黃江志，葉惠儀，黃育浩，張險朋

（1.廣東省東莞市橫瀝鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，廣東 東莞 523460；2.東莞市動物疫病預(yù)防控制中心，廣東 東莞 523086）

東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬流行性乙型腦炎血清學(xué)調(diào)查

黃江志1，葉惠儀1，黃育浩2，張險朋2

（1.廣東省東莞市橫瀝鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心，廣東 東莞 523460；2.東莞市動物疫病預(yù)防控制中心，廣東 東莞 523086）

為了解東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬流行性乙型腦炎流行情況，在2013～2015年，采用酶聯(lián)免疫吸附方法，對采集的432份豬血清進行了流行性豬乙型腦炎抗體檢測。結(jié)果為非免疫場100份血清，抗體陽性15份，抗體陽性率為15.00%；免疫場332份，抗體陽性250份，抗體陽性率為75.30%。結(jié)果表明，東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬場存在流行性乙型腦炎的感染，對于流行性乙型腦炎的防控需采取綜合防控措施。

流行性乙型腦炎；豬；血清學(xué)調(diào)查；ELISA

流行性乙型腦炎，簡稱乙腦，是由感染嗜神經(jīng)性的乙型腦炎病毒引起的，由節(jié)肢動物傳播的中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染病，廣泛流行于亞洲和太平洋地區(qū)，有嚴(yán)格的季節(jié)性，蚊蟲孳生的7～9月是發(fā)病的高峰期，熱帶地區(qū)可常年發(fā)病。病毒在蚊-豬-蚊等動物間循環(huán)，大多數(shù)動物形成隱性感染，可致孕豬出現(xiàn)流產(chǎn)、公豬發(fā)生睪丸炎。本病還可引起人類的感染，主要侵襲15歲以下的學(xué)齡兒童，臨床上以高熱、意識障礙、驚厥、呼吸衰竭及腦膜刺激征為特征。人毒蚊叮咬后，多出現(xiàn)隱性感染,乙腦病死率達(dá)30%左右，且可致50%的患者留下不同程度的神經(jīng)系統(tǒng)和精神方面的后遺癥。根據(jù)全國法定傳染病疫情情況報告，2014年我國流行性乙腦的發(fā)病數(shù)為859例，死亡29例。流行性乙型腦炎在公共衛(wèi)生中具有重要意義，為了了解東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬乙型腦炎的流行情況，在養(yǎng)殖場采集了432份豬血清，進行ELISA檢測，現(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 被檢血清

2013～2015年，由東莞市橫瀝鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站采橫瀝鎮(zhèn)14個豬養(yǎng)殖場，共412份豬血清；其中非免疫場5個，100份血清；免疫場9個采集血清332份；采集豬的日齡在100日齡至180日齡。采集送檢血清-20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試劑和儀器

豬乙型腦炎抗體ELISA試劑盒：購自武漢科前生物技術(shù)有限公司。SUNRISE酶標(biāo)儀購自TECAN公司。

1.3 間接ELISA方法

取JEV抗原包被板，分別將按1：40和1：4體積稀釋好的待檢血清和對照血清加入到抗原包被板孔中，置37℃溫育30 min。棄去板孔中液體，用洗滌液洗滌5次，每孔再加入按1：20000的體積稀釋好的酶標(biāo)通用二抗，置37℃溫育30min。洗滌5次后每孔加底物液A、底物液B各1滴（約50μL），室溫避光顯色10min，每孔加入終止液1滴（約50μL），10 min內(nèi)用620～650 nm波長測定各孔D值。若樣品S/P（檢測樣本的D值/陽性對照D值平均值）值≥0.21，判為JEV抗體陽性；若樣品S/P值＜0.21，判為JEV抗體陰性。

2 結(jié)果

2.1 非免疫場乙型腦炎抗體檢測結(jié)果

共檢測非免疫養(yǎng)殖場5個，100份血清，抗體陽性15份，抗體陽性率為15.00%，其中2個養(yǎng)殖場檢出流行性乙型腦炎抗體陽性，陽性場比例為40.00%，詳細(xì)結(jié)果見表1。

