喬獻(xiàn)偉

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 南陽 473000）

聯(lián)合檢測GADA、ZnT8A和IA-2A對1型糖尿病的診斷價(jià)值

喬獻(xiàn)偉

（河南省南陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 南陽 473000）

目的 評價(jià)胰島細(xì)胞GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體在1型糖尿病患者中的診斷價(jià)值。方法 1型糖尿病患者78例，其中男性50例，女性28例，發(fā)病年齡20～41歲；2型糖尿病患者80例，其中男性51例，女性29例，平均年齡40～70歲；105例健康者血清，采用免疫印跡法檢測血清GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體。結(jié)果 1型糖尿病患者中，GADA、ZnT8A、IA-2A三種自身抗體陽性率分別為53.1%、24.1%、23.7%。1型糖尿病患者中，三種抗體陽性率均高于2型糖尿病患者和健康對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05）。三種抗體之間在1型糖尿病患者中陽性率有差異，提示1型糖尿病患者不同自身抗體出現(xiàn)在病程的不同階段。結(jié)論 GADA、ZnT8A、IA-2A的檢測對1型糖尿病的診斷具有一定價(jià)值，聯(lián)合檢測三種抗體具有互補(bǔ)性，可提高1型糖尿病診斷的靈敏度。

GADA；ZnT8A；IA-2A；1型糖尿病

近年的流行病學(xué)顯示[1]，我國患糖尿病的人數(shù)約1億，且發(fā)病率不斷上升。目前糖尿病已嚴(yán)重危害人類健康，依其病因?qū)W可分為1型和2型。1型糖尿病發(fā)病原因是由于胰島素的合成和分泌減少；2型糖尿病以胰島素抵抗為主，同時(shí)伴有胰島素分泌不足。明確地分型有利于疾病的治療和預(yù)防。1型糖尿病是由于自身免疫介導(dǎo)的β細(xì)胞破壞，1型糖尿病患者體內(nèi)在出現(xiàn)臨床癥狀前，存在多種自身抗體，如：如谷氨酸脫羧酶自身抗體（GADA）、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8抗體（ZnT8A）、蛋白酪氨酸磷酸酶抗體（IA-2A）等?，F(xiàn)雖有文章報(bào)道胰島相關(guān)抗體檢測的臨床意義，但由于研究樣本含量多少不一，且在不同人群中檢出率有差異。因此，本研究檢測1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的檢出率與正常人群中檢出率之間的差異，同時(shí)，比較1型和2型糖尿病患者血清中GADA、ZnT8A、IA-2A的檢出率的差異，進(jìn)一步揭示與胰島相關(guān)的自身抗體檢測對鑒別診斷1型糖尿病的意義。

1　材料與方法

1.1研究對象：研究對象為我院2011年3月至2013年8月收住我院的78例1型糖尿病。入選病例中，男性50例，女性28例；發(fā)病年齡20～41歲，平均年齡28.4歲，均符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，有酮癥傾向者，并且依賴胰島素治療。2型糖尿病患者為同期我院門診與住院患者80例，該組患者平均年齡51.4歲（40～70歲），其中男性51例，女性29例。入選病例均符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)；初次確診糖尿病距今3年內(nèi)；排除繼發(fā)性糖尿病半年內(nèi)無酮癥或酮癥酸中毒發(fā)生。正常人群即健康組為同期在我院進(jìn)行體檢的健康者105例，男性69例，女性36例；平均年齡37.8歲（20～65歲）。

1.2標(biāo)本留?。嚎崭钩槿§o脈血2 mL，排除樣本中的可能含有溶血和高脂血，最遲2 h血清可分離完畢。

1.3檢測方法：用免疫印跡法檢測。使用免疫印跡試劑盒（深圳伯勞特生物制品有限公司）進(jìn)行檢測，其原理是抗原抗體反應(yīng)，將GADA、ZnT8A、IA-2A特異性抗原包被硝酸纖維膜上，與被檢樣品中特異性的IgG抗體反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物，之后與有抗人IgG的免疫酶試劑反應(yīng)，依據(jù)顯色條帶進(jìn)行判斷結(jié)果。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：使用SPSS15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，組間進(jìn)行t檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)，為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié) 果

1型糖尿病組、2型糖尿病組和健康組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測陽性率比較顯示：1型糖尿病組，三種抗體的陽性率依次為GADA＞ZnT8A＞IA-2A。1型糖尿病組中GADA、ZnT8A、IA-2A抗體檢出率明顯高于2型糖尿病組，P＜0.05。1型糖尿病組、2型糖尿病組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測均顯著高于健康組（P＜0.05），見表1。

表1　1型糖尿病組、2型糖尿病組和健康組GADA、ZnT8A、IA-2A檢測陽性率比較[n（%）]

3　討 論

糖尿病是一種常見的慢性病，研究發(fā)現(xiàn)胰島β細(xì)胞與糖尿病的發(fā)生關(guān)系密切，胰島自身抗體作為胰島β細(xì)胞免疫損傷，能夠區(qū)別1型和2型糖尿病[2]。胰島素自身抗體主要有GAD-Ab、ICA等。GAD65-Ab在糖尿病患者的病程發(fā)展穩(wěn)定性較好，對于糖尿病的免疫治療具有重要意義[3]。

Xiang等[4]研究發(fā)現(xiàn)ZnT8是1型糖尿病的又一主要自身抗原，其抗體在診斷和預(yù)防1型糖尿病方面，具有重要意義。ZnT8含369個(gè)氨基酸，屬于CDF（陽離子擴(kuò)散易化）家族，編碼基因SLC30A8（染色體8q24.11）[5]。ZnT8 mRNA主要表達(dá)在胰島細(xì)胞上，由激光共聚焦顯微分析，提示ZnT8定位于胰島β細(xì)胞分泌囊膜上。當(dāng)前國際研究一致認(rèn)為ZnT8通過影響鋅離子濃度，從而在胰島素合成與分泌中發(fā)揮重要作用[6]。

IA-2是又一個(gè)重要的胰島細(xì)胞自身抗原，它的抗原決定簇局限于胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域中，是以前發(fā)現(xiàn)的胰島細(xì)胞40×103胰蛋白消化片段抗原的前體。IA-2自身抗體（IA-2A）不但是1型糖尿病診斷分型的一個(gè)依據(jù)，還在高危個(gè)體的預(yù)測篩查方面起積極作用[7]。

關(guān)于1型糖尿病GADA、ZnT8A、IA-2A的陽性率文獻(xiàn)報(bào)道不一，本研究結(jié)果顯示GADA、ZnT8A、IA-2A、聯(lián)合檢測的陽性率為分別為52.6%、24.4%、23.1%、65.4%，與國內(nèi)外多數(shù)同類研究基本一致。

胰島細(xì)胞抗體陽性的1型糖尿病患者需要盡早注射胰島素治療。多種抗體陽性的患者則更需要盡早注射胰島素治療。因此，選擇適當(dāng)?shù)囊葝u細(xì)胞自身抗體的聯(lián)合檢測，可以提高1型糖尿病的診斷率。對胰島細(xì)胞抗體陽性的1型糖尿病患者，盡早采用胰島素治療保護(hù)胰島功能，同時(shí)預(yù)防一些并發(fā)癥是非常重要的。

總之，由于研究樣本的不同差異，從而引起抗體陽性率發(fā)生變化，其統(tǒng)計(jì)學(xué)結(jié)果也不同，若要明確各型糖尿病與抗體之間的具體關(guān)系，還需要更大的樣本進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，同時(shí)需要更加深入的基礎(chǔ)研究。

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1671-8194（2015）35-0062-02