郗玉玲 惠紅巖 王國戧

1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，河南衛(wèi)輝 453100；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科，河南衛(wèi)輝 453100

我院臨床常見病原菌的分布及藥敏結(jié)果分析

郗玉玲1惠紅巖1王國戧2

1.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院藥學(xué)部，河南衛(wèi)輝 453100；2.新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科，河南衛(wèi)輝 453100

目的了解醫(yī)院常見病原菌的分布及藥敏情況，以制訂有針對性的抗菌藥物策略，為臨床合理使用抗菌藥物提供參考。 方法選取新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院2014年4～6月送檢的8148份標(biāo)本，采集標(biāo)本包括痰液、血液、尿液、分泌物、腦脊液，分析分離病原菌的分布及藥敏情況，細(xì)菌培養(yǎng)與鑒定按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》進(jìn)行；藥敏試驗采用美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會推薦的K-B法進(jìn)行。 結(jié)果共檢出1584株病原菌，革蘭陰性桿菌874株，檢出率為55.2%；革蘭陽性球菌574株，檢出率為36.2%；真菌136株，檢出率為8.6%；排名前5位的病原菌為大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、肺炎鏈球菌、肺炎克雷伯菌和金黃色葡萄球菌，分別占16.8%、10.4%、10.0%、9.0%和8.8%。革蘭陰性桿菌中大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌耐藥情況比較普遍，對碳青霉烯類敏感率＞97%，其次是β酶抑制劑敏感率＞60%；非發(fā)酵菌以銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌為主，鮑曼不動桿菌對大多測試抗菌藥物的耐藥率高于銅綠假單胞菌。革蘭陽性球菌中金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌耐藥情況比較普遍；金黃色葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧的敏感率分別為94.3%、97.9%和96.4%；表皮葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧的敏感率分別為87.3%、100.0%和90.4%。結(jié)論應(yīng)定期統(tǒng)計分析病原菌的分布及藥敏情況，及時反饋給臨床，以供臨床醫(yī)師根據(jù)細(xì)菌耐藥特點及藥敏結(jié)果，合理選用抗菌藥物，減少醫(yī)院耐藥菌的產(chǎn)生。

病原菌；分布；抗菌藥物；藥物敏感率

隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛應(yīng)用，細(xì)菌的耐藥性也在不斷上升，尤其是多重耐藥菌、泛耐藥菌的出現(xiàn)給臨床抗感染治療帶來很大的困難。為了解新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院（以下簡稱“我院”）病原菌的分布特點及藥敏結(jié)果，減少細(xì)菌耐藥性的產(chǎn)生，現(xiàn)對我院常見病原菌的分布及藥敏情況進(jìn)行分析，給臨床合理使用抗菌藥物提供參考依據(jù)，以減少耐藥菌的產(chǎn)生。

1 資料與方法

1.1 菌株來源

選取我院微生物室2014年4～6月8148份標(biāo)本培養(yǎng)出的病原菌，采集標(biāo)本包括痰液、血液、尿液、分泌物、腦脊液。

1.2 儀器與試劑

儀器：法國BioMerieux公司的VITEK32全自動分析儀；試劑：Mueller-Hinton瓊脂培養(yǎng)基為英國OXOID有限公司產(chǎn)品；藥敏紙片購自杭州天和微生物試劑有限公司。

1.3 微生物鑒定及藥敏試驗

對所采集的標(biāo)本均按照 《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[1]中細(xì)菌培養(yǎng)有關(guān)操作步驟進(jìn)行，藥敏試驗采用美國臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會 （NCCLS）推薦的K-B法，所有藥敏結(jié)果均按NCCLS制訂的2005年（修訂版）標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判定。采用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥檢測中心推薦的WHONET 5.4軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和分析。

2 結(jié)果

2.1 常見病原菌分布

共收到標(biāo)本8148份，將連續(xù)不重復(fù)檢出的病原體進(jìn)行統(tǒng)計：共檢出1584株病原菌，革蘭陰性桿菌874株，檢出率為55.2%，排名前4位分別為大腸埃希菌、鮑曼不動桿菌、肺炎克雷伯菌和銅綠假單胞菌；革蘭陽性球菌574株，檢出率為36.2%，排名前4位分別為肺炎鏈球菌、金黃色葡萄菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌；真菌136株，檢出率為8.6%，排名前4位分別為白色念珠菌、熱帶念珠菌和光滑念珠菌。見表1。

2.2 主要病原菌對抗菌藥物的敏感率

2.2.1 革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的敏感率 革蘭陰性桿菌中大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在臨床上較為常見，其耐藥率均比較高，尤其是對β-內(nèi)酰胺類及喹諾酮類耐藥情況較普遍，大腸埃希菌對頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星的敏感率僅分別為27.1%、26.4%、26.7%、32.0%、28.9%，而肺炎克雷伯菌對頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星的敏感率也僅分別為50.7%、50.0%、50.7%、68.3%、64.5%，但兩者皆對碳青霉烯類敏感率較高，均＞97%，其次是β酶抑制劑敏感率＞60%，且對哌拉西林/他唑巴坦敏感率高于阿莫西林/克拉維酸。