表1 東莞市橫瀝鎮(zhèn)非免疫場乙型腦炎抗體檢測結(jié)果

2.2 免疫場乙型腦炎抗體檢測結(jié)果

共檢測免疫養(yǎng)殖場9個，332份血清，抗體陽性250份，抗體陽性率為75.30%，免疫場的流行性乙型腦炎抗體陽性率在40%至100%，詳細(xì)結(jié)果見表2。

表2 東莞市橫瀝鎮(zhèn)免疫場乙型腦炎抗體檢測結(jié)果

3 討論

3.1 豬流行性乙型腦炎，在豬群分布和和傳播比較廣泛，蚊蟲是流行性乙型腦炎病毒的傳播媒介，所以流行性乙型腦炎的流行與季節(jié)有明顯的關(guān)系，夏秋季節(jié)是流行性乙型腦炎的流行高峰期。根據(jù)血清學(xué)調(diào)查的結(jié)果，東莞市橫瀝鎮(zhèn)非免疫場抗體陽性率為15.00%，陽性場的比例為40%。2008年靳興軍等對北京地區(qū)豬流行乙型腦炎抗體調(diào)查結(jié)果為非免豬群的抗體陽性率為7.56%，免疫豬群的抗體陽性率為34.9%。2008年楊培昌等對云南楚雄州豬流行乙型腦炎抗體調(diào)查結(jié)果為48.21%。2009年至2011年黃育浩等對東莞市內(nèi)豬養(yǎng)殖場采集豬血清3918份,進行流行性乙型腦炎抗體檢測,抗體陽性率為56.58%。東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬流行性乙型腦炎抗體陽性率雖與其他地區(qū)的陽性率有所差異，但結(jié)果都表明，豬群中存在豬流行性性乙型腦炎病毒的感染。

3.2 目前，在流行性乙型腦炎抗體的血清學(xué)調(diào)查中，常采用的試驗方法有血凝與血凝抑制試驗方法、ELISA方法、乳膠凝集試驗方法、中和試驗方法等，但常規(guī)的血凝抑制試驗、和中和試驗中存在費時費力的情況，對試驗的環(huán)境和人員的要求也比較高，乳膠凝集試驗則存在特異性和敏感性不高的情況。ELISA試驗方法具有較高的特異性和敏感性，檢測速度快，操作簡便適合基層的獸醫(yī)實驗室進行大規(guī)模的血清學(xué)監(jiān)測。此次血清學(xué)調(diào)查采用武漢科前的ELISA試劑盒，對9個免疫場的流行乙型腦炎抗體檢測結(jié)果為抗體陽性率75.30%，結(jié)果表明東莞市橫瀝鎮(zhèn)豬流行性乙型腦炎疫苗免疫效果總體來說較好，但也存在免疫失敗的個別案例。

3.3 由于我國流行性乙型腦炎發(fā)病數(shù)居高不下，對兒童造成的生命威脅和健康危害是十分嚴(yán)重的。對流行性乙型腦炎的預(yù)防措施有防蚊和滅蚊，控制宿主動物（豬）和易感人群的預(yù)防接種，防蚊和滅蚊是控制本病的流行的重要環(huán)節(jié)，也是最有效最經(jīng)濟的預(yù)防措施，特別是針對庫蚊的措施。對于主要的傳染源家畜，尤其是未經(jīng)過流行季節(jié)的仔豬，采用疫苗免疫，以減少豬群的病毒血癥，從而控制人群中的流行性乙型腦炎的流行。另外，加強對動物流行性乙型腦炎的監(jiān)測，及時掌握動物中流行性乙型腦炎的流行情況，為防控流行性乙型腦炎提供數(shù)據(jù)。

[1]俞東征.人畜共患病傳染病學(xué)[M].北京：科學(xué)出版社，2009.

[2]靳興軍，等.北京市豬乙型腦炎血清流行病學(xué)調(diào)查[J].中國獸醫(yī)雜志，2008，44（8）:51-52.

[3]楊培昌，等.云南省楚雄州豬乙型腦炎流行情況血清學(xué)調(diào)查[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2008，29（5）:109-112.

[4]黃育浩，等.廣東省東莞市豬乙型腦炎流行病學(xué)調(diào)查[J].動物醫(yī)學(xué)進展，2012，33（7）:126-128.

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．08.022