覃維鵬

摘 要 目的 自2006年“東桑西移”政策提出以來(lái)，種桑養(yǎng)蠶成為廣西農(nóng)民增收致富的朝陽(yáng)產(chǎn)業(yè)，為提高廣西的桑蠶養(yǎng)殖水平提供科學(xué)依據(jù)。方法 在蠶齡達(dá)三齡和四齡時(shí)，兩次使用濃度為4 ?g/mL ZR515制劑8 mL對(duì)100頭蠶體均勻噴涂;以100 g桑葉浸泡在300 mL胰島素溶液中30 min后投喂家蠶。同時(shí)，噴涂ZR515和投喂胰島素浸泡桑葉，探討保幼激素類似物（ZR515）和胰島素的應(yīng)用對(duì)家蠶（菁松×皓月）生長(zhǎng)發(fā)育的影響，特別是蠶體質(zhì)量、蠶絲腺及蠶繭的重要經(jīng)濟(jì)參數(shù)全繭量、繭層量和繭層率指標(biāo)，通過(guò)單因素水平分析，找出顯著影響因素。結(jié)果使用保幼激素類似物（ZR515）和胰島素對(duì)蠶體質(zhì)量、蠶絲腺質(zhì)量有明顯增長(zhǎng)作用，對(duì)全繭量、層繭量和層繭率亦有顯著提高。結(jié)論保幼激素類似物（ZR515和胰島素配合應(yīng)用在家蠶飼養(yǎng)過(guò)程，可顯著增加全繭量和繭層量，增加養(yǎng)蠶的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

關(guān)鍵詞 ZR515;胰島素;絲腺體;家蠶;全繭量;繭層量

中圖分類號(hào)：S482.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B 文章編號(hào)：1673-890X（2015）27--02

自1965年Akai H和 Kobayashi M.[1]發(fā)現(xiàn)保幼激素類似物（JHA）有延長(zhǎng)蠶齡、提高蠶個(gè)體質(zhì)量和產(chǎn)繭量以來(lái)，應(yīng)用保幼激素增加繭絲的研究成為蠶學(xué)業(yè)界的熱點(diǎn)。合理使用保幼激素處理家蠶五齡幼蟲(chóng)，能使蠶體質(zhì)量、蠶繭質(zhì)量和絲蛋白質(zhì)合成量的增加。家蠶在5齡中期以前，身體增長(zhǎng)較快，其中包括絹絲腺的生長(zhǎng)。5齡中期以后，家蠶從桑葉中吸取的營(yíng)養(yǎng)，主要用于絹絲腺內(nèi)絲蛋白的合成，這時(shí)期內(nèi)所合成的絲蛋白，約占全部絹絲物質(zhì)總量的80%左右，如果這時(shí)外源增加保幼激素含量，就能適當(dāng)延長(zhǎng)迅速合成絲蛋白的短暫時(shí)間，當(dāng)然也就達(dá)到提高蠶絲產(chǎn)量的目的。

國(guó)內(nèi)學(xué)者莊大桓、項(xiàng)美華[2]等應(yīng)保幼激素噴灑5齡蠶中期可提高蠶層量達(dá)30%以上，崔為正、牟志美、張友英[3]等在5齡家蠶中后期保使用保幼激素和蛻皮激素明顯的增加全繭量、繭層量和繭率指標(biāo)。

然而，國(guó)內(nèi)研究人員對(duì)胰島素在家蠶上的應(yīng)用報(bào)道并不多見(jiàn)，國(guó)外學(xué)者M(jìn)agdum SB、Hooli MA深入研究胰島素對(duì)多化性蠶的影響機(jī)理。胰島素作為一種具有多種生物學(xué)效應(yīng)的激素，除了在人們所熟知的蛋白質(zhì)、脂肪、糖原的代謝中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用外，在調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，保證正常的生長(zhǎng)發(fā)育、代謝、生殖以及衰老等過(guò)程中起到非常重要的作用。

本文探討保幼激素（ZR515）和胰島素對(duì)家蠶養(yǎng)殖過(guò)程影響的主要經(jīng)濟(jì)參數(shù)：蠶齡、蠶體質(zhì)量、絲腺質(zhì)量、組織體指數(shù)、全蠶質(zhì)量、繭層量、繭層率。

