李 霞，劉麗芳*，于紅霞

（1．長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，長(zhǎng)春130021；2．空軍航空大學(xué)校務(wù)部門(mén)診部，長(zhǎng)春130022）

?臨床研究?

腦卒中陰虛風(fēng)動(dòng)型頸動(dòng)脈硬化與HP CagA-VacA-相關(guān)性研究

李 霞1，劉麗芳1*，于紅霞2

（1．長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，長(zhǎng)春130021；2．空軍航空大學(xué)校務(wù)部門(mén)診部，長(zhǎng)春130022）

目的 研究幽門(mén)螺旋桿菌（HP）CagA-VacA-感染在陰虛風(fēng)動(dòng)型腦卒中頸動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展中的作用。方法 對(duì)108例腦卒中患者運(yùn)用病例對(duì)照的方法，對(duì)腦卒中組和健康組的血清HP不同亞型抗體和相關(guān)基因進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果 陰虛風(fēng)動(dòng)證腦卒中患者頸動(dòng)脈粥樣硬化HP陽(yáng)性率明顯高于健康組（P＜0.05）；HP CagA-VacA-感染率（62.0%）占優(yōu)勢(shì)（P＜0.05），比值比（OR）及95%可信區(qū)間（CI）是2.04（1.10～3.93），經(jīng)調(diào)整各匹配因素后OR及95%CI為3.18（2.40～5.18）。結(jié)論 陰虛風(fēng)動(dòng)型腦卒中頸動(dòng)脈粥樣硬化患者與HP感染相關(guān)，其中CagA-VacA-菌株作用明顯。

陰虛風(fēng)動(dòng)；腦卒中；CagA-VacA-菌株

病原體感染和動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系的研究是個(gè)古老課題，早在一百年前就有人提出感染和動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān)。由于脂質(zhì)浸潤(rùn)學(xué)說(shuō)和損傷反應(yīng)學(xué)說(shuō)逐漸占據(jù)了主導(dǎo)地位，而被人們忽視。但近年來(lái)，隨著對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制的研究不斷的深入，病原體感染與動(dòng)脈粥樣硬化性疾病的關(guān)系再次成為了該研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題。國(guó)內(nèi)外的大量流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，在患動(dòng)脈粥樣硬化性心腦血管病的人群中，病原體抗體的陽(yáng)性率明顯高于健康人群，病原體感染是心腦血管疾病發(fā)病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，并認(rèn)為HP［1］、influenza virus、EBV等與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生密切相關(guān)。筆者在臨床工作期間對(duì)近年來(lái)收治的缺血性中風(fēng)的患者與HP感染的相關(guān)性進(jìn)行了分析。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 腦卒中組為2010年2月—2012年8月長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腦病科住院的52例腦卒中患者。其中男32例，女20例，年齡52～76歲，平均年齡（62.4±9.8）歲，其發(fā)病時(shí)間都在24 h之內(nèi)的急性期，符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)神經(jīng)病學(xué)分會(huì)腦血管病學(xué)組急性缺血性腦卒中診治指南撰寫(xiě)組制定的《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2010》和中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)神經(jīng)科專(zhuān)業(yè)委員會(huì)制定的《腦梗死和腦出血中西醫(yī)結(jié)合診斷標(biāo)準(zhǔn)》［2］。健康組為同時(shí)期性別、發(fā)病年齡、文化程度、收入水平、既往病史相匹配的健康合并頸動(dòng)脈粥樣硬化者56例，其中男30例，女26例，年齡52～78歲，平均年齡（61.9±10.2）歲。2組在性別、發(fā)病年齡、文化程度、收入水平、既往病史等情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 108例腦卒中患者與健康者臨床資料比較分析

