劉錦霞, 李 晶*, 李 娜, 杜文靜, 丁 品, 柳軍璽, 張建軍, 武建榮

(1.甘肅省科學(xué)院生物研究所, 蘭州 730000;2.中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所,甘肅省天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 蘭州 730000)

?

黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)的生物活性

劉錦霞1, 李 晶1*, 李 娜1, 杜文靜1, 丁 品1, 柳軍璽2, 張建軍1, 武建榮1

(1.甘肅省科學(xué)院生物研究所, 蘭州 730000;2.中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所,甘肅省天然藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 蘭州 730000)

棉鈴蟲(chóng)食性雜,寄主廣,為害嚴(yán)重又對(duì)現(xiàn)有農(nóng)藥易產(chǎn)生抗藥性,為有效防控其對(duì)作物的為害, 本文通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定研究了甘南草原有毒植物黃帚橐吾(Ligulariavirgaurea)乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的農(nóng)藥生物活性,結(jié)果表明:黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)有很強(qiáng)的拒食活性,拒食中濃度(AFC50)為2.59 mg/mL。當(dāng)提取物濃度為10.00 mg/mL時(shí),拒食率可達(dá)95%以上;觸殺和胃毒活性也較強(qiáng),致死中濃度(LC50)在3.00 mg/mL左右,濃度為10.00 mg/mL時(shí),校正死亡率均可達(dá)80%以上,而且3種作用的活性強(qiáng)度隨濃度增大而增強(qiáng)。 殺卵和熏蒸活性相對(duì)較弱,但濃度大于10.00 mg/mL時(shí)也有比較明顯的殺滅活性。本研究結(jié)果證明黃帚橐吾乙醇提取物可以有效防控棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的危害,為黃帚橐吾類農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)和棉鈴蟲(chóng)的有效防治提供了依據(jù)和有效途徑。

黃帚橐吾; 棉鈴蟲(chóng); 農(nóng)藥; 生物活性

黃帚橐吾[Ligulariavirgaurea(Maxim.) Mattf.]系菊科橐吾屬多年生草本有毒植物,主要分布于我國(guó)西藏東北部、云南西北部、四川、青海、甘肅、不丹和尼泊爾等地,生長(zhǎng)于海拔2 600～4 700 m的高寒草場(chǎng)、沼澤草甸、陰坡濕地及灌叢中,其大毒,性味甘、苦,入藥有清宿熱、解毒愈瘡,催吐等功效[1]。近年來(lái), 青藏高原東部的高寒草場(chǎng)不斷退化, 群落結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,毒雜草增多,黃帚橐吾就是其中之一[2],其綜合利用也成為近幾年醫(yī)藥和植保等領(lǐng)域研究的熱點(diǎn),據(jù)報(bào)道,黃帚橐吾莖葉甲醇提取物對(duì)菜粉蝶幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的拒食和觸殺作用,對(duì)水稻紋枯病菌和玉米大斑病菌也有較強(qiáng)的抑制作用[3-4],但黃帚橐吾對(duì)棉鈴蟲(chóng)的農(nóng)藥生物活性國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。棉鈴蟲(chóng)(HelicoverpaarmigeraHübner)屬鱗翅目,夜蛾科,廣泛分布在中國(guó)及世界各地。該蟲(chóng)食性雜,寄主植物有20多科200余種。該蟲(chóng)是棉花蕾鈴期重要的鉆蛀性害蟲(chóng),主要蛀食蕾、花、鈴,其次食害嫩葉。除棉花外,還為害小麥、玉米、高粱、番茄、豆類、瓜類等,由于種植結(jié)構(gòu)調(diào)整,氣候變化及其對(duì)現(xiàn)用農(nóng)藥的抗藥性等原因, 目前棉鈴蟲(chóng)為害逐年加重, 對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成極大危害[5-7]。化學(xué)農(nóng)藥作為防治棉鈴蟲(chóng)的主要手段,起到了非常重要的作用, 但是大量使用化學(xué)農(nóng)藥對(duì)生態(tài)環(huán)境和人類健康構(gòu)成不可逆轉(zhuǎn)的威脅。因此,開(kāi)發(fā)環(huán)保、安全、高效的新農(nóng)藥勢(shì)在必行。植物源殺蟲(chóng)劑以其作用方式多樣、害蟲(chóng)不易產(chǎn)生抗藥性、低毒、無(wú)殘留、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),在植物病蟲(chóng)害防控體系中越來(lái)越受到植保工作者的重視。本文以棉鈴蟲(chóng)3 齡前幼蟲(chóng)為靶標(biāo), 對(duì)黃帚橐吾乙醇提取物的農(nóng)藥生物活性進(jìn)行初步研究, 旨在為有效防控棉鈴蟲(chóng)和開(kāi)發(fā)新的無(wú)公害生物農(nóng)藥提供基礎(chǔ)和參考。