表1 我院病原菌菌種構(gòu)成情況

非發(fā)酵菌以銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌為主，銅綠假單胞菌對頭孢吡肟、頭孢他啶、氨曲南、左旋氧氟沙星、美羅培南的敏感率分別為55.8%、70.8%、59.3%、67.3%、76.8%，鮑曼不動桿菌對頭孢他啶、氨曲南、美羅培南、阿米卡星的敏感率分別為13.9%、1.8%、20.6%、18.8%。藥敏監(jiān)測顯示：鮑曼不動桿菌對大多測試抗生素的耐藥率高于銅綠假單胞菌。見表2。

2.2.2 革蘭陽性球菌對抗菌藥物的敏感率 革蘭陽性球菌以金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌耐藥比較普遍。金黃色葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧的敏感率分別為94.3%、97.9%和96.4%，表皮葡萄球菌對利奈唑胺、萬古霉素和替考拉寧的敏感率分別為87.3%、100.0%和90.4%。葡萄球菌屬藥敏結(jié)果顯示：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林表皮葡萄球菌 （MRSE）檢出率分別為52.9%、96.4%，MRSE檢出率明顯高于MRSA，且表皮葡萄球菌對抗生素的耐藥性多數(shù)高于金黃色葡萄球菌，均對糖肽類敏感率較高。肺炎鏈球菌對紅霉素、克林霉素及復(fù)方新諾明的敏感率分別為0.0%、0.6%和5.7%，對糖肽類的敏感率幾乎達(dá)100%。見表3。

3 討論

本研究送檢的8148份標(biāo)本以痰、分泌物、血為主，共分離出病原菌1584株，檢出的病原菌以革蘭陰性桿菌為主，占55.2%，最常見的耐藥菌是大腸埃希菌，對頭孢類及氨曲南的耐藥率均超過70%，其次是肺炎克雷伯菌，對頭孢類及氨曲南的耐藥率幾乎達(dá)50%。這兩類細(xì)菌對β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物耐藥的主要原因為產(chǎn)生了ESBLs、AmpC酶和碳青霉烯酶，使β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物水解而使之無效；同時，這兩類細(xì)菌對喹諾酮類的耐藥率也較高，可能與其目前應(yīng)用廣泛有關(guān)[2-4]。NCCLS規(guī)定：產(chǎn)ESBLs菌株對所有青霉素類、頭孢菌素類及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類不管在體內(nèi)外有無活性，體內(nèi)都是無效的，都不能報告這些藥物的敏感性。提醒廣大醫(yī)務(wù)工作者，對于產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌或肺炎克雷伯菌即使藥敏結(jié)果顯示對三代頭孢及氨曲南敏感也不建議選用此類抗菌藥物。而美羅培南等碳青霉烯類抗菌藥物對其有良好的抗菌效果，其次就是含有β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的抗菌藥物，除此之外是頭孢西丁等頭霉素類抗菌藥物耐藥率也較低，提示對于重癥患者，結(jié)合藥敏可以直接選用碳青霉烯類。

表2 常見革蘭陰性桿菌對抗菌藥物的敏感情況[n（%）]

表3 常見革蘭陽性球菌對抗菌藥物的敏感情況[n（%）]

銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌屬于非發(fā)酵菌，這類細(xì)菌感染大多見于長期患病、機(jī)體免疫調(diào)節(jié)機(jī)制較差的患者，對多種抗菌藥物耐藥，也是目前臨床上的常見耐藥菌。耐藥機(jī)制主要為：外膜通透性降低、外膜蛋白D2的丟失、外膜存在獨特的藥物主動泵出機(jī)制、產(chǎn)生超廣譜β-內(nèi)酰胺酶、AmpC酶和氨基糖苷類修飾酶等[5-9]。醫(yī)院藥敏試驗結(jié)果顯示，碳青霉烯類仍是抗銅綠假單胞菌的非常重要和有效的藥物，對美羅培南的敏感率高于亞胺培南，這可能與目前使用亞胺培南抗銅綠假單胞菌較多有關(guān)；頭孢他啶、哌拉西林他唑巴坦對銅綠假單胞菌敏感率也非常高，超過70%；氨基糖苷類及喹諾酮類藥物在抗銅綠假單胞菌也非常有效，對于這兩類藥在抗銅綠假單胞菌過程中不單獨使用，這與其他報道是一致的[10-13]。提醒臨床醫(yī)務(wù)工作者，對于銅綠假單胞菌引起的感染建議聯(lián)合用藥，β-內(nèi)酰胺類抗生素與氨基糖苷類或氟喹諾酮類抗菌藥物體外聯(lián)合后均可提高對銅綠假單胞菌的敏感率，且氨基糖苷類的增效作用略強(qiáng)于氟喹諾酮類，避免抗菌藥物使用過程中產(chǎn)生的誘導(dǎo)性耐藥。鮑曼不動桿菌的耐藥性普遍較高，對各類抗菌藥物的耐藥率均較高，幾乎達(dá)80%，總體上對碳青霉烯類較為敏感，仍為臨床上的首選藥物，對于泛耐藥鮑曼不動桿菌治療上仍建議結(jié)合藥敏及患者基本情況聯(lián)合抗感染治療[14-15]。銅綠假單胞菌和鮑曼不動桿菌在抗生素治療時易產(chǎn)生耐藥性，并出現(xiàn)多重耐藥株，應(yīng)在抗生素治療3～4 d后重新進(jìn)行耐藥性檢測。