2組均予飛利浦IU-22型彩色多普勒對(duì)頸內(nèi)外動(dòng)脈分叉處及直徑1.5 cm的范圍內(nèi)進(jìn)行超聲檢查，頸動(dòng)脈粥樣硬化的判定標(biāo)準(zhǔn)為頸動(dòng)脈內(nèi)膜中層厚度（IMT）的結(jié)果。IMT值在1.0～1.5 mm的為頸動(dòng)脈硬化初期；IMT值超過(guò)1.5 mm，且向血管內(nèi)腔凸出增厚的內(nèi)膜為有頸動(dòng)脈粥樣斑塊形成。參照國(guó)家中醫(yī)藥管理局制定的《腦梗死和腦出血中西醫(yī)結(jié)合診斷標(biāo)準(zhǔn)》、高等醫(yī)藥院校第7版《中醫(yī)診斷學(xué)》和《中醫(yī)臨床診療術(shù)語(yǔ)——證候部分》中的相關(guān)內(nèi)容，將眩暈耳鳴，煩躁不寐，手足心熱，咽干口燥，舌質(zhì)紅或體瘦有裂紋，少苔或無(wú)苔，脈弦細(xì)數(shù)的患者定為陰虛風(fēng)動(dòng)型頸動(dòng)脈粥樣硬化患者。入組的108例在入組前1個(gè)月均無(wú)抗生素的治療史。

1.2 研究方法 2組患者血清均用由鄭州華美生物工程公司提供試劑盒進(jìn)行間接酶聯(lián)免疫法（ELISA）測(cè)定，以幽門(mén)螺旋桿菌特異抗HP-IgG抗體來(lái)判斷是否存在HP感染。由上海元谷科技發(fā)展有限公司提供試劑盒進(jìn)行血清抗HP CagA-IgG抗體及抗-HP VacAIgG抗體檢測(cè)。HP感染呈陽(yáng)性研究對(duì)象中抗HP-IgG血清，均用免疫印記法進(jìn)行抗-HP CagA-IgG抗體和抗HP VacA-IgG抗體的檢測(cè)。判斷HP為何種毒力亞型感染是依據(jù)CagA、VacA抗體的檢測(cè)情況。Ⅰ型為CagA＋VacA＋HP菌株感染，Ⅱ型即中間型為CagA＋／VacA＋HP感染；Ⅱ型即CagA-VacA-HP菌株感染。對(duì)3例感染CagA-VacA-菌株患者，對(duì)動(dòng)脈粥樣斑塊行頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)，進(jìn)行3 S柱提取法，以SS1菌株的HP做陽(yáng)性對(duì)照，陰性對(duì)照是去離子水代替模板，用PCR方法進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳、DNA測(cè)序分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件進(jìn)行處理，定量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，檢驗(yàn)方法采用 t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)取α＝0.05。用χ2檢驗(yàn)和Fisher精確檢驗(yàn)進(jìn)行率的比較；多因素分析用條件logistic回歸法。

2 結(jié)果

2.1 腦卒中患者HP感染狀況比較 見(jiàn)表2。

表2 腦卒中患者HP感染狀況比較 例（%）

2.2 陰虛風(fēng)動(dòng)型頸動(dòng)脈粥樣硬化患者血清抗HPCagA-IgG抗體和抗HPVacA-IgG抗體檢測(cè) 見(jiàn)表3。

表3 陰虛風(fēng)動(dòng)型頸動(dòng)脈粥樣硬化患者不同毒力亞型HP感染狀況 例（%）

2.3 動(dòng)脈粥樣斑塊HP CagA、VacA和glmM基因檢測(cè)

對(duì)3例感染CagA-VacA-菌株患者，對(duì)動(dòng)脈粥樣斑塊行頸動(dòng)脈內(nèi)膜切除術(shù)，進(jìn)行3 S柱提取法，以SS1菌株的HP做陽(yáng)性對(duì)照，陰性對(duì)照是去離子水代替模板，用PCR方法進(jìn)行擴(kuò)增，對(duì)擴(kuò)增的產(chǎn)物進(jìn)行凝膠電泳、DNA測(cè)序分析，結(jié)果為陰性。

