曹立輝，張洪德，張曉云，段中海，周同茂，馮欣璞

（1.正定縣畜牧獸醫(yī)站，河北石家莊050899；2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，河北保定071000；3.河北征宇制藥有限公司,河北石家莊051431；4.石家莊市動(dòng)物專用免疫增強(qiáng)劑工程技術(shù)研究中心，河北石家莊051431）

免疫調(diào)節(jié)技術(shù)是河北征宇制藥有限公司推廣的針對畜禽免疫的整體調(diào)節(jié)技術(shù)，初步驗(yàn)證具有促進(jìn)免疫器官發(fā)育、提高抗體水平、增強(qiáng)免疫因子產(chǎn)生、提高抗體整齊度的作用。為了驗(yàn)證其對蛋雛雞生產(chǎn)性能、免疫功能和抗體消長規(guī)律的影響，形成應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)后的免疫程序，進(jìn)行了試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

1日齡海蘭蛋雞2 棟，石家莊市某雞場飼養(yǎng)，分為試驗(yàn)組（4070 只/棟）、對照組（4065 只/棟）兩組。

1.2 試驗(yàn)樣品和試劑

試驗(yàn)樣品：安疫肽，河北征宇制藥有限公司提供，100 毫升飲500 千克水；肽好，河北征宇制藥有限公司提供，4000 羽雛禽/瓶，飲水使用；高免多糖，河北征宇制藥有限公司提供，100 克飲500 千克水。

試劑：新支腎三聯(lián)疫苗VH+H120+28/86（VIG221），維奧蘭羽生物科技(北京)有限公司生產(chǎn)；雞傳染性法氏囊病活疫苗（Gt 株），哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司生產(chǎn)；雞新城疫病毒、禽流感病毒二聯(lián)滅活疫苗，雞新城疫病毒（La Sota 株）、傳染性支氣管炎病毒（M41 株）二聯(lián)滅活疫苗，雞新城疫病毒（La Sota 株）、傳染性支氣管炎病毒（M41 株）、減蛋綜合征病毒（AV127 株）三聯(lián)滅活疫苗，普萊柯生物工程股份有限公司生產(chǎn)；雞痘活疫苗，雞傳染性喉氣管炎活疫苗，新城疫中等毒力活疫苗(I系)，廣東永順生物制藥股份有限公司生產(chǎn)；禽流感二價(jià)滅活疫苗（H5N1 Re-6 株+ H9N2 Re-2 株），乾元浩生物股份有限公司鄭州生物藥廠生產(chǎn)。雞白細(xì)胞介素2（IL-2）檢測試劑盒、γ-干擾素（IFN-γ）檢測試劑盒、傳染性法氏囊病抗體檢測試劑盒，均購自泰安聯(lián)星生物技術(shù)有限公司；新城疫、禽流感、傳染性支氣管炎抗原和標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。

1.3 試驗(yàn)方法

表1 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對蛋雛雞死淘率、飼料轉(zhuǎn)化率、體重等的影響

試驗(yàn)組和對照組采用相同的飼養(yǎng)管理：籠養(yǎng)，設(shè)專人飼養(yǎng)管理，自由采食，自由飲水。監(jiān)測母源抗體水平，新城疫疫苗在母源抗體水平抗體滴度接近6 時(shí)首免，首免后繼續(xù)監(jiān)測抗體水平，當(dāng)抗體滴度接近4 時(shí)再次免疫，2 次免疫之間的間隔不低于2 周；傳染性法氏囊病疫苗在母源抗體水平接近800 時(shí)首免，首免后繼續(xù)監(jiān)測抗體水平，當(dāng)抗體滴度接近800 時(shí)再次免疫，2 次免疫之間的間隔不低于2 周；監(jiān)測母源抗體水平，禽流感疫苗在母源抗體水平抗體滴度接近5 時(shí)首免，首免后繼續(xù)監(jiān)測抗體水平，當(dāng)抗體滴度接近5 時(shí)再次免疫，2 次免疫之間的間隔不低于3 周；傳染性支氣管疫苗在母源抗體水平抗體滴度接近4時(shí)首免，首免后繼續(xù)監(jiān)測抗體水平，當(dāng)抗體滴度接近4 時(shí)再次免疫，2 次免疫之間的間隔不低于3 周；試驗(yàn)組6~8日齡按說明使用安疫肽，13~15日齡按說明使用肽好，20~22日齡按說明使用高免多糖；對照組不使用上述樣品。

