李 玲，馬建波

基于嵌合抗原受體的腫瘤免疫治療的研究進(jìn)展

李 玲，馬建波

近來關(guān)于嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)修飾T細(xì)胞在治療包括淋巴瘤、白血病、腦膠質(zhì)瘤、黑色素瘤、肺癌、前列腺癌、胰腺癌及卵巢癌等腫瘤所取得成績令人振奮。CAR是利用基因工程將能夠與腫瘤抗原結(jié)合的受體與跨細(xì)胞膜的部分和細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的部分結(jié)合起來形成的一種新型受體，它可脫離主要組織相容性復(fù)合體的限制單獨執(zhí)行殺傷細(xì)胞的功能。CAR修飾T細(xì)胞因其獨特的設(shè)計和強效的抗腫瘤作用受到人們的追捧。作者就CAR修飾T細(xì)胞在臨床治療中的應(yīng)用、遇到的問題和對應(yīng)策略作一綜述。

嵌合抗原受體；T細(xì)胞；腫瘤；免疫治療

最近幾十年來傳統(tǒng)的腫瘤治療方法(外科手術(shù)、化學(xué)治療、放射治療等)取得很大的進(jìn)步，但是在生存率、復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移等方面仍存在巨大的挑戰(zhàn)。隨著腫瘤生物學(xué)和免疫學(xué)研究的進(jìn)步和深入，近年來，免疫治療逐步成為腫瘤治療的新星。其中，基于嵌合抗原受體(chimeric antigen receptor，CAR)腫瘤免疫治療技術(shù)開始嶄露頭角。CAR修飾的T細(xì)胞(chimeric antigen receptor-T cell，CAR-T)治療這一概念最早是由Gross等[1]于1989年提出，CAR-T因不受主要組織相容性復(fù)合物(main histocompatibility complex，MHC)的限制而得到青睞。將近25年的時間里CAR-T在動物實驗和臨床試驗中表現(xiàn)出良好的靶向性、殺傷性和體內(nèi)持久性，在治療淋巴瘤[2]、B細(xì)胞白血病[3-4]、腦膠質(zhì)瘤[5]、成神經(jīng)細(xì)胞瘤[6]、卵巢癌[7]等惡性腫瘤方面取得了很好的成效。

1 CAR-T

T細(xì)胞是人體內(nèi)發(fā)揮特異性抗腫瘤作用的效應(yīng)細(xì)胞，但其作用的發(fā)揮具有MHC限制。而人體內(nèi)另一種特異性淋巴細(xì)胞B細(xì)胞的抗原受體及其分泌的抗體可以直接與相應(yīng)的抗原結(jié)合。CAR-T是利用基因工程的方法將非MHC限制性方式識別目標(biāo)抗原的單鏈抗體與間隔區(qū)、跨膜基序和T細(xì)胞的活化基序等結(jié)合為一體，并借助病毒等載體轉(zhuǎn)染T細(xì)胞，以賦予T細(xì)胞更加強大的特異性殺傷腫瘤的能力[8]。多數(shù)CAR包括細(xì)胞外抗原結(jié)合區(qū)、細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)和中間的跨膜區(qū)域。細(xì)胞外抗原結(jié)合區(qū)是由鉸鏈區(qū)連接來源于單克隆抗體輕鏈和重鏈的一段單鏈抗體(single chain fragment variable，scFv)，其作用是特異性識別靶細(xì)胞表面的特異性抗原，選擇合適的細(xì)胞外區(qū)片段是CAR的研究重點。細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)區(qū)是介導(dǎo)T細(xì)胞內(nèi)信號傳遞直至T細(xì)胞活化增殖從而最終完成殺傷腫瘤的過程，同樣也是研究的重要內(nèi)容，已經(jīng)有很多研究聚焦于CAR產(chǎn)生的信號是如何激活T細(xì)胞的[9-10]。

CAR的發(fā)展可因其刺激信號分子組合方式的不同分為3代。第1代CAR僅含有一個信號單元，大多來自于CD3ζ或者FcRg亞單位[11]。這種方式修飾的T細(xì)胞只能產(chǎn)生短暫的分裂，最高的擴增倍數(shù)是3.75倍[12]；在一些臨床應(yīng)用上T細(xì)胞的存活時間不超過63 d，而且在腫瘤位置處沒有檢測到有T細(xì)胞的存在[13-15]；分泌的細(xì)胞因子較少不足以促使T細(xì)胞對抗強大的腫瘤細(xì)胞以致T細(xì)胞凋亡[16]。因此，第1代CAR在臨床上治療淋巴瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、卵巢癌和腎癌等受到了一定的限制[12，17-19]。

