余 洋 李克軍

三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院, 宜昌市中心人民醫(yī)院泌尿外科（宜昌 443003）

E-cadherin和Vimentin在前列腺癌中的表達(dá)及其臨床意義

余 洋 李克軍*

三峽大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院, 宜昌市中心人民醫(yī)院泌尿外科（宜昌 443003）

目的 探討E-cadherin和Vimentin在前列腺癌中的表達(dá)及其臨床意義；方法 回顧性分析50例前列腺癌臨床資料，通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)E-cadherin和Vimentin的表達(dá)，分析前列腺癌上皮細(xì)胞E-cadherin和Vimentin的表達(dá)水平與臨床分期、Gleason評(píng)分及患者術(shù)后生存率的關(guān)系；結(jié)果 E-cadherin在正常組織前列腺組織和前列腺癌上皮組織中表達(dá)陽(yáng)性率分別為90%和54%（P＜0.05）；Vimentin在正常前列腺上皮組織和癌性上皮組織中陽(yáng)性率分別為20%和60%（P＜0.05），E-cadherin和Vimentin在正常前列腺組織及前列腺癌組織中表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），而且E-cadherin和Vimentin在前列腺癌上皮細(xì)胞中表達(dá)水平與前列腺癌臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率密切相關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論 前列腺癌上皮細(xì)胞E-cadherin和Vimentin表達(dá)水平與前列腺癌臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率密切相關(guān)，檢測(cè)E-cadherin和Vimentin的表達(dá)有可能成為判斷前列腺癌惡性程度及預(yù)后指標(biāo)。

鈣黏著糖蛋白類(lèi); 波形蛋白; 前列腺腫瘤

前列腺癌是泌尿外科常見(jiàn)的惡性腫瘤，據(jù)最新報(bào)道稱(chēng)在美國(guó)其發(fā)病率在男性中居首位，死亡率位于第二位[1]。主要由于早期前列腺癌診斷率低，且前列腺相關(guān)疾病易混淆，往往患者就診時(shí)出現(xiàn)遠(yuǎn)處及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。上皮細(xì)胞鈣黏蛋白（E-cadherin），是一種重要的細(xì)胞-細(xì)胞間粘附分子。而波形蛋白（Vimentin）是存在于間充質(zhì)細(xì)胞中的一種中間絲蛋白。筆者通過(guò)免疫組化方法來(lái)分析E-cadherin和Vimentin在前列腺癌上皮細(xì)胞中表達(dá)水平，研究前列腺癌上皮細(xì)胞E-cadherin和Vimentin表達(dá)水平與其與前列腺癌臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率的關(guān)系。

材料與方法

一、一般材料

收集我院2010年1月至2014年1月前列腺癌標(biāo)本50例，所有組織均經(jīng)過(guò)病理確診為前列腺癌，全部為男性患者，年齡在54～83歲，平均年齡68.5歲，患者術(shù)前未接受內(nèi)分泌治療、化療放療等。手術(shù)方式包括開(kāi)放性前列腺癌根治術(shù)、腹腔鏡下前列腺癌根治術(shù)及前列腺穿刺活檢術(shù)。病理按Gleason評(píng)分分為2～6分和7～10分兩組。前列腺TNM分期T1～T4期四組。另外選擇10組前列腺組織作為對(duì)照組，所有標(biāo)本經(jīng)中性福爾馬林固定，石蠟包埋切片。同時(shí)對(duì)患者進(jìn)行術(shù)后定期電話隨訪，查看患者現(xiàn)在生存狀況，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。

二、免疫組化

收集前列腺癌和正常組織標(biāo)本，標(biāo)本經(jīng)10%甲醛固定，石蠟包埋，進(jìn)行4μm厚度連續(xù)切片，用前列腺癌標(biāo)本切片作為陽(yáng)性組，陰性對(duì)照一抗用磷酸鹽緩沖液代替，實(shí)驗(yàn)所用E-cadherin和Vimentin抗體購(gòu)自中杉金橋生物公司，具體操作步驟見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

三、結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)

E-cadherin在細(xì)胞膜出現(xiàn)棕黃色顆粒，而且陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞25%以上為陽(yáng)性，＜25%為陰性[2]。Vimentin 陽(yáng)性結(jié)果為比較鮮明的棕黃色軟色，靠近胞膜或者胞漿，以細(xì)胞胞質(zhì)中明顯著色或者強(qiáng)著色為陽(yáng)性細(xì)胞，陽(yáng)性細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞＞5%為陽(yáng)性結(jié)果，＜5%為陰性結(jié)果[3]，結(jié)果的判定主要由病理科醫(yī)生負(fù)責(zé)。

四、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用t檢驗(yàn)或卡方檢驗(yàn)，并通過(guò)SPSS生存函數(shù)來(lái)繪制生存曲線圖；P＜0.05為有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

結(jié) 果

一、E-cadherin表達(dá)與前列腺癌臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率的關(guān)系