1 材料和方法

1.1 材料

黃帚橐吾(L.virgaurea)提取物為中國(guó)科學(xué)院蘭州化學(xué)物理研究所提供的黃帚橐吾全草乙醇浸提物,有特異氣味的深褐色浸膏。棉鈴蟲(chóng)(H.armigera)2～3 齡幼蟲(chóng)(體重8～11 mg)為該實(shí)驗(yàn)室用無(wú)菌小豆苗人工飼養(yǎng)的試蟲(chóng),飼養(yǎng)條件: 溫度(25±1)℃,相對(duì)濕度(80±5)%,光照時(shí)間 12 h/d,光強(qiáng): 2 000～3 000 lx。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 胃毒活性測(cè)定

采用葉片載毒法[8],首先將黃帚橐吾提取物用丙酮稀釋成1.00、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/mL 5個(gè)濃度的藥液樣品。再選取直徑0.60 cm的無(wú)毒豆苗葉片,用1.00 μL的微量點(diǎn)樣器從低濃度開(kāi)始,在每一片葉上點(diǎn)涂0.50 μL的藥液,每個(gè)濃度點(diǎn)涂90 片葉,用點(diǎn)涂丙酮作為對(duì)照,置于通風(fēng)處揮發(fā)掉溶劑后放入5 cm 培養(yǎng)皿中(皿底鋪保濕濾紙,防止葉片干縮),接入3 齡饑餓24 h的幼蟲(chóng),每頭試蟲(chóng)給予一片載毒葉片,24 h后將沒(méi)有取食完一片葉的試蟲(chóng)淘汰,剩下的處理蟲(chóng)飼喂新鮮葉片。每處理30 頭試蟲(chóng),3 次重復(fù)。每天定時(shí)觀察、記錄,連續(xù)7 d。計(jì)算死亡率、校正死亡率和LC50。

校正死亡率(%)=(處理組死亡率-對(duì)照組死亡率)/(100-對(duì)照組死亡率)×100。

1.2.2 觸殺活性測(cè)定

采用點(diǎn)滴法[9],將2～3 齡棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)置于12.00 cm培養(yǎng)皿中,用微量點(diǎn)樣器點(diǎn)滴試蟲(chóng)的前胸背板,每頭0.50 μL,每皿10頭試蟲(chóng),20 min后蓋上培養(yǎng)皿蓋。設(shè)置黃帚橐吾提取物1.00、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/mL 5個(gè)濃度處理,每處理20頭試蟲(chóng),3次重復(fù),丙酮作為對(duì)照。處理后的試蟲(chóng)用新鮮豆苗飼喂,連續(xù)觀察7 d,記錄死亡蟲(chóng)數(shù)、中毒癥狀、活動(dòng)狀態(tài)、取食情況。計(jì)算死亡率、校正死亡率和LC50。

1.2.3 拒食活性測(cè)定

采用葉碟法測(cè)其選擇性拒食活性[9],用丙酮作溶劑,將黃帚橐吾提取物稀釋成1.00、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/mL 5 個(gè)濃度的藥液備用。挑選直徑為1.00 cm新鮮豆苗葉片,放入待測(cè)藥液中浸漬5 s取出, 對(duì)照葉片以丙酮作相同處理。置于通風(fēng)處待丙酮自然揮發(fā)后,取處理和對(duì)照葉碟各一片平行放置于直徑5.00 cm的培養(yǎng)皿中,皿底內(nèi)墊保濕濾紙,每皿接入1 頭饑餓24 h 的3 齡棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng),每處理20 頭試蟲(chóng),重復(fù)3 次。24 h 后取出殘存葉片,用坐標(biāo)方格紙法測(cè)定取食面積,并據(jù)此計(jì)算試蟲(chóng)拒食率和拒食中濃度(AFC50):