第2代CAR的研究更多關(guān)注的是如何在第1代CAR的基礎(chǔ)上引入1個共刺激分子，也就是T細(xì)胞受體與配體相結(jié)合的共刺激路徑。研究表明，細(xì)胞內(nèi)含有CD28分子與CD3ζ的CAR不僅增加T細(xì)胞的擴增倍數(shù)而且增強了T細(xì)胞的抗腫瘤特性[20-23]?，F(xiàn)在已經(jīng)有大量的研究證明除了CD28分子外，腫瘤壞死因子家族成員CD27、4-1BB(CD137)、OX40 (CD134)等均可以為CAR-T提供協(xié)同刺激信號[24-26]。Savoldo等[15]在治療B細(xì)胞淋巴瘤時分別用CD19 CAR-T和CD19-28 CAR-T來比較第1代和第2代CAR的抗腫瘤效果，結(jié)果顯示在T細(xì)胞的擴增和體內(nèi)持久性方面第2代CAR都優(yōu)于第1代CAR，目前用于臨床試驗的主要是第2代CAR。

第3代CAR是在第2代的基礎(chǔ)上又增加了1個共刺激分子。有研究表明，2個CD28及4-1BB、CD3ζ偶聯(lián)形成的第3代CAR可增強T細(xì)胞的殺瘤能力，并延長了T細(xì)胞在體內(nèi)的存活時間，盡管一些臨床前實驗證明第3代CAR在T細(xì)胞的擴增倍數(shù)、體內(nèi)存活時間以及分泌細(xì)胞因子的能力都較第2代有優(yōu)勢[27-29]。但是美國Morgan等[30]報道的1例結(jié)腸癌合并肝和肺轉(zhuǎn)移患者，在應(yīng)用第3代人類表皮生長因子受體2-CAR-T治療后第5天死亡的結(jié)果表明，第3代CAR技術(shù)用于臨床仍然存在一定的風(fēng)險。因此，第3代CAR用于臨床還有較長的路要走。CAR結(jié)構(gòu)見圖1。

圖1 嵌合抗原受體結(jié)構(gòu)

2 CAR-T在臨床應(yīng)用中遇到的問題

目前，CAR-T在淋巴瘤、白血病治療的臨床應(yīng)用已獲得了可喜的成績，在卵巢癌、乳腺癌、肺癌等研究中也取得了一定的突破(表1)。但是現(xiàn)在CART治療領(lǐng)域也面臨著不少需要解決的問題，如輸注細(xì)胞數(shù)量、T細(xì)胞增殖能力、支持性細(xì)胞因子、輸注細(xì)胞時機等在內(nèi)的臨床方案的優(yōu)化，已經(jīng)取得成功的CAR-T治療是否可以進(jìn)入腫瘤疾病的標(biāo)準(zhǔn)治療程序。CD19 CAR-T在血液腫瘤治療中的成功是否可以成功延展到實體惡性腫瘤。此外，CAR-T的研究以及臨床應(yīng)用中還暴露出了一些諸如脫靶效應(yīng)、“細(xì)胞因子風(fēng)暴”的不良反應(yīng)，這些都值得關(guān)注和需要進(jìn)一步研究。

2.1 脫靶效應(yīng) 目前，越來越多的臨床試驗暴露出CAR-T的安全問題。首先就是脫靶效應(yīng)，其主要特征是導(dǎo)致針對正常組織的殺傷作用。用于腫瘤治療的多數(shù)靶抗原在人體正常組織中也會有微量的表達(dá)，所以對靶抗原親和力強、殺傷能力強的CAR-T與這類抗原作用勢必造成組織損傷，即為“脫靶效應(yīng)”。腫瘤抗原分為腫瘤特異性抗原(tumor specific antigen，TSA)和腫瘤相關(guān)抗原(tumor associated antigen，TAA)。TSA只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞而不表達(dá)于正常細(xì)胞的抗原。TAA是指一類既表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，也表達(dá)于正常細(xì)胞的抗原。目前發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用的腫瘤抗原中TSA相對較少，大多是TAA，其中研究最多的是以CD19、CD20為靶抗原的CAR-T治療B細(xì)胞惡性腫瘤[31-34]。這類以 CD19、CD20為靶抗原的CAR-T治療在高效殺傷惡性B細(xì)胞的同時也殺傷機體內(nèi)其他B細(xì)胞，導(dǎo)致患者長期處于免疫功能低下狀態(tài)，需采用特定的維持療法。

