寧慧波， 呂 林，李孝亮，郭 林，田文濤，肖煥星，歐偉業(yè)

（1.上海海利生物技術(shù)股份有限公司，上海 奉賢 201403；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271000）

豬瘟的診治實(shí)例及免疫體會(huì)

寧慧波1， 呂 林2，李孝亮1，郭 林1，田文濤1，肖煥星1，歐偉業(yè)1

（1.上海海利生物技術(shù)股份有限公司，上海 奉賢 201403；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271000）

山東某豬場(chǎng)暴發(fā)了以仔豬及保育豬腹瀉，發(fā)燒、皮膚末梢和耳朵發(fā)紫、全身痙攣，四肢抽搐為特征的急性傳染病，給豬場(chǎng)帶來了極大的經(jīng)濟(jì)損失。通過病理剖檢和實(shí)驗(yàn)室診斷確定此次疫情是由豬瘟病毒感染引起，通過緊急撲殺發(fā)病豬，對(duì)假定健康豬進(jìn)行緊急免疫接種豬瘟高效原代細(xì)胞苗和藥物治療等一系列的綜合防控措施，豬場(chǎng)狀況得到了明顯改善，提高了豬群成活率和經(jīng)濟(jì)效益，目前，該豬場(chǎng)已恢復(fù)正常生產(chǎn)。

豬瘟；PCR；病理切片；ELISA；免疫程序

豬瘟是由豬瘟病毒（CSFV）引起的一種急性、熱性、高度接觸性的烈性傳染病。不同年齡、品種的豬均易感。主要通過消化道、呼吸道、眼結(jié)膜、皮膚創(chuàng)口等途徑感染傳播。該病發(fā)病急，感染率及死亡率高，以全身敗血、內(nèi)臟實(shí)質(zhì)器官出血、壞死和梗死為特征［1］。目前豬瘟依然不容忽視，需采取綜合性的防治措施。

1　豬場(chǎng)發(fā)病情況

2015年1月10日，山東德州某規(guī)?；i場(chǎng)（800頭母豬）的大批仔豬出現(xiàn)腹瀉、發(fā)燒，急性死亡等情況，斷奶時(shí)死亡率高達(dá)40%。保育豬陸續(xù)出現(xiàn)消瘦、腹瀉、毛色雜亂、全身皮膚發(fā)紅等癥狀，轉(zhuǎn)群時(shí)死淘率高達(dá)30%。母豬及肥豬無明顯臨床癥狀。采取多種治療措施，療效不佳。2015年1月15日，筆者應(yīng)邀到現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行診治，了解豬場(chǎng)病情已經(jīng)持續(xù)半個(gè)月，無特效療法，經(jīng)了解豬場(chǎng)免疫程序混亂，并且使用的豬瘟疫苗為低廉豬瘟疫苗。

2　流行病學(xué)

該場(chǎng)為新建豬場(chǎng)，于2014年6月開始陸續(xù)引種，為了降低生產(chǎn)成本，多種重要疫苗未進(jìn)行免疫且豬群使用的豬瘟疫苗為低廉細(xì)胞苗，母豬配種前只免疫一次豬瘟疫苗，仔豬在30 d左右進(jìn)行豬瘟疫苗初免。豬場(chǎng)仔豬在2周開始發(fā)病，很快在整個(gè)豬群蔓延傳播，發(fā)病率高，病程短，仔豬及保育豬死亡率快速升高。

3　臨床癥狀

病豬精神沉郁，食欲減退或廢絕，喜歡喝臟水（圖1）；體溫升高達(dá)41 ℃，且持續(xù)不退；腹瀉（圖2）、消瘦；耳尖呈紫紅色、背部有出血點(diǎn)（圖3）；被毛粗亂（圖4）；斷奶時(shí)死亡率高達(dá)40%，保育豬轉(zhuǎn)群時(shí)死淘率高達(dá)30%，母豬及肥豬無明顯臨床癥狀。

圖1　喜歡喝臟水

圖2　病豬腹瀉

圖3　耳尖呈紫紅色、背部有出血點(diǎn)

圖4　被毛粗亂

4 剖檢變化

喉頭水腫且有出血點(diǎn)（圖5），心肌出血（圖6），肺臟淤血水腫（圖7），脾臟表面及邊緣梗死（圖8），腹股溝淋巴結(jié)出血壞死（圖9），膀胱黏膜點(diǎn)狀出血（圖10），腎臟表面點(diǎn)狀出血（圖11）［2］。