1 材料與方法

1.1 供試材料

家蠶為廣西師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院鄧業(yè)成教授提供，整個(gè)實(shí)驗(yàn)在廣西昊旺生物科技有限公司生化實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行。飼養(yǎng)的家蠶品種為菁松×皓月，小蠶飼養(yǎng)按桑葉育標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，在自然溫度濕度條件下飼養(yǎng)小蠶成長(zhǎng)。在第小蠶2次蛻皮進(jìn)入3齡蠶時(shí)，按每個(gè)區(qū)100頭數(shù)目，分成5個(gè)區(qū)并編號(hào)1、2、3、4、5區(qū)，按區(qū)分別進(jìn)行施藥實(shí)驗(yàn)。

胰島素從印度Himalaya藥業(yè)公司購(gòu)進(jìn)，ZR515為廣西昊旺生物科技有限公司研制配方制劑。使用丙酮將ZR515制劑稀釋配制成4 ?g/mL每支8 mL分裝，標(biāo)記備用;等量丙酮不加入ZR515制劑去離子水稀釋配制成參比液，同樣按8 mL每支分裝、標(biāo)記備用;胰島素配制成4 IU/mL水溶液，放入4～8 ℃冰箱內(nèi)低溫保存，胰島素使用時(shí)提前2～4 h置于常溫下，備用。

1.2 處理方法

1區(qū)：在小蠶第二次蛻皮進(jìn)入三齡蠶后36 h和小蠶第3次蛻皮進(jìn)入四齡后36 h，分別取1支8 mL的ZR515制劑均勻體噴涂于100頭家蠶體上，然后正常添桑。

2區(qū)：將100 g新鮮桑葉浸泡于300 g胰島素水溶液內(nèi)30 min，放置于通風(fēng)處陰干燥后，投喂100頭小蠶，與第一組添桑時(shí)間相同。

3區(qū)：按1區(qū)方法施藥，按2區(qū)方法添桑。

4區(qū)：取丙酮參比液1支8mL按1區(qū)施藥方法對(duì)小蠶進(jìn)行處理。

5區(qū)：不投加制劑藥物，正常添桑。

1.3 數(shù)據(jù)記錄和分析

從3齡開(kāi)始，每天使用1‰天平（精確至0.001 g）稱量并且精確記錄小蠶質(zhì)量和對(duì)應(yīng)蠶齡（精確到小時(shí)）。

當(dāng)蠶進(jìn)入5齡后第5天（通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察，家蠶上簇前開(kāi)始取蠶進(jìn)行剖解實(shí)驗(yàn)），從各區(qū)隨機(jī)取10頭蠶做絲腺體分離：將蠶置于三氯甲烷中1 min后用去離子水清洗，洗凈后解剖后取出蠶體內(nèi)絲腺放入去離子水中浸泡，除前部絲腺由于過(guò)細(xì)無(wú)法去表皮外，包裹在中部及后部絲腺的表皮均仔細(xì)剝除，再將絲腺用去離子水浸洗5 min去除黏附于絲腺表面的液體、雜物，放置清潔干凈的絲網(wǎng)上20 min，再精確稱量絲腺質(zhì)量（0.001 g）。

其余未做絲腺體分離實(shí)驗(yàn)的小蠶仍按實(shí)驗(yàn)設(shè)定的分區(qū)正常飼喂桑葉，直至蠶成熟上簇結(jié)繭。

為了考察按1.2處理后雌性和雄性的家蠶在全繭量、層繭量和層繭率的變化關(guān)系，此3個(gè)參數(shù)作為家蠶養(yǎng)殖中最為重要的經(jīng)濟(jì)指標(biāo)，有必要進(jìn)行研究比較。

蠶絲腺質(zhì)量、全繭量、層繭量的數(shù)據(jù)，按10頭蠶的數(shù)量每頭稱量?jī)纱危Q量后取平均值，蠶齡（3齡5齡，以小時(shí)計(jì)）和蠶體質(zhì)量數(shù)據(jù)取五齡蠶上簇前的數(shù)據(jù)（稱量后隨機(jī)選10頭做絲腺體分離，取均值）。