表1 CAR-T治療腫瘤的臨床試驗

Lamers等[19]研究表明，用特異性識別碳酸酐酶-ⅨCAR修飾T細(xì)胞在治療轉(zhuǎn)移性腎細(xì)胞癌時因為正常肝臟細(xì)胞會有少量碳酸酐酶-Ⅸ的表達(dá)，對肝細(xì)胞造成了一定的毒性，說明CAR-T的脫靶問題在臨床治療中需要持續(xù)的關(guān)注。研發(fā)與靶抗原具有特定親和力的CAR-T可能不失為一種有效的解決辦法；另外，發(fā)現(xiàn)和使用腫瘤特異性抗原作為CAR-T治療的靶點雖然比較困難，但也是最為有效的解決方法。

2.2 細(xì)胞因子風(fēng)暴 第2、3代CAR中引入了1個或多個共刺激分子，細(xì)胞活化、增殖、殺傷能力大幅增強，致使細(xì)胞治療過程中多種細(xì)胞因子，如白介素(interleukin，IL)-1、IL-6、IL-12、γ-干擾素等大量釋放到機體循環(huán)系統(tǒng)中，引起惡心、頭痛、心動過速、低血壓、皮疹、呼吸急促等臨床癥狀，嚴(yán)重者可導(dǎo)致多器官功能衰竭或者急性呼吸窘迫綜合征，這就是所謂的“細(xì)胞因子風(fēng)暴”?！凹?xì)胞因子風(fēng)暴”常發(fā)生于細(xì)胞治療后6～20 d，與患者原有的疾病、基因多態(tài)性和CAR的結(jié)構(gòu)因素關(guān)系密切。Brentjens等[35]報道的1例慢性淋巴細(xì)胞白血病患者死亡的詳情，該患者在輸入第2代CAR修飾的自體T細(xì)胞2 d便出現(xiàn)發(fā)熱、低血壓、呼吸困難和腎衰竭，并于治療后4 d死亡，“細(xì)胞因子風(fēng)暴”可能是其致死的主要原因之一。

除了以上提到的細(xì)胞毒性，CAR-T引起的過敏反應(yīng)也是值得關(guān)注的。Maus等[36]報道了4例鼠源抗體修飾的CAR-T在第3次輸入患者體內(nèi)后，4例均在數(shù)分鐘內(nèi)產(chǎn)生過敏反應(yīng)，接著心臟驟停?？赡苁且驗槭笤葱缘男蛄姓T導(dǎo)患者體內(nèi)產(chǎn)生免疫蛋白E抗體，從而導(dǎo)致患者死亡。這項研究說明鼠源抗體也是CAR-T用于臨床治療腫瘤的一個隱患。

3 CAR-T應(yīng)用的新策略

3.1 效應(yīng)細(xì)胞的選擇 目前用于CAR技術(shù)的主要效應(yīng)細(xì)胞有T細(xì)胞、自然殺傷(natural killer cell，NK)細(xì)胞、腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞等，其中大多數(shù)是T細(xì)胞[37]。研究顯示，表達(dá)CAR的不同T細(xì)胞亞群的臨床抗腫瘤效果是有差異的，所以對最有效的T細(xì)胞亞群進(jìn)行精確檢測和分離可謂是重中之重；已證實CD8＋是主要的效應(yīng)細(xì)胞，CD4＋可輔助細(xì)胞免疫進(jìn)行應(yīng)答，如果將兩者共同培養(yǎng)可促進(jìn)細(xì)胞毒效應(yīng)T細(xì)胞的大量制備；初始T細(xì)胞和中樞記憶T細(xì)胞的侵入能力均優(yōu)于已經(jīng)分化了的T細(xì)胞[38-40]。Gattinoni等[41]于2011年發(fā)現(xiàn)干細(xì)胞樣記憶T細(xì)胞有著兼具初始T細(xì)胞和記憶T細(xì)胞兩者的優(yōu)勢，在臨床模型中表現(xiàn)出較好的效果。另外，CAR-T的殺瘤能力和亞型與體外培養(yǎng)所加的細(xì)胞因子相關(guān)。Xu等[42]研究了CAR-T在體內(nèi)的持久性及殺瘤能力與體外培養(yǎng)所加的細(xì)胞因子之間的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)體外培養(yǎng)時加入IL-7和IL-15可提高CAR-T的殺傷腫瘤能力。Gargett和Brown[43]的研究也發(fā)現(xiàn)了同樣的結(jié)果，而且建議將IL-7、IL-15用于臨床治療時細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

