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        三種干燥方法對(duì)藍(lán)布正中沒(méi)食子酸含量測(cè)定的影響

        2015-10-28 22:41:42段燦燦裴顯楊曉偉等
        湖北農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年19期
        關(guān)鍵詞:陰干曬干藥典

        段燦燦 裴顯 楊曉偉等

        摘要:為比較藍(lán)布正(Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle)經(jīng)3種不同干燥方法處理對(duì)沒(méi)食子酸含量的影響。采用高效液相色譜法,以Zorbax Extend-C18(4.6×150 mm,5 μm)色譜柱,甲醇-0.1%磷酸溶液(12∶88,V/V)為流動(dòng)相,比較了藍(lán)布正經(jīng)烘干法、自然曬干法及自然陰干法處理后沒(méi)食子酸的含量。結(jié)果表明,該測(cè)定方法重現(xiàn)性好,自然曬干法、自然陰干法及烘干法的平均含量分別為0.75%、0.78%、0.79%,3種方法干燥后含量差異不大。鑒于貴州氣候環(huán)境多雨陰天,提示烘干法可作為自然干燥法的有效補(bǔ)充,為藍(lán)布正的產(chǎn)地干燥提供依據(jù)。

        關(guān)鍵詞:藍(lán)布正(Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle);干燥方法;沒(méi)食子酸;高效液相色譜法

        中圖分類號(hào):O657.7 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):0439-8114(2015)19-4815-03

        DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.19.041

        Abstract: To compare the content of gallic acid of Geum japonicum Thunb. var. chinese F.bolle in Guizhou province by three different drying methods. The samples were separated by Zorbax Extend-C18 (4.6×150 mm,5 μm) column with the mobile phase of methanol-water (containing 0.1% phosphoric acid, 12∶88,V/V) by high-performance liquid chromatography (HPLC). The content of gallic acid in Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle was determined by HPLC after oven drying, drying in the sun and drying in the shade. The results showed that the content of gallic acid in three different methods were 0.75%, 0.78%, 0.79%, respectively. The content method was simple stable and repeatable to determine the content of gallic acid in Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle. In conclusion, in view of the rainy climate in Guizhou,Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle is suitable for oven drying in production place.

        Key words: Geum japonicum Thunb. var. chinese F. bolle; drying method; gallic acid; HPLC

        藍(lán)布正為貴州特色民族藥,為2010版《中國(guó)藥典》收錄品種之一,其為薔薇科植物柔毛路邊青(Geum japonicum Thunb. var. chinense F. Bolle)的干燥全草[1],是日本路邊青(G japonicum Thunb. Fl. Jap.)的一個(gè)變種,具益氣健脾、補(bǔ)血養(yǎng)陰、潤(rùn)肺化痰等功效,民間多用于高血壓等的治療,是苗族、仡佬族、水族、布依族等治療頭暈等的特色用藥,俗稱“眩暈藥”[2]?;A(chǔ)研究表明,藍(lán)布正含有的化學(xué)成分主要為鞣質(zhì)多酚類、黃酮類等[3,4],其中多酚類化合物經(jīng)鹽酸水解后產(chǎn)生的沒(méi)食子酸是2010版《中國(guó)藥典》用于質(zhì)量控制的指標(biāo)成分。藥典規(guī)定,藍(lán)布正的產(chǎn)地加工方法為曬干,是否在各產(chǎn)地均適應(yīng),尤其在氣候多雨少陽(yáng)的貴州地區(qū),這種自然干燥方法是否更有利于藍(lán)布正的貯存,尚缺乏證據(jù),在干燥過(guò)程中可能會(huì)影響藍(lán)布正的質(zhì)量,其他方法干燥是否可行,根據(jù)文獻(xiàn)檢索,尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。因此采用HPLC法分析烘干、自然曬干、自然陰干3種方法對(duì)藍(lán)布正中沒(méi)食子酸含量的影響,以期為貴州藍(lán)布正藥材的優(yōu)質(zhì)高效的產(chǎn)地加工提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 儀器與試劑