將各實(shí)驗(yàn)區(qū)（1～5區(qū)）記錄獲得的數(shù)據(jù)按文獻(xiàn)的方法進(jìn)行單因素方差分析，分別對(duì)蠶齡、蠶質(zhì)量、絲腺質(zhì)量、體組織率數(shù)據(jù)分析，嘗試找出不同處理措施對(duì)育蠶的經(jīng)濟(jì)參數(shù)的顯著差異，結(jié)果如表1所示。

為對(duì)比雌性和雄性家蠶在不同處理措施后影響因素，水平因子取全繭量、層繭量和層繭率三者分別進(jìn)行單因素方差分析，方法同上。數(shù)據(jù)結(jié)果見(jiàn)表2。

2 結(jié)果與分析

對(duì)于蠶處理區(qū)（1～4區(qū)）與參比區(qū)（5區(qū)）的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，如蠶齡、蠶體質(zhì)量、絲腺質(zhì)量、體組織率以及蠶繭特性參數(shù)列于表1和表2。從表1數(shù)據(jù)分析，對(duì)家蠶噴涂ZR515后，無(wú)論1區(qū)或3區(qū)的蠶齡和蠶體質(zhì)量均出現(xiàn)明顯增長(zhǎng)，但單獨(dú)使用胰島素（2區(qū)）僅對(duì)蠶體質(zhì)量有增長(zhǎng)而無(wú)延長(zhǎng)蠶齡的表現(xiàn)。蠶絲腺體數(shù)據(jù)在3個(gè)區(qū)1、2、3區(qū)均出現(xiàn)不同程度的增重，即單獨(dú)使用ZR515或胰島素或兩者同時(shí)使用，并且有3>1>2趨勢(shì)，體組織率數(shù)據(jù)也表現(xiàn)出同絲腺體有一致的增長(zhǎng)趨勢(shì)。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，在使用ZR515和胰島素后，對(duì)1、2、3區(qū)內(nèi)的全繭量和繭層量數(shù)據(jù)均出現(xiàn)不同程度的增加。特別是雌性全繭量和繭層量數(shù)據(jù)，無(wú)論是3區(qū)還是2區(qū)的數(shù)據(jù)均出現(xiàn)顯著增加，但雄性全繭量和繭層量?jī)H在3區(qū)特別明顯，2區(qū)則沒(méi)有與雌性蠶相同的結(jié)果。而以丙酮溶劑處理的家蠶（4區(qū)），對(duì)比參照區(qū)（5區(qū)）沒(méi)有明顯變化。

3 結(jié)論與討論

1981年Kobari和Akai[4]等報(bào)道以ZR515處理家蠶使蠶體質(zhì)量增加是因?yàn)楸Ｓ准に匮娱L(zhǎng)了蠶的蠶齡，飼養(yǎng)蠶的時(shí)間延長(zhǎng)導(dǎo)致蠶體質(zhì)量增加;2011年Kramer[5]認(rèn)為胰島素處理家蠶能激活蠶體絲腺內(nèi)胰島素合成水平，從而增加絲腺的質(zhì)量。

從3區(qū)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析，以保幼激素（ZR515）和胰島素處理后蠶的層繭量平均增加30.54%（雌性和雄性），增絲效果非常顯著。因此，建議將增絲產(chǎn)品保幼激素（ZR515）應(yīng)用到蠶養(yǎng)殖時(shí)，配合適量的胰島素補(bǔ)給，將達(dá)到相當(dāng)滿意的增產(chǎn)增收的效果。

參考文獻(xiàn)

[1]Akai H，Kobayashi M. Sites of Fibroin Formation in the Silk Gland in Bombyx Mori[J].Nature，1965，206（529）.

[2]莊大桓，項(xiàng)美華.保幼激素在養(yǎng)蠶業(yè)應(yīng)用新途徑的探討[J].江蘇蠶業(yè)，1992（1）：55-61.

[3]崔為正，牟志美，張友英.幼激素和蛻皮激素配合使用提高蠶絲量的研究[J].蠶業(yè)科學(xué)，1995，3（21）：178：183.

[4]Akai， H.， K. Kiguchi， Y. Kobari， et al. Practical Utilization of Juvenoids for Increasing Silk Production[J]. Scientific Papers of the Inst. Org. Phys. Chem，1981（22）.

[5]Kramer.Surface Immobilization of Antibody on Silk Fibroin Through Conformational Transition[J].Acta Biomaterialia，2011（2）.

（責(zé)任編輯：劉昀）