另外，具有抗腫瘤能力的NK細(xì)胞也被用作CAR的效應(yīng)細(xì)胞，早在10年前，Imai等[44]就發(fā)現(xiàn)可通過反轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)CD19 CAR實現(xiàn)NK細(xì)胞對ALL的治療，且共刺激分子CD137能增強其功效。

另一種具有抗腫瘤效應(yīng)的細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞，因其具有廣譜抗腫瘤作用、不需要接觸抗原即可在培養(yǎng)基中快速擴增的特點[45]，被越來越多的研發(fā)人員尤其是國內(nèi)的研究人員作為CAR的效應(yīng)細(xì)胞。

3.2 人工調(diào)控CAR表達(dá) 基因治療的安全性仍然是人們最為關(guān)注的熱點之一，而人工調(diào)控基因表達(dá)是解決基因治療安全性問題的策略之一。即在進(jìn)行細(xì)胞治療時可以引入自殺式人工調(diào)控開關(guān)，發(fā)生毒性反應(yīng)后可通過誘導(dǎo)自殺基因表達(dá)來清除基因修飾的T細(xì)胞，從而防止嚴(yán)重后果的發(fā)生?；瘜W(xué)誘導(dǎo)二聚化/半胱天冬酶9、單純皰疹病毒胸苷激酶/丙氧鳥苷已被引入CAR-T治療中[46-47]。CAR-T中引入自殺基因可有效地將細(xì)胞毒性減到最小，從而提高治療效果。

3.3 共刺激分子組合的優(yōu)化 第2、3代CAR因加入了2個或者多個共刺激分子使得T細(xì)胞的殺瘤能力、細(xì)胞因子的釋放和在體內(nèi)的存留時間都大大增加，可見共刺激分子的數(shù)量及組合方式對T細(xì)胞的功能有很大的影響。如何才能選擇最優(yōu)的共刺激分子組合并獲得最佳的CAR結(jié)構(gòu)是目前研究的重點。Song等[48]和 Redmond等[49]將 CD28、CD134和CD137分別連接到CD3ζ鏈上，證明增加CD28后增強了T細(xì)胞的增殖能力，由此證明了CD28是必要的共刺激分子；后來又分別證明了CD134可增強被CD28修飾的T細(xì)胞的活化，CD137有助于延長T細(xì)胞的存活時間?？烧T導(dǎo)的協(xié)同刺激分子的加入能有效地溶解目標(biāo)細(xì)胞[10，25，50]。另外，CAR-T的殺瘤能力也受跨膜區(qū)序列的影響[51]。最優(yōu)的CAR結(jié)構(gòu)仍然是CAR技術(shù)開發(fā)的要點和熱點。

3.4 轉(zhuǎn)導(dǎo)方法的選擇 目前應(yīng)用最多的是以病毒作為載體。慢病毒載體是以人類免疫缺陷Ⅰ型病毒為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體，可有效感染包括干細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞，對處于細(xì)胞周期中的任一時期的細(xì)胞都有很強的感染能力。同時，慢病毒可避免反轉(zhuǎn)錄病毒帶來的插入突變，還可以自身失活，這些優(yōu)勢都使得它成為“明星”載體。在CAR-T治療的實驗中，帶有CD3或者CD28的慢病毒取得了良好的感染效果，其效率非常之高[52]。另有研究顯示，細(xì)胞因子IL-7能夠增加T細(xì)胞的感染率[53]。Lentigen公司的慢病毒包裝系統(tǒng)在CAR-T治療血液系統(tǒng)腫瘤中得到了很好的應(yīng)用。但是構(gòu)建重組的慢病毒載體的花費較高，這一缺點限制了慢病毒的使用。

