紀(jì)80年代初開始陸續(xù)有該病的流行，其中有30%～40%的病例與豬傳染性胃腸炎（TGE）混合感染；2010年10月，東南亞多國出現(xiàn)新生仔豬病毒性腹瀉，并波及我國南方10多個(gè)養(yǎng)豬大省，死亡仔豬超過100萬頭；2011年12月中旬起，該病在華東地區(qū)多家規(guī)模化豬場(chǎng)再次暴發(fā)；美國自2013年首次暴發(fā)此病后，2014年4月再次暴發(fā)且疫情迅速蔓延至墨西哥等國家。近年來，該病已呈世界性分布，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

一、診斷方法

根據(jù)流行特點(diǎn)、臨床癥狀和鑒別診斷做出初步判定，再進(jìn)行病原學(xué)、血清學(xué)檢測(cè)，結(jié)合PCR技術(shù)確定病原。

1.流行特點(diǎn)。PED常年均可發(fā)生，我國多于每年11月至翌年4月流行此病。各種年齡的豬均易感，尤其以哺乳仔豬最易感且病死率高。其中，哺乳仔豬、保育豬或育肥豬的發(fā)病率可達(dá)100%，母豬發(fā)病率15%～90%；7日齡以內(nèi)仔豬越小，癥狀越重，發(fā)生腹瀉后2～4天脫水死亡，死亡率高達(dá)70%～100%，7日齡以上仔豬持續(xù)3～4天腹瀉后可能會(huì)死于脫水，死亡率為50%～90%；育肥豬死亡率為1%～3%；成年豬感染后一般經(jīng)4～5天即可康復(fù)。

2.病豬是主要傳染源，感染途徑主要是糞—口途徑。病毒存在于腸絨毛和腸系膜淋巴結(jié)中，隨糞便排出后，污染飼料、飲水、衣服、鞋子、車輛及工具等而散播傳染。根據(jù)感染毒株的毒力和豬的敏感程度不同，其潛伏期為：哺乳仔豬8～36小時(shí)，保育豬和育肥豬1～3天。發(fā)病順序一般為：育肥豬—保育豬—妊娠母豬—產(chǎn)房母豬和哺乳仔豬。

3.臨床癥狀。育肥豬、保育豬和母豬表現(xiàn)水樣腹瀉，糞便呈水泥漿樣或黃色；保育豬消瘦，體表沾滿稀糞，多扎堆取暖；產(chǎn)房母豬常出現(xiàn)乳房萎縮，奶水不足。

哺乳仔豬最早出生后12小時(shí)內(nèi)就出現(xiàn)嘔吐，隨后開始腹瀉，糞便呈黃、棕、白等色，脫水后畏寒，多數(shù)很快死亡；耐過豬一般成為僵豬或弱仔，表現(xiàn)為精神沉郁、眼睛無神、皮膚無彈性、生長緩慢且消瘦。

4.剖檢病變。發(fā)病仔豬胃內(nèi)充滿未消化的乳糜，胃底黏膜可見不同程度的充血；小腸病變明顯，腸管膨滿擴(kuò)張、腸壁透明，腸系膜充血、腸系膜淋巴結(jié)水腫；腸內(nèi)充滿大量黃色液體，呈水樣或黏液樣，有異味；腸絨毛萎縮變短，上皮細(xì)胞變性壞死和脫落；腎臟表面散布大量針尖狀出血點(diǎn)，其他臟器無顯著一致性病變；常見機(jī)理不明的背部肌肉壞死。

5.鑒別診斷。主要與豬瘟、傳染性胃腸炎、輪狀病毒病、偽狂犬病、博卡病、仔豬白痢、仔豬黃痢、仔豬紅痢、副傷寒、豬痢疾、增生性腸病等孢球蟲病等引起的腹瀉相區(qū)別。

