◆安英 趙麗晶 沈楠 陳雪 徐博

作者：安英、陳雪、徐博，吉林醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院講師；趙麗晶、沈楠，吉林醫(yī)藥學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院副教授，研究方向為醫(yī)學(xué)機(jī)能學(xué)（132013）。

1 前言

鉀離子是參與機(jī)體正常物質(zhì)代謝活動的重要陽離子之一，它可以維持細(xì)胞新陳代謝，保持細(xì)胞靜息膜電位，參與動作電位的形成，調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓和酸堿平衡。高鉀血癥及救治實驗中判定高鉀血癥模型成功的診斷標(biāo)準(zhǔn)是高鉀血癥典型心電圖的變化和血清鉀離子濃度的測定，其中血清鉀離子濃度的測定是直接診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。正常人血清鉀離子濃度正常值為3.5 ～5.5 mmol/L，而家兔血清鉀離子濃度正常值為2.7 ～5.1 mmol/L，當(dāng)血清鉀離子濃度大于5.1 mmol/L 時，說明模型復(fù)制成功。吉林醫(yī)藥學(xué)院從2010年開始使用電解質(zhì)分析儀，使髙鉀實驗由簡單的測定心電圖到結(jié)合血清鉀離子濃度測定，大大提高了實驗教學(xué)的深度與廣度。

2 實驗準(zhǔn)備

家兔稱重后，用20%氨基甲酸乙酯溶液5 ml/kg，耳緣靜脈緩慢注入，麻醉后不撥出頭皮針，直接連接輸液裝置輸入生理鹽水，維持靜脈滴數(shù)，保持靜脈通道通暢，方便繼續(xù)給藥復(fù)制模型。家兔仰臥位固定于兔手術(shù)臺上，分離頸總動脈遠(yuǎn)心端并結(jié)扎，用動脈夾將頸總動脈近心端夾住，在結(jié)扎點處與動脈夾之間穿入備用細(xì)線。在靠近結(jié)扎處的稍下方用眼科剪剪一個與血管呈45°角的向心切口，將動脈插管（管內(nèi)充滿1%肝素生理鹽水）由切口向心臟方向插入動脈內(nèi)，備用細(xì)線結(jié)扎，并將余線固定在動脈插管上，防止動脈插管滑脫。

3 收集血清

取正常血液松開動脈夾，取正常血1.5 ml（用EP 管接血時先放掉管內(nèi)的肝素）。

取高鉀血癥模型制備后血液4%氯化鉀緩慢滴注靜脈，給藥速度確定為15 ～20 滴/min。如果靜滴速度過快，導(dǎo)致短期內(nèi)鉀離子在兔體內(nèi)大量快速蓄積，家兔死亡[2]。實驗過程中觀察心電圖的波形，當(dāng)出現(xiàn)P 波低平增寬，QRS 波群壓低變寬和高尖T 波時，描記心電圖的同時取血1.5 ml，取血時也需要排掉管內(nèi)的殘余血。

取高鉀血癥救治后血液治療高鉀血癥時為降低血鉀濃度，可采用靜推5%碳酸氫鈉，10%～25%葡萄糖胰島素溶液，10%葡萄糖酸鈣或10%氯化鈣靜脈注射，采用利尿藥等排出多余的鉀離子。學(xué)生可任意選擇搶救藥品，經(jīng)搶救心電圖逐漸恢復(fù)正常后，再次取血1.5 ml。

4 離心測定

取3 管血后，用高速離心機(jī)離心10 min。離心后將血清分別轉(zhuǎn)移入新的EP 管中，用電解質(zhì)分析儀測量血清鉀離子濃度。

5 電解質(zhì)分析儀使用

本實驗室使用的是AFT-500AU 型電解質(zhì)分析儀，由深圳梅州康立高科技有限公司生產(chǎn)。利用離子選擇電極技術(shù)檢測電解質(zhì)儀器中的一種，可對血清、血漿、全血、腦脊液、尿液等體液中的鉀離子、鈉離子、氯離子、鈣離子等檢測含量。

電解質(zhì)分析儀操作步驟

1）儀器開機(jī)自檢完后進(jìn)入主菜單，在數(shù)字鍵盤區(qū)中按2 鍵，開始自動定AB 標(biāo)。按1 鍵，定A 標(biāo)。

2）在數(shù)字鍵盤區(qū)中按8鍵（設(shè)置鍵），設(shè)置中選擇7鍵（打印鍵）開啟打印，選擇YES 鍵確認(rèn)。

3）退出設(shè)置后在數(shù)字鍵盤區(qū)中按5 鍵（急診鍵），進(jìn)入手動測樣。按照儀器提示，掀起吸樣針，將裝有血清的EP 管放到吸樣針下方，按YES 鍵吸樣。