作為基因工具，“睡美人(sleeping beauty，SB)”轉(zhuǎn)座系統(tǒng)是由Ivics等[54]重建鮭魚基因組中的一個失活基因而得到的，它在基因治療和基因標(biāo)簽方面都發(fā)揮了非常重要的作用。SB轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)也能隨機整合到人類T細(xì)胞基因組中[55]。SB轉(zhuǎn)座系統(tǒng)在靶向CD19的CAR-T研究和靶向p53和T細(xì)胞識別黑色素瘤抗原-1的CAR-T研究中轉(zhuǎn)染效率可達(dá)20%～30%。此外，Piggybac轉(zhuǎn)座子系統(tǒng)在用于CAR修飾中不僅可以穩(wěn)定長期的表達(dá)外源基因，還可裝載長達(dá)18 kb的基因片段，能夠代替Cre/loxP成為又一理想的載體[56]。最近，Saito等[57]研究Piggybac轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)CD19特異性CAR治療費城染色體陽性急性淋巴細(xì)胞白血病的結(jié)果證明，Piggybac轉(zhuǎn)座子可為細(xì)胞免疫治療抗藥性費城染色體陽性急性淋巴細(xì)胞白血病提供一個高效、廉價和安全的手段。

體外轉(zhuǎn)錄編碼CAR的RNA是轉(zhuǎn)導(dǎo)的另一個選擇。研究表明，RNA的體外轉(zhuǎn)導(dǎo)可在較短的時間內(nèi)刺激更多CAR的表面抗原的表達(dá)，而且在治療前期的模型實驗中也證實了mRNA介導(dǎo)的CAR-T能夠積極對抗腫瘤細(xì)胞[58-60]。雖然在細(xì)胞治療前可直接進(jìn)行RNA轉(zhuǎn)導(dǎo)，但其存在明顯的缺點:①短期內(nèi)CAR的表達(dá)只能刺激少量T細(xì)胞的分化進(jìn)而影響治療效果，能否達(dá)到抵抗腫瘤的作用還有待于進(jìn)一步研究；②用RNA轉(zhuǎn)導(dǎo)這一方式也無法保證CAR-T在體內(nèi)的存留時間和記憶效果。

質(zhì)粒載體在基因治療中占據(jù)著非常重要的地位，與病毒載體相比，質(zhì)粒載體的構(gòu)建花費較少，而且不會整合到宿主的基因組上，安全性有一定的保證。但是，質(zhì)粒載體的構(gòu)建需要花費更多的時間，其抗性基因以及未甲基化的序列會影響基因的表達(dá)，而且人類的體液和細(xì)胞免疫會對質(zhì)粒載體的抗性基因產(chǎn)生免疫反應(yīng)[14]。微環(huán)DNA是一種新穎的小環(huán)超螺旋表達(dá)框，可通過位點特異性重組得到，它缺乏復(fù)制原點、抗性標(biāo)志基因的細(xì)菌序列，增強了臨床上的安全性系數(shù)[61]，在CAR-T治療中有著自己的應(yīng)用潛力。

此外，電擊穿孔T細(xì)胞導(dǎo)入mRNA的轉(zhuǎn)染效率可達(dá)90%以上；鋅指蛋白核酸酶通過鋅指蛋白的特異性識別靶細(xì)胞使得整合效率在20%以上[62]?；蚪M編輯新技術(shù)CRISPR-Cas是一種快速、高效、可靠的用于定點構(gòu)建基因敲除的新方法，在動物模型中的應(yīng)用前景非常廣闊，或?qū)⒊蔀榧?xì)胞免疫治療中基因轉(zhuǎn)導(dǎo)方法的新選擇。