拒食率(%)=(Sck-S)/Sck×100

式中:Sck、S分別表示對(duì)照和處理的取食面積。

1.2.4 熏蒸活性測(cè)定

采用三角瓶濾紙密閉熏蒸法[10],在250 mL 磨口三角瓶底部墊保濕濾紙,每瓶接入10 頭2～3 齡棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng),并放適量新鮮豆苗葉片,黃帚橐吾提取物用丙酮稀釋成1.00、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/mL 5個(gè)濃度的藥液樣品,每個(gè)濃度藥液取200 μL點(diǎn)滴于濾紙條(7 cm2)上,懸掛于通風(fēng)處3 min后,用少量凡士林粘于磨口三角瓶?jī)?nèi)口,迅速蓋好瓶塞,以丙酮處理為對(duì)照。每處理重復(fù) 5 次,將各處理置于光照培養(yǎng)箱中于溫度(25±1)℃,光照時(shí)間12 h/d的條件下飼養(yǎng),每12 h檢查一次死亡蟲(chóng)數(shù),計(jì)算死亡率、校正死亡率和LC50。

1.2.5 殺卵活性測(cè)定

采用浸卵法[11],將黃帚橐吾提取物用丙酮稀釋成1.00、2.50、5.00、10.00、20.00 mg/mL 5個(gè)濃度的藥液備用,將計(jì)數(shù)后的棉鈴蟲(chóng)卵塊(70 粒/塊)放入不同濃度藥液中浸 15 s,取出置于吸水紙上,待溶液揮發(fā)完后,放入墊有保濕濾紙的直徑 15 cm 的培養(yǎng)皿中,每處理3次重復(fù),置于光照培養(yǎng)箱中于溫度(25±1)℃,光照時(shí)間12 h/d的條件下培養(yǎng),每天觀察卵孵化數(shù)及幼蟲(chóng)死亡數(shù),根據(jù)是否孵化出幼蟲(chóng)判斷死卵與活卵,完全孵化的卵是活卵,未孵化的殘存卵或幼蟲(chóng)不能鉆出卵殼都判斷為死卵,計(jì)算其7 d 卵孵化率、幼蟲(chóng)死亡率和抑制卵孵化的LC50。

孵化率(%)=第n天累計(jì)孵化蟲(chóng)卵數(shù)/供試蟲(chóng)卵數(shù)×100。

1.2.6 數(shù)據(jù)分析處理

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理和分析;校正累計(jì)死亡率經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)換后再進(jìn)行方差分析(ANOVA),多重比較選用Duncan法。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的胃毒活性

由表1可知,黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡前幼蟲(chóng)有胃毒活性,這種活性作用與提取物濃度呈正相關(guān),LC50為2.02(1.34～2.72)mg/mL(表6), 當(dāng)其濃度達(dá)10.00 mg/mL 以上時(shí)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)7 d的校正累計(jì)死亡率超過(guò)了80%,與低濃度之間在0.05水平上存在顯著性差異,而且黃帚橐吾提取物通過(guò)胃毒作用對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的致死高峰期在用藥后的第5～7天,取食完帶毒葉片后70%的試蟲(chóng)取食減少,第5天開(kāi)始濃度在10.00 mg/mL以上的處理試蟲(chóng)停止取食,行動(dòng)遲緩,死亡率顯著增加。

表1 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)胃毒活性1)

1) 表中校正累計(jì)死亡率數(shù)據(jù)為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差;表中同列數(shù)據(jù)后字母相同者,表示在0.05水平上差異不顯著。下表同。

The corrected cumulative mortality in the table are mean±SD.The data within the same column followed by the same letters are not significantly different at 0.05 level. The same as in the following tables.

2.2 黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的觸殺活性

由表2可知, 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡前幼蟲(chóng)有較強(qiáng)的觸殺活性,其活性與濃度呈正相關(guān), 其濃度在1.00～5.00 mg/mL時(shí),7 d的校正累計(jì)死亡率不存在顯著性差異,LC50為3.34(2.70～5.15)mg/mL(表6),但藥物濃度成倍增加時(shí),死亡率也劇增,當(dāng)濃度為20.00 mg/mL時(shí)校正累計(jì)死亡率增至93.22%,與低濃度間存在顯著差異。處理24 h后所有試蟲(chóng)活動(dòng)正常,但取食微減,死亡高峰期在用藥后第6～7天。

