徐建平（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)庫(kù)爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站 841023）

豬口蹄疫快速檢測(cè)卡在免疫監(jiān)控中的應(yīng)用

徐建平（新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團(tuán)庫(kù)爾勒第二師畜牧獸醫(yī)工作站 841023）

通過(guò)豬口蹄疫快速監(jiān)控技術(shù)在養(yǎng)殖場(chǎng)進(jìn)行母源抗體、抗體消長(zhǎng)狀況、免疫程序建立，使養(yǎng)殖戶能夠在不需繁瑣的實(shí)驗(yàn)室條件下，快速了解自己養(yǎng)殖場(chǎng)的防疫狀況，以便及時(shí)預(yù)防，達(dá)到防病抗病的目的。

豬口蹄疫；快速檢測(cè)卡；監(jiān)控技術(shù)；免疫應(yīng)用

1 豬口蹄疫快速檢測(cè)卡簡(jiǎn)介

1.1 監(jiān)測(cè)卡的原理

檢測(cè)卡利用抗體快速金標(biāo)檢測(cè)卡法（簡(jiǎn)稱金標(biāo)法）檢測(cè)抗體效價(jià)。金標(biāo)法是在酶聯(lián)免疫吸附法的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的一種固相標(biāo)記免疫測(cè)定新技術(shù)。其檢測(cè)原理是，以微孔濾膜為載體，包被已知抗原，加入待檢標(biāo)本后，經(jīng)濾膜的毛細(xì)管作用，標(biāo)本中的抗體與膠體金結(jié)合的抗原相結(jié)合，再通過(guò)與膜上包被的抗原結(jié)合顯色而達(dá)到檢測(cè)目的。金標(biāo)法的試劑為試紙條形式，即為金標(biāo)試紙條。判定標(biāo)準(zhǔn)：口蹄疫抗體陽(yáng)性≥1：32（5log2），口蹄疫抗體陰性＜1：32（5log2）。

1.2 特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)便、特異性好、快捷迅速、易于判斷。

1.3 檢測(cè)卡使用說(shuō)明

1.3.1 使用

檢測(cè)卡在夏天、冬天都可使用，但為加快監(jiān)測(cè)速度，建議使用4000轉(zhuǎn)的簡(jiǎn)易離心機(jī)快速析出血清，使整個(gè)監(jiān)測(cè)過(guò)程在5～10min完成。

1.3.2 說(shuō)明

只用于防疫的監(jiān)督檢查、檢疫的監(jiān)督檢查，不作為免疫抗體結(jié)果的最終結(jié)論。

2 在免疫中的應(yīng)用

2.1 試劑

所用疫苗：豬口蹄疫苗呼和浩特金宇保靈生物有限公司，批號(hào)3136028。疫苗使用方法：口蹄疫2～4ml。

2.2 采用檢測(cè)卡（金標(biāo)法）

在農(nóng)牧團(tuán)場(chǎng)，選取免疫效價(jià)合格的母豬所產(chǎn)的仔豬為試驗(yàn)對(duì)象。隨機(jī)抽檢在21日齡斷奶的6窩仔豬，每窩仔豬抽檢采血4～6頭，共31頭仔豬。以剛出生沒(méi)有吃上初乳為0日齡，第2d為1日齡，以次類(lèi)推?？梢钥闯鲇仔笤谖闯猿跞榍?，體內(nèi)基本沒(méi)有抗體，吃過(guò)初乳后，抗體迅速上升，隨著日齡的增加，抗體效價(jià)呈明顯的線性下降之勢(shì)。

2.3 口蹄疫母源抗體

仔豬O型口蹄疫母源抗體合格率，在0日齡為零，在10日齡達(dá)到最高，到35日齡是還在合格水平，40日齡降到合格以下，所以在40日齡就可以作為豬口蹄疫首免日齡，見(jiàn)圖1。

圖1 仔豬口蹄疫母源抗體消長(zhǎng)動(dòng)態(tài)

2.4 結(jié)論

豬抗體消亡時(shí)間，也就是免疫時(shí)間。仔豬口蹄疫在40日齡為首免日期。

3 豬口蹄疫檢測(cè)卡檢測(cè)免疫效價(jià)

（1）在農(nóng)牧團(tuán)場(chǎng)豬場(chǎng)，采用檢測(cè)卡對(duì)仔豬進(jìn)行O型口蹄疫的免疫，采用檢測(cè)卡查看首免、二免、三免測(cè)定抗體效價(jià)。

（2）單獨(dú)注射口蹄疫疫苗，每次注射間隔15d，檢測(cè)43頭仔豬，免疫 15d后采血樣，平均抗體效價(jià)，首免為2.1log2、二免7.9log2、三免8.4log2。免疫合格率，在首免時(shí)效果不理想，二免效果較好，三免最好。但采用spss軟件分析第2次和第3次差異也不顯著，見(jiàn)圖2。

圖2 仔豬口蹄疫免疫效果

（3）結(jié)果：注射一次疫苗效果較差，免疫合格只在20～30%左右。2次免疫效果可以達(dá)到合格水平，3次免疫比2次效果好，但差異不顯著。故一種疫苗至少免疫2次。

4 討論

檢測(cè)卡具有使用簡(jiǎn)單、快捷、準(zhǔn)確、易于操作，夏天、冬天都可使用的特性，且在動(dòng)物防疫工作中的免疫自查、檢疫、監(jiān)督工作上都可使用，其應(yīng)用前景廣闊，值得推廣應(yīng)用。

項(xiàng)目來(lái)源：新疆建設(shè)兵團(tuán)第二師科技項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào)：2013NYGG1。