3 討論

陰虛風(fēng)動(dòng)型腦卒中是腦卒中最常見(jiàn)的一個(gè)證型，由于肝腎陰虛，風(fēng)陽(yáng)內(nèi)動(dòng)，上擾清竅所致。臨床上以突發(fā)口眼歪斜，言語(yǔ)不利，手足■動(dòng)甚至半身不遂，伴舌質(zhì)紅，苔膩，脈弦細(xì)為主要證候。本研究從中醫(yī)辨證角度出發(fā)，采用病例對(duì)照研究方法，對(duì)本院52例腦卒中患者和56例健康者的幽門(mén)螺旋桿菌感染狀況進(jìn)行調(diào)查分析，其腦卒中患者的HP感染率（61.5%）明顯高于健康組（44.6%），其 OR及95%CI是2.04（1.10～3.93），再次證實(shí)了HP感染不但與消化性潰瘍、活動(dòng)性胃炎、胃癌以及胃黏膜相關(guān)淋巴瘤等疾病關(guān)系密切，也是腦卒中的危險(xiǎn)因素之一［3-8］。Sebastian［9］、Farsak等［10］研究均發(fā)現(xiàn)，在人頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中存在HP，說(shuō)明HP感染和頸動(dòng)脈粥樣硬化斑塊密切相關(guān)［11］。

HP-CagA感染可造成頸部血管炎癥，誘導(dǎo)并參與頸動(dòng)脈斑塊的形成，HP-CagA感染誘導(dǎo)并參與頸動(dòng)脈斑塊形成的機(jī)制可能為HP-CagA可在細(xì)胞內(nèi)特定部位被磷酸化，引發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，快速引發(fā)肌蛋白的聚合及細(xì)胞骨架的重新排列，導(dǎo)致頸動(dòng)脈內(nèi)膜細(xì)胞壞死［12］。在各種HP菌株中，CagA和VacA基因大多同時(shí)存在。感染的HP與HP中CagA和VacA基因的表達(dá)呈正相關(guān)，說(shuō)明HP產(chǎn)生的兩種主要毒力因子正是CagA編碼的CagA蛋白和VacA編碼的VacA蛋白［13］。陰虛風(fēng)動(dòng)腦卒中患者的Ⅱ型（CagA-VacA-）HP菌株感染率比Ⅰ型（CagA＋VacA＋）和中間型（CagA＋／VacA＋）呈明顯增高趨勢(shì)，較健康組也升高。筆者認(rèn)為Ⅱ型（CagA-VacA-）HP菌株可能與陰虛風(fēng)動(dòng)型腦卒中密切相關(guān)。但本研究樣本量小，患者來(lái)源單一，其結(jié)論尚待進(jìn)一步加大樣本量和長(zhǎng)期隨訪(fǎng)、多中心的深入研究。

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Stroke（type of yin deficiency pneumatic）carotid atherosclerosis and HP CagA-VacA-

LI Xia1，LIU Lifang1*，YU Hongxia2
（1．Medical Department of Nerves，The First Affiliated Hospital to Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130021，China；2．Department of Traditional Chinese Medicine，China-Japan Union Hospital of Jilin University，Changchun 130022，China）

Objectives To research the effects of helicobacter pylori（HP）CagA-VacA-in the developing of carotid atherosclerosis（type of stirring wind due to yin deficiency）．Methods According to 108 cases of stroke patients，the experiment stroke uses case control method to detect the serum hp antibody of different subjects of the stroke group and heal group and the related．Results HP positive rate of yin meumatic the stroke patientes with carotid atherosclerosis is signficantly higher than healthy group（P＜0．05）；HP CagA-VacA-an advantage infection rate（50．0%）（P＜0．05），the odds ratio confidence matching factors OR and 95%CI3．18（2．40-5．18）．Conclusion The type of Yin deficiency pneumatic stroke patients with carotid artery atherosclerosis is associated with HP infection，the CagA-VacA-strain effect is obvious．

type of yin deficiency pneumatic；strock；CagA-VacA-；bacterial strain

R255.2

A

2095-6258（2015）05-0970-03

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．05．032

2015-05-06）

吉林省教育廳課題（〔2013〕86號(hào)）。

李 霞（1974-），女，博士，副主任醫(yī)師，主要從事中醫(yī)腦病的研究。

*通信作者：劉麗芳，電話(huà)-13354307879，電子信箱-tigerluck75＠163．com