革蘭陽性球菌中，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌的耐藥性較為普遍，尤其是MRSA和MRSE，耐藥機(jī)制主要包括：染色體介導(dǎo)的耐藥、通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)移獲得耐藥、主動外排系統(tǒng)、基因表達(dá)調(diào)控耐藥[16-21]。醫(yī)院藥敏結(jié)果表明，MRSA和MRSE對去甲萬古霉素、利奈唑胺、替考拉寧較為敏感，應(yīng)結(jié)合藥敏聯(lián)合應(yīng)用抗菌藥物進(jìn)行治療。肺炎鏈球菌對于紅霉素的耐藥率高達(dá)100%，提示臨床醫(yī)師不建議單用大環(huán)內(nèi)酯類抗感染治療，而糖肽類、喹諾酮類以及頭孢菌素類抗菌藥物的耐藥率較低，對于較輕的感染可以選擇頭孢菌素類以及喹諾酮類抗菌藥物，對于嚴(yán)重的感染，可以考慮選用糖肽類進(jìn)行治療。

近年來，真菌引起的感染逐年上升，應(yīng)引起高度重視。深部真菌感染對危重患者是一個致命的威脅，目前抗真菌的藥品品種比較少（我院目前品種主要有氟康唑、兩性霉素B），療效較差，毒性較大，引起深部真菌感染的因素主要為長期使用廣譜抗生素、反復(fù)感染、侵襲性操作、長期臥床等，因此合理使用抗菌藥物是控制醫(yī)院深部真菌感染的重要途徑。

細(xì)菌培養(yǎng)與藥敏結(jié)果是臨床診斷治療的重要依據(jù)，需重視利用藥敏結(jié)果指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物，建議臨床醫(yī)師在抗感染治療過程中充分了解病原菌的分布特點與抗菌藥物的耐藥情況，根據(jù)藥敏結(jié)果盡量選用耐藥率低的抗菌藥物。

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Distribution and drug susceptibility of common clinical isolated pathogens in our hospital

XI Yuling1HUI Hongyan1WANG Guoqiang2

1.Department of Pharmacy,the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University,He'nan Province,Weihui 453100,China;2.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University, He'nan Province,Weihui 453100,China

Objective To investigate the distribution and drug susceptibility of common clinical isolated pathogens and develop targeted antimicrobial strategies so as to provide clinical reference for rational use of antimicrobial drugs. Methods The 8148 specimens including sputum samples,blood,urine,secretion,cerebrospinal fluid collected from April to June in 2014 in the First Affiliated Hospital of Xinxiang Medical University were analyzed for distribution of pathogens and drug susceptibility.The bacterial culture identification was carried out by referring to the National Clinical Laboratory Procedures,and drug susceptibility testing was performed by K-B method recommended by NCCLS. Results Totally 1584 strains of pathogens were isolated,among which there were 874 (55.2%)strains of gram-negative bacilli,574(36.2%)strains of gram-positive coccus,and 136(8.6%)strains of fungi;the top five species of pathogens isolated were Escherichia coli,Acinetobacter baumannii,Streptococcus pneumoniae,Klebsiella pneumoniae,Staphylococcus aureus,occupied 16.8%,10.4%,10.0%,9.0%and 8.8%,respectively.Among gram-negative bacilli,the resistance rates of Escherichia coli,Klebsiella pneumoniae were common,the drug susceptibility rates to penicillium carbon alkene were more than 97%,the drug susceptibility rates to β-lactamase inhibitor were more than 60%.Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii were the major non-fermentative bacterial,the drug resistance rates of Acinetobacter baumannii were higher than that of Pseudomonas aeruginosa.Among gram-positive coccus,the resistance rates of the Staphylococcus bacteria,Epidermis staphylococcus were common.The drug susceptibility rates of Escherichia coli to Rina Thiazole Amine,Vancomycin and Teicoplanin Lalin were 94.3%,97.9%and 96.4%respectively;and the susceptibility rates of Klebsiella pneumoniae to Rina Thiazole Amine,Vancomycin and Teicoplanin Lalin were 87.3%, 100.0%and 90.4%respectively.Conclusion It is necessary to regularly analyze the distribution and drug susceptibility of pathogenic bacteria,and timely feedback to clinic,so as to improve the reasonable use of antibiliotics,and minimize the bacterial resistance.

Pathogenic bacteria;Distribution;Antibacterial drugs;Drug susceptibility rate

R969.3

A

1673-7210（2015）11（c）-0078-04

2015-08-14本文編輯：程 銘）

河南省科技廳科技攻關(guān)項目（132102310248）。

郗玉玲（1980.2-），女，碩士；研究方向：臨床藥學(xué)。

王國戧（1972.6-），男，碩士，副主任檢驗師；研究方向：微生物。