表2 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)觸殺活性

2.3 黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的拒食活性

試驗(yàn)結(jié)果顯示(見(jiàn)表3),黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡前幼蟲(chóng)有顯著的拒食活性,且與藥物濃度呈正相關(guān),AFC50為2.59(2.00～2.81)mg/mL(見(jiàn)表6),濃度越大拒食活性越明顯,與低濃度(小于5.00 mg/mL)間存在顯著差異,當(dāng)藥物濃度為10.00 mg/mL時(shí),拒食率高達(dá)95.81%,濃度為20.00 mg/mL,試蟲(chóng)完全拒食,而且處理后正常飼喂時(shí)取食量與低濃度處理及對(duì)照相比顯著降低,一半試蟲(chóng)甚至不再取食,這說(shuō)明黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的生物毒性作用方式復(fù)雜,但以影響其進(jìn)食能力為主。

表3 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)的拒食活性

2.4 黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的熏蒸活性

黃帚橐吾體內(nèi)富含具特殊氣味的單萜類、芳香族類揮發(fā)性化合物,而有毒植物體的揮發(fā)物是一類重要的害蟲(chóng)熏蒸作用物質(zhì)[12-13]。試驗(yàn)結(jié)果顯示(表4,表6),黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡前幼蟲(chóng)具有熏蒸活性,且與濃度呈正相關(guān),LC50為5.86(4.94～7.65)mg/mL,但是低濃度(小于5.00 mg/mL)時(shí)熏蒸活性比較弱,只有達(dá)到比較高的濃度(20.00 mg/mL), 這種熏蒸活性才比較強(qiáng),與低濃度間存在顯著差異。試驗(yàn)過(guò)程中還發(fā)現(xiàn),處理12 h 后,試蟲(chóng)取食明顯減少,24 h后90%試蟲(chóng)停止取食,這說(shuō)明黃帚橐吾提取物中的某個(gè)或某些揮發(fā)性物質(zhì)影響了棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的取食能力。

2.5 黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)卵的殺卵活性

黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)卵有一定的殺滅活性,藥物濃度越大殺卵活性越強(qiáng)(表5),LC50為6.67 mg/mL(表6),當(dāng)其濃度在10.00 mg/mL以上時(shí),蟲(chóng)卵的孵化率小于35%,幼蟲(chóng)的存活率也在52%以下,與對(duì)照在0.05水平上存在顯著性差異。從表6還可知,黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的所有活性作用中,殺卵作用的LC50最大(6.67 mg/mL),這說(shuō)明其對(duì)棉鈴蟲(chóng)卵的生物活性沒(méi)有其他作用強(qiáng),從卵控制棉鈴蟲(chóng)為害的能力相對(duì)較弱。

表4 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)熏蒸活性

表5 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)卵殺卵活性

表6 黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)2～3齡幼蟲(chóng)的生物活性回歸分析

3 討論

長(zhǎng)期應(yīng)用化學(xué)農(nóng)藥使得棉鈴蟲(chóng)抗藥性增強(qiáng)、繁衍猖獗,目前我國(guó)棉鈴蟲(chóng)已經(jīng)對(duì)擬除蟲(chóng)菊酯、有機(jī)磷和氨基甲酸酯及其混配劑均表現(xiàn)出明顯的抗藥性,加之嚴(yán)重威脅人類健康生存的農(nóng)藥殘留問(wèn)題,促使人們尋求各種趨利避害的方法和安全環(huán)保的有效活性物質(zhì)控制有害生物,從植物次生物質(zhì)中尋求新的殺蟲(chóng)活性物質(zhì)是開(kāi)發(fā)新型殺蟲(chóng)劑以及克服或延緩害蟲(chóng)抗藥性的有效途徑之一[14-16]。本文通過(guò)室內(nèi)毒力測(cè)定研究了甘南草原有毒植物黃帚橐吾提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的農(nóng)藥生物活性作用,結(jié)果表明:黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)3齡前幼蟲(chóng)有很強(qiáng)的拒食活性,AFC50為2.59 mg/mL,濃度為10.00 mg/mL時(shí),拒食率可達(dá)95%以上;觸殺和胃毒活性也較強(qiáng),LC50在3.00 mg/mL左右,濃度為10.00 mg/mL時(shí),校正死亡率均可達(dá)80%以上,而且3 種作用的活性強(qiáng)度隨濃度增大而增強(qiáng)。 殺卵和熏蒸活性相對(duì)較弱,但濃度大于10.00 mg/mL時(shí)也有比較明顯的殺滅活性。這證明黃帚橐吾乙醇提取物中含有可以控制棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的有效活性物質(zhì)。