6.實(shí)驗(yàn)室診斷。

（1）PEDV快速診斷試紙條（初診）。由韓國Ani-gen公司生產(chǎn)，操作簡單，快捷。

（2）直接免疫熒光法。能快速、敏感、可靠地檢測(cè)出樣品中的病毒抗原。熒光顯微鏡檢查判定：在胞漿中見到特異性蘋果綠色熒光為陽性，無特異性熒光為陰性。

（3）RT-PCR或RT-nPCR檢測(cè)。是一種快速、高度敏感、特異的診斷方法。應(yīng)用外引物從病豬糞便中擴(kuò)增出DNA片段，瓊脂糖凝膠電泳分析為854堿基對(duì)（bp）的目的基因片段，可初步斷定導(dǎo)致豬群發(fā)病的病原體中含有豬流行性腹瀉病毒；進(jìn)一步用內(nèi)引物經(jīng)嵌套式PCR擴(kuò)增出的DNA片段，瓊脂糖凝膠電泳分析為412bp的目的基因片段，可確定導(dǎo)致豬群發(fā)病的病原體為豬流行性腹瀉病毒。

二、防控措施

1.疫苗緊急免疫。目前，我國大多數(shù)規(guī)模化豬場(chǎng)均采用正品的TGE－PED二聯(lián)滅活疫苗進(jìn)行后海穴（尾根與肛門正中的凹陷處）注射免疫（妊娠母豬產(chǎn)前20～30天每頭接種4毫升，仔豬斷奶前每頭接種1毫升，25～50千克豬只每頭接種2毫升，50千克以上豬只每頭接種4毫升）；正在推廣使用哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)的TGE－PED二聯(lián)弱毒苗和福建省生物藥品廠同中國農(nóng)業(yè)大學(xué)合作開發(fā)的TGE－PED－RV三聯(lián)弱毒苗。韓國和日本等國家已使用商品化的PED活苗、滅活菌、口服苗以及仔豬口服的抗PED病毒的IgY抗體。

2.分類應(yīng)急處理。

（1）哺乳仔豬。保溫、保濕：產(chǎn)房可使用煤爐或其他供暖設(shè)施，確保產(chǎn)房溫度適宜（20～25℃），對(duì)仔豬保育箱使用大功率燈泡或紅外線燈照射提高溫度（30～34℃）。產(chǎn)房內(nèi)濕度控制在40%～80%。

腹腔補(bǔ)液：7日齡內(nèi)重癥仔豬一般無治療價(jià)值，可取腸段做返飼用；7日齡及以上發(fā)病仔豬，可在5%的葡萄糖生理鹽水中加入適量的抗生素（恩諾沙星等），預(yù)熱至35℃左右進(jìn)行腹腔注射（倒提仔豬，于倒數(shù)第2、3排乳頭之間，距腹中線2～3厘米處進(jìn)針，與腹壁成90°刺入3厘米左右，刺破腹壁后感覺進(jìn)針阻力消失，回抽無血液和腹腔內(nèi)容物，即可注射藥水)，每次30～50毫升，每天2～3次。

防止饑餓：當(dāng)母乳不足或仔豬不愿吮乳時(shí)，可采用米湯或人工乳進(jìn)行人工飼喂。

隔離飼養(yǎng)：若條件允許，可在豬場(chǎng)外設(shè)置隔離舍，集中人工飼養(yǎng)治療4周，以切斷病毒在場(chǎng)內(nèi)的傳播。

（2）保育豬及育肥豬。適當(dāng)限飼：盡量使用濕拌料，并將飼喂量降為正常量的三分之一。

防止脫水：在飲水中添加電解多維及口服補(bǔ)液鹽，在靜脈補(bǔ)液糖鹽水中添加阿莫西林等抗生素，以提高其抵抗力并防止大腸桿菌或沙門氏菌等繼發(fā)感染。

（3）后備母豬、妊娠母豬及哺乳母豬的返飼。返飼即采用新發(fā)腹瀉哺乳仔豬的腸管、糞便等病毒攜帶物通過口服方式感染母豬群，使其通過自然感染的途徑產(chǎn)生免疫力，新生仔豬通過母乳獲得特異性母源抗體而獲得保護(hù)。此法可在商品化疫苗使用效果不佳，不能有效防控該病暴發(fā)流行時(shí)使用。與美國、加拿大等國家在藍(lán)耳病暴發(fā)時(shí)，使用發(fā)病豬只的血清對(duì)全群豬進(jìn)行同期感染的免疫機(jī)理基本相同。