記錄全部雞的死淘情況，60日齡、120日齡體重，耗料量、發(fā)病情況，計(jì)算死淘率、平均體重、平均耗料量、料肉比。

14日齡、28日齡每組隨機(jī)抽取20 只剖檢，測其免疫器官指數(shù)。免疫器官指數(shù)的檢測方法是將雞稱重后，從心臟采血，然后頸動(dòng)脈放血處死，迅速取脾臟、法氏囊以及胸腺，剔除脂肪后稱鮮重。根據(jù)公式：免疫器官指數(shù)=免疫器官重量/體重，計(jì)算各免疫器官指數(shù)。

表2 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞免疫器官指數(shù)的影響

抗體采樣翅靜脈采血，抽檢率0.1%，采樣時(shí)間分別于1、3、6、13、20、27、34、41日齡、48日齡、55日齡、74日齡、89日齡、104日齡、119日齡；新城疫抗體水平采用血凝實(shí)驗(yàn)和血凝抑制實(shí)驗(yàn)取平均值，應(yīng)用Office-Excel 軟件繪制抗體消長規(guī)律曲線；傳染性法氏囊病血清抗體的檢測采用ELISA方法，嚴(yán)格按傳染性法氏囊病抗體檢測試劑盒提供的方法進(jìn)行，應(yīng)用Office-Excel 軟件繪制抗體消長規(guī)律曲線；傳染性支氣管炎病抗體水平采用血凝實(shí)驗(yàn)和血凝抑制實(shí)驗(yàn)取平均值，應(yīng)用Office-Excel 軟件繪制抗體消長規(guī)律曲線；禽流感抗體水平采用血凝實(shí)驗(yàn)和血凝抑制實(shí)驗(yàn)取平均值，應(yīng)用Office-Excel軟件繪制抗體消長規(guī)律曲線。

10日齡測IL-2 和IFN-γ 水平，使用ELISA 試劑盒進(jìn)行檢測。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 對死淘率、飼料轉(zhuǎn)化率、體重等的影響：（見表1）

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)降低海蘭蛋雛雞育雛期死淘率1.85 個(gè)百分點(diǎn)、育成期死淘率0.48 個(gè)百分點(diǎn)，提高育雛期平均耗料量1.83%、育成期平均耗料量0.45%，60日齡平均體重增加2.92%、120日齡平均體重增加1.28%，降低育雛期料肉比1.50%、育成期料肉比0.26%。

2.2 對免疫器官指數(shù)的影響：（見表2）

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)能提高海蘭蛋雛雞14日齡、28日齡胸腺指數(shù)、法氏囊指數(shù)、脾臟指數(shù)，除28日齡胸腺指數(shù)達(dá)到顯著水平（p＜0.05）外其他日齡免疫器官指數(shù)均未到達(dá)顯著水平（p≥0.05）。

表3 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞新城疫抗體水平的影響（抗體滴度log2）

2.3 對抗體水平的影響

2.3.1 對新城疫抗體水平的影響：（見表3、圖1）

根據(jù)新城疫母源抗體水平監(jiān)測結(jié)果，在7日齡進(jìn)行新城疫首免；根據(jù)新城疫抗體水平監(jiān)測結(jié)果，21日齡進(jìn)行新城疫二免，60日齡、90日齡、120日齡分別加強(qiáng)免疫一次。

圖1 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞新城疫抗體消長規(guī)律曲線

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)極顯著提高20日齡、27日齡、41日齡、55日齡、74日齡、89日齡、104日齡、119日齡海蘭蛋雛雞新城疫抗體水平（p＜0.01）；且從新城疫抗體消長規(guī)律曲線可以看出海蘭蛋雛雞新城疫母源抗體是一個(gè)迅速下降的過程，6日齡即接近6 個(gè)滴度，對照組和試驗(yàn)組母源抗體水平變化規(guī)律基本一致；即使7日齡首免后抗體水平依然下降，直至20日齡下降到最低點(diǎn)（接近臨界保護(hù)值4 個(gè)滴度）后緩慢上升；21日齡二免新城疫苗后即緩慢上升，到二免3 周后達(dá)到最高峰，之后緩慢下降，免疫大約1 個(gè)月后下降到最低點(diǎn)；之后每次免疫都在免疫后2~3 周達(dá)到高峰，之后緩慢下降4 周左右接近臨界值，按照一個(gè)月接種一次，抗體滴度一直保持在4~8 個(gè)，對蛋雛雞有較好的保護(hù)力。