5　實(shí)驗(yàn)室診斷

選取病豬的脾臟、肝臟、淋巴結(jié)以及腦等組織，分別取0.5 g左右加入2mL左右磷酸緩沖液（PBS）混合研磨至勻漿狀態(tài)，反復(fù)凍融3次，進(jìn)行豬瘟病毒、豬藍(lán)耳病病毒、偽狂犬病毒、圓環(huán)病毒及流行性腹瀉病毒的RT-PCR檢測(cè)；采取剖檢豬只的淋巴結(jié)、腎臟及大腦用10%福爾馬林溶液固定，石蠟切片，HE染色，鏡檢；同時(shí)對(duì)發(fā)病仔豬所對(duì)應(yīng)的母豬進(jìn)行血液采集，通過ELISA方法檢測(cè)豬瘟抗體水平，所使用的抗體檢測(cè)試劑盒均為美國(guó)IDEXX公司的相關(guān)產(chǎn)品。

圖5　喉頭水腫且有出血點(diǎn)

圖6　心肌出血

圖7　肺臟淤血水腫

圖8　脾臟表面及邊緣梗死

圖9　腹股溝淋巴結(jié)出血壞死

圖10　膀胱黏膜點(diǎn)狀出血

圖11　腎臟表面點(diǎn)狀出血

5.1PCR檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果

通過對(duì)送檢病料的RT-PCR的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，豬瘟病毒為陽性，擴(kuò)增條帶大小為300 bp左右（圖12）。豬藍(lán)耳病病毒、偽狂犬病毒、圓環(huán)病毒及流行性腹瀉病毒均為陰性（圖13、14、15、16）。

圖12　送檢組織的豬瘟病病原檢測(cè)結(jié)果

圖13　送檢組織的豬藍(lán)耳病病原檢測(cè)結(jié)果

圖14　送檢組織的偽狂犬病病原檢測(cè)結(jié)果

圖15　送檢組織的圓環(huán)病病原檢測(cè)結(jié)果

圖16　送檢組織的流行性腹瀉病病原檢測(cè)結(jié)果

5.2 病理組織學(xué)檢測(cè)結(jié)果

病理組織切片鏡下觀察，腹股溝淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞壞死，胞核濃縮、破碎、崩解、壞死（圖17）；腎小球及腎間質(zhì)出血，腎小管上皮細(xì)胞輕微顆粒變性（圖18）；腦部呈現(xiàn)腦血管袖套現(xiàn)象（圖19）。

圖17　胞核濃縮、破碎、崩解、壞死（HE×400）

圖18　腎小球及腎間質(zhì)出血，腎小管上皮細(xì)胞輕微顆粒變性（HE×200）

圖19　腦部呈現(xiàn)腦血管袖套現(xiàn)象（HE×400）

5.3ELISA檢測(cè)結(jié)果

參照美國(guó)IDEXX相關(guān)試劑盒產(chǎn)品說明書，判定標(biāo)準(zhǔn)為：豬瘟病毒抗體阻斷率≥40%為陽性；阻斷率＜30%為陰性，之間為可疑。檢測(cè)發(fā)現(xiàn)豬瘟抗體平均阻斷率為32.18%，陽性率為44.44%，離散度為87.69%（表1），提示豬瘟保護(hù)率較低。結(jié)合流行情況、臨床癥狀、病理剖檢及實(shí)驗(yàn)室檢查確定為豬瘟病毒感染。

表1　檢測(cè)結(jié)果

6　防治方案

6.1隔離封鎖、嚴(yán)格消毒

對(duì)發(fā)病豬只立即隔離、個(gè)別無治療價(jià)值病豬立即撲殺，并對(duì)尸體進(jìn)行無害化掩埋處理，糞便發(fā)酵處理；對(duì)接觸過病豬的所有人員、用具進(jìn)行徹底消毒，用氯制劑、堿制劑等消毒藥品輪換進(jìn)行圈舍消毒。

6.2加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

做好豬舍內(nèi)糞污清理工作；加強(qiáng)豬舍通風(fēng)換氣、保持豬舍干燥；降低飼養(yǎng)密度，消除各方面的應(yīng)激因素；飼料添加電解多維、葡萄糖等營(yíng)養(yǎng)抗病因子，保證豬群營(yíng)養(yǎng)平衡需求。

6.3緊急接種

對(duì)未發(fā)病豬群進(jìn)行緊急免疫，每頭豬接種豬瘟高效原代細(xì)胞苗2頭份，4周后加強(qiáng)免疫一次。出生仔豬進(jìn)行豬瘟超免［3］，21及50日齡再次免疫，劑量為1頭份。