        儀器:Agilent 1100HPLC系統(tǒng)(包括脫氣機(jī)、四元泵、VWD檢測(cè)器,軟件為Chem Station,美國(guó)安捷倫公司);101-4型電熱鼓風(fēng)恒溫干燥箱(上海市崇明實(shí)驗(yàn)儀器廠);DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司);FW177型中藥材粉碎機(jī)(天津泰斯特儀器有限公司);FA2004N型電子天平(上海民橋醫(yī)療器械有限公司);CPA224S型萬(wàn)分之一電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)。

        試劑:沒(méi)食子酸(中國(guó)食品藥品檢定研究院,批號(hào)110831-201204);甲醇(分析純,成都市科龍化工試劑廠);甲醇(色譜純,美國(guó)TEDIA公司);磷酸(分析純,重慶川東化工有限公司);鹽酸(分析純,重慶川東化工有限公司)。

        樣品:藍(lán)布正為2013年10-11月份間采自貴州省遵義縣楓香鎮(zhèn),均經(jīng)遵義醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥學(xué)教研室聶緒強(qiáng)博士鑒定為柔毛路邊青(Geum japonicum Thunb.var.chinese F.Bolle)的全草。

        1.2 藍(lán)布正的干燥

        將采收來(lái)的藍(lán)布正用水洗凈泥土,濾干水分,分別采用3種方法干燥。其中自然曬干法將洗凈的藍(lán)布正鋪在干凈的牛皮紙上,置于室外陽(yáng)光充足處進(jìn)行晾曬干燥;自然陰干法將洗凈的藍(lán)布正鋪在干凈的牛皮紙上,放于室內(nèi)陰涼通風(fēng)處進(jìn)行陰干干燥。烘干法將藍(lán)布正鋪在干凈牛皮紙上,放于烘箱內(nèi),為防止溫度過(guò)高影響有效成分分解,控溫40~45 ℃,鼓風(fēng)干燥。干燥終點(diǎn)參照文獻(xiàn)[1]規(guī)定的藍(lán)布正含水量應(yīng)少于11%。

        1.3 色譜條件

        參考文獻(xiàn)[1],采用Agilent Zorbax Extend-C18色譜柱(4.6×150 mm,5 μm),流動(dòng)相A為0.1%磷酸溶液,B為甲醇,等度洗脫:0~30 min(88% A,12%B);檢測(cè)波長(zhǎng)為273 nm;流速為1 mL/min;柱溫為25 ℃;進(jìn)樣量為10 μL。

        1.4 供試品溶液的制備

        精密稱取藍(lán)布正粉末約0.500 0 g(精確至0.000 1),置于具塞錐形瓶中,精密移取4 mol/L鹽酸30 mL,置80 ℃水浴中加熱水解2 h,放冷后再稱定,用4 mol/L鹽酸溶液補(bǔ)足減失的重量,搖勻,用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾,取濾液即得。

        1.5 對(duì)照品溶液的制備

        精密稱定沒(méi)食子酸對(duì)照品5.0 mg,放入25 mL容量瓶中,以50%的甲醇溶液配制成0.200、0.150、0.125、0.100、0.075、0.050、0.025、0.005 mg/mL共8個(gè)濃度,用0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾,取濾液即得。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 干燥時(shí)間

        經(jīng)自然曬干法、自然陰干法及烘干法干燥的藍(lán)布正所需時(shí)間分別為5 d、5 d和19 h。

        2.2 線性關(guān)系考察

        取不同濃度的沒(méi)食子酸對(duì)照品溶液,按“1.3”項(xiàng)下色譜條件,注入色譜儀,記錄色譜圖,以濃度為橫坐標(biāo)(x),峰面積為縱坐標(biāo)(y),得回歸方程y=31 812x-84.429,R2=0.999 8,表明所建方法線性良好,且在0.005~0.200 mg/mL內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,見(jiàn)圖1。