圖2 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞傳染性法氏囊病抗體消長規(guī)律曲線

2.3.2 對傳染性法氏囊病抗體水平的影響：（見表4、圖2）

根據(jù)傳染性法氏囊病母源抗體水平監(jiān)測結(jié)果，在14日齡進(jìn)行傳染性法氏囊病首免；根據(jù)傳染性法氏囊病抗體水平監(jiān)測結(jié)果，28日齡二免之后不再加強(qiáng)免疫。

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)能提高傳染性法氏囊病疫苗免疫水平，其中55日齡、89日齡達(dá)到顯著水平（p＜0.05）；且從傳染性法氏囊病抗體消長規(guī)律曲線可以看出海蘭蛋雛雞傳染性法氏囊病母源抗體是一個(gè)迅速下降的過程，13日齡即接近臨界保護(hù)值800，對照組和試驗(yàn)組母源抗體水平變化規(guī)律基本一致；14日齡首免后于20日齡、27日齡檢測，抗體水平變化不大，所以28日齡加強(qiáng)免疫一次，之后逐步上升并一直保持在800 以上抗體滴度，對蛋雛雞有較好的保護(hù)力。

表4 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞傳染性法氏囊病抗體水平的影響

2.3.3 對禽流感抗體水平的影響（見表5、圖3）

根據(jù)禽流感母源抗體水平監(jiān)測結(jié)果，在21日齡進(jìn)行禽流感首免；根據(jù)禽流感抗體水平監(jiān)測結(jié)果，75日齡、105日齡分別加強(qiáng)免疫一次。

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)顯著提高34日齡、48日齡、55日齡、74日齡、89日齡、104日齡海蘭雞禽流感抗體水平（p＜0.05）；且從禽流感抗體消長規(guī)律曲線可以看出海蘭雞禽流感母源抗體是一個(gè)先緩慢升高再迅速下降的過程，6日齡達(dá)高峰后快速下降，20日齡后即接近5 個(gè)滴度，對照組和試驗(yàn)組母源抗體水平變化規(guī)律基本一致；即使21日齡首免后抗體水平依然下降，直至34日齡下降到最低點(diǎn)后緩慢上升，到74日齡后又接近臨界保護(hù)值需加強(qiáng)免疫一次，此后經(jīng)歷上升和下降的過程，到104日齡接近臨界保護(hù)值，需要再次加強(qiáng)免疫。

2.3.4 對傳染性支氣管炎抗體水平的影響：（見表6、圖4）

根據(jù)傳染性支氣管炎母源抗體水平監(jiān)測結(jié)果，在7日齡進(jìn)行傳染性支氣管炎疫苗首免；根據(jù)傳染性支氣管炎抗體水平監(jiān)測結(jié)果，90日齡、120日齡進(jìn)行傳染性支氣管炎加強(qiáng)免疫。

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)顯著提高34日齡、55日齡、74日齡、104日齡、119日齡海蘭雞傳染性支氣管炎抗體水平（p＜0.05），極顯著提高89日齡海蘭雞傳染性支氣管炎抗體水平（p＜0.01）；且從傳染性支氣管炎抗體消長規(guī)律曲線可以看出海蘭雞傳染性支氣管炎母源抗體是一個(gè)迅速下降的過程，6日齡即接近4 個(gè)滴度，對照組和試驗(yàn)組母源抗體水平變化規(guī)律基本一致；7日齡首免后抗體水平逐步上升，直至34日齡到高峰，到89日齡、119日齡又接近臨界保護(hù)值需加強(qiáng)免疫一次。

表5 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞禽流感抗體水平的影響

圖3 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞禽流感抗體消長規(guī)律曲線

圖4 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞傳染性支氣管炎抗體消長規(guī)律曲線

表6 免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞傳染性支氣管炎抗體水平的影響

2.3.5 蛋雛雞的免疫程序根據(jù)新城疫、傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病、禽流感母源抗體監(jiān)測結(jié)果及免疫后抗體監(jiān)測結(jié)果并結(jié)合臨床經(jīng)驗(yàn)，確定的蛋雛雞、青年雞免疫程序?yàn)椋?/p>

7日齡：新支腎三聯(lián)疫苗，2 羽份，滴鼻、點(diǎn)眼;