3.5 構(gòu)建雙靶抗原CAR 細(xì)胞治療中靶抗原應(yīng)具有均一、特異性強且抗原分泌量較少的特點。為了達(dá)到以上要求，可以構(gòu)建雙靶抗原CAR來提高腫瘤的靶向性。其策略主要是讓1個T細(xì)胞表達(dá)2個不同的CAR，即使其中一個CAR的抗原在正常組織中有少量表達(dá)，也可通過另一個CAR來提高T細(xì)胞的特異性。Duong等[63]在2011年的時候發(fā)表了1種類似的方法，結(jié)果證明表達(dá)2個不同CAR的T細(xì)胞可有效增強靶細(xì)胞的免疫反應(yīng)。Kloss等[64]構(gòu)建了針對前列腺特異性膜抗原和前列腺干細(xì)胞抗原的雙靶抗原受體，研究發(fā)現(xiàn)表達(dá)雙抗原受體的T細(xì)胞可有效地殺滅腫瘤細(xì)胞，而表達(dá)單抗原受體的T細(xì)胞只能影響腫瘤細(xì)胞的生長。Gheybi等[65]也構(gòu)建了針對乳腺癌的雙靶抗原黏蛋白1和HER2。通過構(gòu)建雙靶抗原可有效增加T細(xì)胞的特異性靶向抗腫瘤能力。

3.6 構(gòu)建“通用”CAR 為了擴大T細(xì)胞在腫瘤治療方面的應(yīng)用，可以構(gòu)建對多種腫瘤都起作用的“通用CAR(universal CAR，uCAR)”。Tamada等[66]和Urbanska等[67]構(gòu)建的uCAR不僅使目的腫瘤分子溶解產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，還可以使T細(xì)胞迅速擴增。近來，Kudo等[68]構(gòu)建的uCAR的細(xì)胞外信號區(qū)為高親和性的CD16可變區(qū)和CD8a鉸鏈區(qū)，且研究表明這種CAR對多種腫瘤都有很強的親和力，而且T細(xì)胞的增殖也非常穩(wěn)定。

另外，還可以構(gòu)建抑制性CAR，用來拮抗痕量的CAR與正常組織的靶抗原作用后效應(yīng)T細(xì)胞的激活。同時，還可以構(gòu)建親和性可調(diào)節(jié)的CAR，使其以不同的親和性識別抗原表達(dá)量不同的腫瘤細(xì)胞。

4 展望

隨著現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，CAR-T在腫瘤治療的臨床應(yīng)用中越來越被人們重視。時至今日，CAR的腫瘤免疫治療已由第1代發(fā)展到第3代，CAR-T的優(yōu)勢和臨床前期實驗結(jié)果顯示CAR-T在治療腫瘤方面更是有著無可取代的應(yīng)用前景。2014年9月4日美國食品和藥物管理局批準(zhǔn)了第1個程序性死亡受體1阻斷藥 Keytruda?(pembrolizumab)，本品被譽為免疫腫瘤之星。在CAR-T治療帶來興奮的同時也應(yīng)該看到，腫瘤免疫治療仍就處于發(fā)展階段，有關(guān)CAR的大多數(shù)研究和臨床試驗仍以血液腫瘤為主，在實體性腫瘤方面還有很大的發(fā)展空間[69-70]。目前，越來越多的研究人員投入到對CAR腫瘤免疫治療方法的探索和完善中，在現(xiàn)今醫(yī)療水平與日俱爭的時代，有理由相信CAR-T在細(xì)胞免疫治療腫瘤的舞臺上將散發(fā)出更加璀璨的光芒。

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Advances in cancer immunotherapy based on chimeric antigen receptor

LI Ling，MA Jianbo
[Zhongzhengdaohe(Beijing)Bio-Technology Co.，Beijing 100176，China]

Recently，application of chimeric antigen receptor(CAR)modified T cells in the treatment of lymphoma，leukemia，brain glioma，melanoma，lung cancer，prostate cancer，pancreatic cancer and ovarian cancer has made very exciting progress.CAR is a kind of genetically engineered receptor，the common form of these molecules consists of extracellular antigen recognition region，spacer，transmembrane domain(TM)and intracellular endodomain，the antigen recognition region generally is single-chain variable fragments(scFv)derived from monoclonal antibodies which can recognize target antigen without MHC restriction，and the intracellular endodomain generally is comprised of CD3 zeta and co-stimulating molecules.This kind of unique design and strong antitumor effect make the CAR-T more and more widely used.In this review，we highlight recent advances of CAR-T in clinical applications，discovered problems and possible solving strategies in cancer therapy.

Chimeric antigen receptor(CAR)；T cell；Tumor；Immunotherapy

R730.51

A

2095-3097(2015)02-0097-08

10.3969/j.issn.2095-3097.2015.02.010

2014-12-02 本文編輯:馮 博)

100176北京，中政道和(北京)生物科技有限公司(李玲，馬建波)

馬建波，E-mail:majianbo＠gmail.com