微生物學(xué)

封面介紹：Germination of Pst uredionspores under KN-93 treatment and distilled water incubation. A: Germination of Pst uredionspores in distilled water after 10 h incubation at 9°C； B: Germination of Pst uredionspores with 1.4 μmol/L KN-93 after 10 h incubation at 9°C.

小麥條銹菌鈣調(diào)素依賴蛋白激酶基因Pscamk的功能

秦娟，黃傳明，何付新，等

目的：克隆小麥條銹菌鈣調(diào)素依賴蛋白激酶基因Pscamk，并分析其在條銹菌侵染小麥過程中的表達特征及初步功能.方法：基于本實驗室已測序的小麥條銹菌基因組序列，利用RT-PCR方法，從小麥條銹菌生理小種CYR32中克隆Pscamk基因的cDNA序列，并利用網(wǎng)絡(luò)數(shù)據(jù)庫和生物信息學(xué)工具預(yù)測該基因編碼蛋白的基本特征和保守結(jié)構(gòu)；運用qRT-PCR技術(shù)分析Pscamk在不同發(fā)育及侵染階段的表達水平，進一步通過鈣調(diào)素依賴蛋白激酶（CaMK）的免疫抑制劑KN-93處理小麥條銹菌夏孢子，觀察其萌發(fā)狀況.結(jié)果：獲得1個1620 bp的小麥條銹菌CaMK基因Pscamk；序列分析發(fā)現(xiàn)，Pscamk編碼蛋白包含CaMK 蛋白的保守結(jié)構(gòu)域，并與小麥桿銹菌該類蛋白序列相似性最高.qRT-PCR分析表明，Pscamk在條銹菌侵染初期過程中的芽管發(fā)育、初生菌絲侵染及吸器形成時期呈顯著上調(diào)表達，且在條銹菌接種6 h時表達量最高，為對照夏孢子的20.74倍.在專一性免疫抑制劑KN-93處理后，隨著KN-93施加濃度的增加，條銹菌夏孢子萌發(fā)率逐漸降低，當(dāng)濃度為1.4 μmol/L時夏孢子萌發(fā)率為8.02%，僅為對照的12%.討論：推測Pscamk基因參與了小麥條銹菌夏孢子萌發(fā)、芽管發(fā)育以及初期侵染結(jié)構(gòu)的形成.本研究為進一步探索條銹菌細胞鈣信號傳導(dǎo)機理和致病機制奠定了基礎(chǔ).

小麥條銹菌；鈣調(diào)素依賴蛋白激酶；免疫抑制劑KN-93；熒光定量RT-PCR

來源出版物：微生物學(xué)報，2014，54（11）: 1296-1303聯(lián)系郵箱：郭軍，guojunwgq@nwsuaf.edu.cn