植物次生物質(zhì)對(duì)靶標(biāo)害蟲(chóng)的活性作用方式是多樣和相互交織的,一般不是直接殺滅靶標(biāo)害蟲(chóng),而是害蟲(chóng)接觸藥物后,大多產(chǎn)生拒食反應(yīng),停止取食或取食量明顯減少,或者藥物通過(guò)體壁和消化系統(tǒng)進(jìn)入蟲(chóng)體抑制和誘導(dǎo)昆蟲(chóng)體內(nèi)的相關(guān)活性酶系(如:GSTs、AChE等),使其生長(zhǎng)發(fā)育受到抑制,不能蛻皮進(jìn)入下一個(gè)發(fā)育階段,最后死亡[17-18]。本研究顯示黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的各種生物活性作用中,靶標(biāo)試蟲(chóng)都在用藥后24～48 h內(nèi)表現(xiàn)出明顯的拒食或取食減少,最終死亡的現(xiàn)象,說(shuō)明黃帚橐吾乙醇提取物對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)的生物活性作用可能是其某些活性成分首先影響了幼蟲(chóng)的神經(jīng)或消化系統(tǒng)酶系,使其不能正常取食,進(jìn)而影響其正常生長(zhǎng)發(fā)育,而且觸殺、胃毒、拒食和熏蒸活性相互作用,從而導(dǎo)致其較強(qiáng)的靶標(biāo)生物活性。在高濃度(20 mg/mL)時(shí),也觀察到少部分幼蟲(chóng)在用藥后12 h死亡的現(xiàn)象,可能是黃帚橐吾乙醇提取物中具有對(duì)棉鈴蟲(chóng)幼蟲(chóng)直接殺滅的高效活性物質(zhì)。因此,黃帚橐吾中的高效活性成分及其對(duì)棉鈴蟲(chóng)的生物活性作用機(jī)理還需進(jìn)一步深入研究,為開(kāi)發(fā)新型高效生物農(nóng)藥和尋找新農(nóng)藥先導(dǎo)化合物奠定基礎(chǔ),提供參考。

甘肅肅南、天祝和甘南等地由于與青藏高原毗鄰,其獨(dú)特的地理、氣候環(huán)境和自然資源,有毒植物種類十分豐富,近年來(lái)由于保護(hù)措施不力,過(guò)度放牧使得這些地區(qū)的天然草場(chǎng)退化,有毒植物大量繁衍,已給畜牧業(yè)發(fā)展帶來(lái)嚴(yán)重危害[19-20]。因此在加強(qiáng)對(duì)有毒植物實(shí)施控制的同時(shí),積極采取科學(xué)措施綜合利用,變害為寶,使其在農(nóng)林牧草的病蟲(chóng)害防控中發(fā)揮重要作用。

[1] 史志誠(chéng). 中國(guó)草地重要有毒植物[M].北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社, 1997.

[2] 馬瑞君,王明理,朱學(xué)泰,等.黃帚橐吾揮發(fā)物的化感作用及其主要成分分析[J].應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào),2005,16(10):1826-1829.

[3] 周麗,高飛,滕云,等.17種高原草地有毒植物對(duì)植物病原真菌生物活性的初步研究[J].四川大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2008,45(1):214-218.

[4] 胡冠芳, 劉敏艷, 李玉奇,等.甘肅天然草地30種有毒植物提取物對(duì)菜粉碟幼蟲(chóng)的拒食和觸殺作用研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào),2011,10(5):169-176.[5] 李曉, 趙志強(qiáng), 鞠倩, 等. 性誘劑對(duì)花生田棉鈴蟲(chóng)和小地老虎防治效果研究初探[J]. 江西農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào), 2013, 25(4): 27-29.

[6] 高明,鄧兆榮,孟慶偉,等.11 種殺蟲(chóng)劑對(duì)棉鈴蟲(chóng)室內(nèi)毒力測(cè)定[J].農(nóng)藥研究與應(yīng)用, 2011,15(3):17-20.

[7] 史麗,賈明慧. 北方地區(qū)棉鈴蟲(chóng)發(fā)生危害及防治研究[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2005(2):15-17.

[8] Ismail F,Wright D J. Synergism of teflubenzuron and chlorfluazuron in an acylurea-resistant field strain ofPlutellaxylostellaL.[J].Pesticide Science, 1992,34(3): 221-226.

[9] 吳文君.殺蟲(chóng)活性的生物篩選[M]∥陳萬(wàn)義,王根龍,李鐘華.新農(nóng)藥的研發(fā)-方法·進(jìn)展.北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2007:115-124.