6.4病豬對(duì)癥治療

主要是控制豬瘟病引起的繼發(fā)感染。對(duì)發(fā)病豬舍豬群飼料添加70%氟苯尼考300 g/t、電解質(zhì)、葡萄糖，連用7 d；個(gè)體治療選用頭孢噻呋鈉配合柴胡肌肉注射，同時(shí)輔助使用黃芪多糖，以增強(qiáng)非特異性免疫機(jī)能。

6.5跟蹤檢查

采取上述綜合措施1個(gè)月后，全場(chǎng)各豬群生長(zhǎng)繁殖性能顯著改善。斷奶仔豬成活率恢復(fù)到85%，保育豬成活率恢復(fù)到90%。抽取不同妊娠階段母豬檢測(cè)豬瘟抗體水平，結(jié)果顯示整齊度良好（表2）。

表2　豬瘟抗體水平檢測(cè)結(jié)果

7　診治體會(huì)

7.1 種豬的引入是豬瘟疫情不穩(wěn)定的重要因素

在自然條件下，豬瘟病毒只要通過直接或間接與感染豬只接觸經(jīng)口鼻傳播［4］。在豬場(chǎng)中，為了保證豬群正常生產(chǎn)，因此要引入后備母豬。持續(xù)不斷的引種增加了豬瘟感染的風(fēng)險(xiǎn)，造成豬瘟的散發(fā)或者流行。該豬場(chǎng)分多次引入后備母豬，當(dāng)?shù)?次引入后備豬混群之后，豬場(chǎng)開始發(fā)病。故引入后備母豬時(shí)應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格充分的隔離，做好病原的檢測(cè)，確保引種后豬群的整體穩(wěn)定性。

7.2疫苗免疫是控制豬瘟的重要手段

豬瘟是一種病毒性疾病，抗生素對(duì)其無效，在目前國(guó)內(nèi)生物安全條件下，特別是一些養(yǎng)殖密集地區(qū)的中等規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)，疫苗仍是防控豬瘟的主要手段［5］。

7.3選擇合適的疫苗是成功控制豬瘟的保障

我國(guó)政府對(duì)豬瘟的防治十分重視，豬瘟疫苗的研制技術(shù)一直處于世界前列，20 世紀(jì)80 年代即已研制出先進(jìn)的第五代豬瘟活疫苗。目前國(guó)內(nèi)豬瘟疫苗生產(chǎn)廠家眾多，但是在豬瘟疫苗生產(chǎn)中容易污染牛腹瀉病毒（BVDV），從而造成免疫效果下降甚至失?。?］。因此選擇高效價(jià)、無污染的豬瘟疫苗對(duì)于提高豬瘟防控效果顯得非常重要。

8　小結(jié)

豬瘟是我國(guó)一類烈性傳染病，自2007年開始對(duì)豬瘟實(shí)行全面強(qiáng)制免疫。近幾年由于豬藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒感染等豬病的流行，使得部分豬場(chǎng)對(duì)豬瘟的防控意識(shí)下降，抱有僥幸心理，認(rèn)為只要免疫豬瘟疫苗就不會(huì)出現(xiàn)問題。該豬場(chǎng)爆發(fā)豬瘟的主要原因是感染后備母豬的引入及低效豬瘟疫苗的使用。通過及時(shí)隔離消毒、緊急免疫、優(yōu)化環(huán)境、提高營(yíng)養(yǎng)等一系列措施后，豬群逐漸恢復(fù)穩(wěn)定。因此做好基礎(chǔ)病原豬瘟的綜合防控對(duì)于豬群的持久穩(wěn)定依然很重要。

［1］ 蔡寶祥. 家畜傳染病學(xué)［M］.第4版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001：201.

［2］ 徐有生.科學(xué)養(yǎng)豬與豬病防治原色圖譜［M］. 第1版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2009：81-83.

［3］ 丘惠探，麥志均，粱健堯，等.豬瘟不同順序零天免疫的免疫效果比較［J］. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2001，23（2）：125-127.

［4］ Barbara E S， Jeffery J Z， Sylvie D Z，et al. Diseases of swine［M］. Oxford：Blackwell Publishing， 2006：326-327.

［5］ 田召芳，李春蕾，張文娟，等.豬瘟疫苗免疫綜述［J］.中國(guó)動(dòng)物檢疫，2011，28（8）：70-73.

［6］ 王琴，寧宜寶.豬瘟免疫失敗主要原因的解析［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2005，41（6）：61-63.

天康天藍(lán)凈 專防藍(lán)耳病

2015-06-16）