返飼對(duì)象：對(duì)已經(jīng)度過隔離期，還沒有納入配種計(jì)劃的后備母豬，可以進(jìn)行返飼；60～95天的妊娠母豬，可以進(jìn)行返飼，使其在分娩前產(chǎn)生免疫力。懷孕60天以內(nèi)的母豬，返飼易出現(xiàn)流產(chǎn)；懷孕95天以后的母豬，返飼會(huì)使母豬進(jìn)入產(chǎn)房后仍處于排毒期，導(dǎo)致仔豬一出生就感染病毒；哺乳母豬需等到其斷奶后再進(jìn)行返飼；若返飼病料較少，應(yīng)優(yōu)先返飼后備豬和一胎豬，因?yàn)樗鼈兯胸i更易發(fā)生腹瀉，死亡率也更高。

病料選擇：主要為新發(fā)腹瀉哺乳仔豬的腸管、內(nèi)容物及糞便，發(fā)病24小時(shí)內(nèi)采集病料為佳；其次為返飼后出現(xiàn)腹瀉的母豬糞便，但應(yīng)由獸醫(yī)判定其不含偽狂犬病毒、博卡病毒等病原時(shí)方可使用，以防其他病原擴(kuò)散。

病料處理：將1千克腸管用刀剁碎后，倒入2升市售生理鹽水中，再加入300～500克奶粉和適量的抗生素（阿莫西林或青霉素+鏈霉素）制成返飼物，每天每頭母豬食用1次，每次50克，連用3～5天，直至出現(xiàn)腹瀉后停喂；產(chǎn)房內(nèi)腹瀉仔豬的糞便，應(yīng)及時(shí)用衛(wèi)生紙擦拭收集，盡快拌入飼料中供母豬食用，時(shí)間越短越好，最多不要超過4個(gè)小時(shí)。

效果評(píng)價(jià)：種豬胎齡及免疫情況不詳?shù)呢i群，以后備群及一胎豬腹瀉率高于80%為返飼有效的標(biāo)志；母豬胎齡3胎以內(nèi)為主，腹瀉率高于70%；母豬胎齡3胎以上為主，腹瀉率高于40%，且群中后備豬及一胎豬腹瀉率高于80%；感染過PEDV的豬場(chǎng)，腹瀉率一般為30%左右；豬群進(jìn)行過多次疫苗免疫，其腹瀉率與疫苗種類和免疫效果有關(guān)，需進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。其臨床癥狀表現(xiàn)為，采食返飼后一周內(nèi)出現(xiàn)發(fā)燒、腹瀉、不采食或采食量下降。

注意事項(xiàng)：為確保返飼效果，避免病毒粒子被滅活，需注意如下六點(diǎn)：一是收集的病料盡量不要在陽光下照射，且需盡快處理使用；二是收集糞便時(shí)不要帶豬消毒；三是返飼期間暫停飲水消毒；四是病料處理和拌食不要使用含有漂白粉等消毒劑的自來水（應(yīng)使用市售生理鹽水）；五是返飼盡可能在10天內(nèi)完成，若條件允許，應(yīng)將懷孕60天以下和95天以上的母豬與返飼豬群隔離，以免殘留返飼物通過料槽內(nèi)飲水傳播病毒；六是返飼期間應(yīng)在飲水或飼料中添加適量的電解多維和抗生素。

還應(yīng)嚴(yán)格落實(shí)消毒滅源及做好病尸糞污的無害化處理工作，減少人員車輛流動(dòng)，提高生物安全水平等。