4）儀器自動吸樣后，吸樣針頭用木漿紙擦拭干凈，再按儀器提示，壓下吸樣針，開始自動測樣。測樣完成后打印出血清鉀離子檢測結(jié)果單。按NO 鍵退出測試程序。

5）連續(xù)測完樣品后，按3 鍵清洗1 ～2 次。全部測定后對電解質(zhì)分析儀進(jìn)行去蛋白調(diào)理。

電解質(zhì)分析儀使用優(yōu)點自動定標(biāo)，全自動檢測，大大提高了檢測血清鉀離子濃度的效率；采用一次性試劑包，杜絕試劑污染，方便試劑更換；全天24 h 待機(jī)，大大方便檢測實驗期班多、學(xué)時比較多的高鉀血癥及救治實驗。測試速度快，30 s 即可完成一個測試，血清用量最少僅需65 μl，根據(jù)需要靈活選擇鉀離子、鈉離子、氯離子、鈣離子及pH的任一組合。并且具有自動進(jìn)樣盤、有手動進(jìn)樣和自動進(jìn)樣可供選擇?？傮w來說，AFT-500AU 電解質(zhì)分析儀值得在高鉀血癥及救治實驗中推廣應(yīng)用。

電解質(zhì)分析儀使用中的常見問題處理任何一臺儀器要正常使用，與儀器的維護(hù)保養(yǎng)是分不開的，只有認(rèn)真做好保養(yǎng)，才能保證所出結(jié)果能為實驗教學(xué)使用。在開設(shè)高鉀血癥及救治實驗課期間，儀器是每天24 h 開機(jī)，儀器的維護(hù)保養(yǎng)就顯得很重要。

1）堵塞。最常遇到的問題也就是堵塞現(xiàn)象，因為在分離標(biāo)本血清時有些標(biāo)本分離不是很完全，取血清時就會混有少量的纖維蛋白原和紅細(xì)胞，而形成堵塞。清理堵塞時，加樣針可用洗耳球吹或用細(xì)金屬絲慢慢通，再用蒸餾水沖洗進(jìn)樣針或管道[3]。為避免此類故障，每50份標(biāo)本進(jìn)行去蛋白和自動清洗進(jìn)樣針。

2）定標(biāo)故障。儀器定標(biāo)不通過或斜率異常，此時進(jìn)行電極的調(diào)理和去蛋白處理，查看電極和參比電極內(nèi)充液有無減少、變色、渾濁等現(xiàn)象，電極金屬頭有無污染[4]，根據(jù)電極毫伏數(shù)的偏移程度判斷電極性能是否下降或老化，并及時更換。

3）更換打印紙。儀器的打印機(jī)是安裝在頂部的一個小型打印機(jī)，在更換打印紙的過程中，不要用力去抽打印紙，而是把打印紙一端剪成三角形放在進(jìn)紙口處，按一下旁邊的SEL 鍵綠燈熄滅，再按一下LF 鍵，打印機(jī)就會自動走紙。當(dāng)紙走到位后再按一下SEL 鍵就會停止走紙。

6 電解質(zhì)分析儀在實驗過程中的應(yīng)用體會

吉林醫(yī)藥學(xué)院在臨床本科班、檢驗本科班、預(yù)防本科班及影像本科班等本科班中廣泛使用AFT-500AU 電解質(zhì)分析儀，用于高鉀血癥及救治實驗中檢測血清鉀離子濃度。儀器的使用不僅可以提高鉀離子的濃度測定速度，縮短實驗操作時間，而且相比于其他方法，準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性更高。同時，學(xué)生沒有將有限的實驗時間花費在鉀離子的測定方法上，可以將更多的精力放在對實驗結(jié)果的分析和討論中，以及對高鉀狀態(tài)下的動物癥狀觀察和數(shù)據(jù)分析上，使得實驗內(nèi)容的深度和廣度得到提升，課堂效率得到提高。此外，學(xué)生可以切身體會到臨床電解質(zhì)測定的具體方法，有助于臨床診斷和治療思維模式的建立，不僅對臨床專業(yè)的學(xué)生，對其他專業(yè)學(xué)生也具有很好的促進(jìn)理解的作用。

在家兔高鉀血癥及救治實驗過程中不僅提高了學(xué)生對有關(guān)鉀離子的理論知識的掌握[5]，對學(xué)生更深入地理解心肌細(xì)胞電生理特性都有很大的幫助。同時，學(xué)生在實驗過程中很直觀地感受到自己制備的家兔高鉀血癥模型制備及解救成功的喜悅，有助于對學(xué)生人文精神的培養(yǎng)，使教學(xué)得到較好的效果。因此，在高鉀血癥及救治實驗中使用電解質(zhì)分析儀，對實驗本身以及對學(xué)生各方面能力的培養(yǎng)和提高都起到非常積極的作用。

[1]趙麗晶，安英，陳雪，等.機(jī)能實驗中高鉀血癥及搶救實驗的改進(jìn)與完善[J].中國西部科技，2015，14(4):80.

[2]金會艷，朱智勇，呂樂春.家兔高鉀血癥綜合實驗中常見問題分析[J].實驗科學(xué)與技術(shù)，2009，7(1):68-70.

[3]程蓮花.AFT-500 型電解質(zhì)分析儀簡易故障維修[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2012，31(15):88.

[4]陳明，馮雪敏.AFT-500D 型電解質(zhì)分析儀常見故障的分析與排除方法[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2006(3):66.

[5]董曉青，李娜，李金蓮，等.家兔機(jī)能學(xué)心電綜合性實驗教學(xué)初探[J]．南方醫(yī)學(xué)教育，2015(1):47-48.