[10]何玉杰,花日茂,李世廣,等.八角茴香提取物對(duì)長(zhǎng)角扁谷盜成蟲(chóng)的熏蒸作用及其酶活性的影響[J].激光生物學(xué)報(bào),2013,22(2):159-165.

[11]陳小平.川烏頭總生物堿生物活性及作用機(jī)理研究[D].南京:南京林業(yè)大學(xué),2010.

[12]唐艷麗,鄧雁如, 汪漢卿.黃帚橐吾揮發(fā)油化學(xué)成分的研究[J].中國(guó)中藥雜志,2003,28(7):627-628.

[13]孫思蕭,陳曉斌,趙杰.我國(guó)植物源農(nóng)藥研究現(xiàn)狀、應(yīng)用情況及發(fā)展[J].中國(guó)農(nóng)資,2006(9):44-45.

[14]Lu Yanhui, Wu Kongming, Jiang Yuying, et al. Mirid bug outbreaks in multiple crops correlated with wide-scale adoption of Bt cotton in China [J].Science,2010,328:1151-1154.

[15]張一賓,張懌,武賢英.世界農(nóng)藥新進(jìn)展[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社, 2010:13-159.

[16]李美,高興祥,高宗軍,等.蒼耳等48種植物的殺蟲(chóng)活性[J].植物資源與環(huán)境學(xué)報(bào),2008,17(1):33-37.

[17]董向麗,高希武,鄭炳宗. 植物次生物質(zhì)對(duì)棉鈴蟲(chóng)谷胱甘肽S 轉(zhuǎn)移酶和乙酰膽堿酯酶的影響[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào),1998,25(1):72-78.

[18]Ranson H,Prapanthadara L,Hemingway J. Cloning and characterization of two glutathione S-transferases from a DDT-resistant strain ofAnophelesgambiae[J].Biochemical Journal,1997,324(1): 97-98.

[19]呂曉英,呂勝利.甘南州草地畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展問(wèn)題[J].草業(yè)科學(xué),2002,19(7):1-4.

[20]史志誠(chéng),楊旭.草地毒草危害及防除研究概況[J].草業(yè)科學(xué),1994,11(3):52-54.

(責(zé)任編輯：王 音)

Bioactivity of ethanol extracts ofLigulariavirgaureaagainstHelicoverpaarmigera

Liu Jinxia1, Li Jing1, Li Na1, Du Wenjing1, Ding Pin1, Liu Junxi2, Zhang Jianjun1, Wu Jianrong1

(1. Institute of Biology, Gansu Academy of Sciences, Lanzhou 730000, China; 2. Key Laboratory for Natural Medicine of Gansu Province, Lanzhou Institute of Chemical Physics, Chinese Academy of Sciences, Lanzhou 730000, China)

HelicoverpaarmigeraHübner is a major Lepidoptera pest on various crops in China, and it can develop easily pesticide resistance.Ligulariavirgaurea(Maxim.) Mattf. is a kind of poisonous plant growing in the grassland of Gannan Tibetan autonomous prefecture. In order to prevent and controlH.armigeraeffectively, the bioactivity of the ethanol extracts ofL.virgaureaagainstH.armigerawas investigated in laboratory. The results showed that the extracts ofL.virgaureahad strong antifeedant activity against the 2nd-3rd instars ofH.armigerawith the AFC50value of 2.59 mg/mL. Once the concentration of the extracts increased to 10.00 mg/mL, the antifeedant rate could reach to more than 95%. The extracts also demonstrated good contact toxicity and stomach toxicity activity, with LC50value of all above 3.00 mg/mL. The corrected mortality was above 80% when the concentration of the extracts was 10.00 mg/mL. The higher the concentration, the stronger the activity. The extracts had only weak ovicidal and fumigation activities, but the activity was obvious at the concentration of more than 10.00 mg/mL. These results demonstrated that the ethanol extracts ofL.virgaureacould effectively control the harm of ofH.armigeralarvae, which provided a scientific basis for further development of new pesticides withL.virgaureaforH.armigeracontrol.

Ligulariavirgaurea;Helicoverpaarmigera; pesticide; bioactivity

技術(shù)與應(yīng)用Technology&Application

2014-05-07

2014-06-23

全國(guó)科學(xué)院聯(lián)盟合作研究項(xiàng)目(2012)；2013、2014年隴原青年創(chuàng)新人才扶持計(jì)劃項(xiàng)目

S 482.39

B

10.3969/j.issn.0529-1542.2015.04.038

* 通信作者 E-mail:93764672@qq.com