14日齡：雞傳染性法氏囊病活疫苗，2羽份，飲水;

21日齡：雞新城疫病毒、禽流感病毒二聯(lián)滅活疫苗，0.3 毫升/只，頸部皮下注射；

28日齡：雞傳染性法氏囊病活疫苗，2 羽份，飲水；

35日齡：雞痘活疫苗，2 羽份，刺種；

45日齡：雞傳染性喉氣管炎活疫苗，1 羽份，點(diǎn)眼；

60日齡：新城疫中等毒力活疫苗(I 系)，1 羽份，肌肉注射；

75日齡：禽流感二價(jià)滅活疫苗，0.5 毫升/只，肌肉注射；

82日齡：雞傳染性喉氣管炎活疫苗，1 羽份，點(diǎn)眼；

90日齡：雞新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒二聯(lián)滅活疫苗，1 羽份，點(diǎn)眼；

105日齡：禽流感二價(jià)滅活疫苗，0.5 毫升/只，肌肉注射；

120日齡：雞新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒、減蛋綜合征病毒三聯(lián)滅活疫苗，0.5 毫升/只，肌肉注射。

2.4 對IL-2 和IFN-γ 產(chǎn)生的影響：（見表7）

表7：免疫調(diào)節(jié)技術(shù)對海蘭蛋雛雞IL-2 和IFN-γ 產(chǎn)生的影響

試驗(yàn)結(jié)果表明，與對照組相比，應(yīng)用免疫調(diào)節(jié)技術(shù)能提高海蘭蛋雛雞IL-2、IFN-γ 水平，促進(jìn)細(xì)胞因子產(chǎn)生，其中到IFN-γ 達(dá)顯著水平（p＜0.05）。

2.5 其他觀察指標(biāo)

對照組和試驗(yàn)組精神良好、采食正常，在整齊度方面試驗(yàn)組優(yōu)于對照組。

2.6 經(jīng)濟(jì)效益分析

2.6.1 粗略分析

經(jīng)濟(jì)效益提高主要來源于：飼料成本節(jié)省、增重、降低死淘率、疾病防控節(jié)省藥費(fèi)、禽產(chǎn)品品質(zhì)優(yōu)化等。

飼料成本節(jié)?。涸囼?yàn)組每生產(chǎn)1 千克肉需消耗3.87 千克飼料，對照組每生產(chǎn)1 千克肉需消耗3.89千克飼料，每生產(chǎn)1 千克肉試驗(yàn)組較對照組節(jié)省飼料0.02 千克，按一只雞育成期末體重1.64~1.66 千克計(jì)算，與對照組比較，平均每只節(jié)省0.033 千克，飼料按每千克2.8 元計(jì)算，約節(jié)省0.09 元。

增重：試驗(yàn)組與對照組相比，每只平均增重多0.021 千克，毛雞價(jià)格10 元/千克，增加經(jīng)濟(jì)效益0.210 元。

降低死淘率：與對照組相比，降低死淘率2.29個(gè)百分點(diǎn)，可增加出欄92 只。育成雞市場價(jià)約16元/只，僅此項(xiàng)增加收入1472 元。

疾病防控節(jié)省藥費(fèi)：應(yīng)用本品能做到不發(fā)病、少發(fā)病、發(fā)病輕；與之相對的常發(fā)病、病情重從而帶來的死亡損失、治療投入及生產(chǎn)性能的損失相當(dāng)巨大，其綜合效益指標(biāo)無法準(zhǔn)確計(jì)算，但僅節(jié)省藥費(fèi)一項(xiàng)，試驗(yàn)組比對照組平均降低約0.3 元。

投入成本：0.06 元/只。

2.6.2 綜合經(jīng)濟(jì)效益分析：

綜合經(jīng)濟(jì)效益=毛雞收入-飼料消耗+藥費(fèi)節(jié)省-方案投入

=[（試驗(yàn)組總轉(zhuǎn)群重-對照組總轉(zhuǎn)群重）×毛雞價(jià)格-（試驗(yàn)組總耗料量-對照組總耗料量）×飼料單價(jià)]/入舍數(shù)+藥費(fèi)節(jié)省-方案投入

=[（6542.06-6298.68）×10-(24252.4-23475.3)×2.8]/4000+0.3-0.06=0.304 元/只

備注：因人工、設(shè)備、場房、雞苗等其他投入等均相同，故不作計(jì)算。