        2.3 重現(xiàn)性試驗(yàn)

        精密稱取藍(lán)布正粉末約0.5 g,共6份,按“1.4”方法制備,取10 μL進(jìn)樣,記錄峰面積,計(jì)算得到?jīng)]食子酸的平均含量為0.88%,RSD為4.39%,表明此方法重現(xiàn)性好。

        2.4 3種干燥方法處理的樣品測(cè)定

        精密稱取不同干燥方法的藍(lán)布正粉末約0.5 g,每種方法取4份,按“1.4”方法制備樣品溶液,以上述色譜條件進(jìn)樣分析,進(jìn)行沒(méi)食子酸的含量測(cè)定,典型的沒(méi)食子酸對(duì)照品和藍(lán)布正樣品的色譜圖見(jiàn)圖2,含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1,自然曬干法、自然陰干法及烘干法的平均含量為0.75%、0.78%、0.79%。3種干燥方法處理的藍(lán)布正中沒(méi)食子酸含量的差異不大,表明烘干法可作為傳統(tǒng)自然干燥的有力補(bǔ)充。

        3 小結(jié)與討論

        藍(lán)布正在貴州分布廣泛,為特色民族藥,民間多用于血虛、頭暈等,療效顯著[5]?,F(xiàn)代藥理研究表明,藍(lán)布正水提物具心腦血管保護(hù)、抗凝血、降糖及抗應(yīng)激等活性[6-9]。有文獻(xiàn)表明藍(lán)布正水溶性成分多為沒(méi)食子酸及其多聚體,具有較好的藥理活性[10],也是藥典品質(zhì)評(píng)價(jià)的指標(biāo)成分,因此在其干燥中應(yīng)注意保護(hù)此類多酚類成分。

        本研究采用HPLC法比較了3種不同干燥方法處理后對(duì)藍(lán)布正品質(zhì)的影響,方法簡(jiǎn)便,重現(xiàn)性好。為了更快的干燥藍(lán)布正,本研究中采取了烘干法,溫度控制在40~45 ℃,在此溫度下對(duì)多酚的影響較小。結(jié)果表明,烘干法處理的樣品的沒(méi)食子酸的含量與常規(guī)自然干燥(曬干法、陰干法)比較,含量差異不明顯,表明烘干法也能更好的保存藍(lán)布正中的沒(méi)食子酸,鑒于貴州天氣多雨多云的特點(diǎn),其可作為目前干燥方法的一種有效替代,節(jié)省了干燥時(shí)間。

        參考文獻(xiàn):

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        [5] 徐樹(shù)蕓. 貴州十種民族藥的應(yīng)用研究[J].世界科學(xué)技術(shù),2006, 8(6):73-78.

        [6] 鄧 煒,李澤春.貴州民族藥藍(lán)布正免疫增強(qiáng)與抗炎藥理研究[J].貴州醫(yī)藥,2006,30(12):1126-1127.

        [7] 賴 泳,李 輝,方春生,等.藍(lán)布正對(duì)小鼠腦缺血的保護(hù)作用[J].大理學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)),2005,4(5):44-45.

        [8] 洪小鳳,萬(wàn)永松,高 揚(yáng),等.藍(lán)布正總提取物對(duì)高血糖動(dòng)物降血糖作用的研究[J].大理學(xué)院學(xué)報(bào),2007,6(10):7-9.

        [9] 劉 安,楊曉虹,董 雷,等.草本水楊梅的研究進(jìn)展[J].特產(chǎn)研究,2012,34(3):67-72.

        [10] XIE Y W,XU H X,DONG H, et al. Role of nitric oxide in the vasorelaxant and hypotensive effects of extracts and purified tannins from Geum japonicum[J]. Journal of Ethnopharmacology,2007,109(1):128-133.

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