免疫組化發(fā)現(xiàn)E-cadherin在正常前列腺組織和癌組織中表達(dá)率分別為90%（9/10）、54%（27/50），兩組之間差異顯著（P＜0.05），見(jiàn)圖1。在50例前列腺癌患者中進(jìn)行臨床分期，T1～T2和T3～T4分別為31例和19例，E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)為22例和5例。Gleason評(píng)分2～6、7～10分別為27例和23例，E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)分別有17例和10例，研究發(fā)現(xiàn)前列腺癌上皮細(xì)胞E-cadherin表達(dá)水平與前列腺癌的臨床分期及Gleason分關(guān)系密切（P＜0.05），E-cadherin表達(dá)與前列腺癌臨床分期及Gleason評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，見(jiàn)表1，表2。本研究術(shù)后前列腺癌患者進(jìn)行定期隨訪發(fā)現(xiàn)，其中生存率＜2年E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)率（9/21），明顯低于生存率＞2年（18/29）（P＜0.05），通過(guò)繪制生存曲線發(fā)現(xiàn)前列腺癌上皮細(xì)胞E-cadherin表達(dá)陽(yáng)性患者，其生存率明顯高于陰性患者，呈正相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)圖2。

圖1 E-cadherin在前列腺和前列腺癌的表達(dá)

表1 E-cadherin在正常前列腺組織和前列腺癌組織中表達(dá)情況

表2 E-cadherin表達(dá)與前列腺癌的臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率的關(guān)系

圖2 前列腺癌患者E-cadherin表達(dá)與生存率關(guān)系

二、Vimentin表達(dá)與前列腺癌的臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率的關(guān)系

免疫組化發(fā)現(xiàn)Vimentin在正常前列腺上皮組織和癌組織中表達(dá)率分別為20%（2/10）、60%（30/50），兩組之間差異顯著（P＜0.05），見(jiàn)圖3。在50例前列腺癌患者中進(jìn)行臨床分期，31例T1～T2和19例T3～T4 中Vimentin陽(yáng)性表達(dá)為16例和14例。27例Gleason評(píng)分2～6和23例Gleason評(píng)分7～10分中E-cadherin陽(yáng)性表達(dá)分別為15例和15例，研究發(fā)現(xiàn)前列腺癌上皮細(xì)胞Vimentin表達(dá)水平與前列腺癌的臨床分期及Gleason評(píng)分相關(guān)（P＜0.05），呈正相關(guān)，見(jiàn)表3，表4。同時(shí)對(duì)前列腺癌患者進(jìn)行定期隨訪發(fā)現(xiàn)，其中生存率＜2年者Vimentin陽(yáng)性表達(dá)率（15/21）明顯高于生存率＞2年患者（14/29）（P＜0.05），通過(guò)繪制生存曲線發(fā)現(xiàn)前列腺癌上皮細(xì)胞Vimentin表達(dá)陽(yáng)性患者，其生存率明顯低于陰性患者，呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），見(jiàn)圖4。

圖3 Vimentin在前列腺和前列腺癌的表達(dá)

討 論

流行病學(xué)研究表明，前列腺癌的發(fā)病率居歐美國(guó)家男性首位，我國(guó)前列腺癌發(fā)病率較歐美國(guó)家低，但也呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，而且死亡率也在增高[4]。但由于前列腺癌早期缺乏特異性表現(xiàn)，容易與其他前列腺疾病相混淆，如果不能及時(shí)診斷和治療，會(huì)出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況[5]，死亡率極高。所以對(duì)前列腺癌患者，侵襲轉(zhuǎn)移性的識(shí)別對(duì)預(yù)后判斷有重要意義。鈣粘蛋白是一類(lèi)主要介導(dǎo)細(xì)胞間同質(zhì)黏附的鈣依賴性跨膜糖蛋白，參與形成和保護(hù)細(xì)胞間正常的聯(lián)系，介導(dǎo)細(xì)胞間連接的重要分子。其中E-cadherin是對(duì)維持上皮細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)完整性發(fā)揮重要作用的一類(lèi)鈣黏蛋白。目前很多研究發(fā)現(xiàn)E-cadherin是腫瘤惡性轉(zhuǎn)化、侵襲轉(zhuǎn)移的抑制因素，其表達(dá)水平和腫瘤的惡性程度、分期及轉(zhuǎn)移性呈負(fù)相關(guān)，與生存率呈正相關(guān)[6]，E-cadherin的不表達(dá)或者低表達(dá)可以促進(jìn)腫瘤的轉(zhuǎn)移。 Rothberg等[7]研究發(fā)現(xiàn)在胃癌、腸癌和乳腺小葉癌組織中，E-cadherin低表達(dá)甚至可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移的一個(gè)標(biāo)志物，指導(dǎo)臨床治療。Yang等[8]最新進(jìn)行一項(xiàng)回顧性研究了2395例非小細(xì)胞肺癌的患者，發(fā)現(xiàn)小細(xì)胞肺癌患者中有51.2%低表達(dá)E-cadherin，通過(guò)進(jìn)行Meta分析發(fā)現(xiàn)E-cadherin的表達(dá)與肺癌患者生存率相關(guān)，表明E-cadherin表達(dá)是決定非小細(xì)胞肺癌預(yù)后的一個(gè)重要因素。同時(shí)Salon等[9]對(duì)肺小細(xì)胞癌患者伴淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者進(jìn)行E-cadherin單克隆抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)E-cadherin表達(dá)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤分化呈負(fù)性相關(guān)。Lien等[10]通過(guò)體外培養(yǎng)將E-cadherin cDNA導(dǎo)入高轉(zhuǎn)移低表達(dá)E-cadherin的腫瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)腫瘤轉(zhuǎn)移性均受抑制，實(shí)驗(yàn)反映E-cadherin擁有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移功能。進(jìn)而證實(shí)E-cadherin的不表達(dá)或者低表達(dá)可能是上皮細(xì)胞獲得高分化和侵襲能力的關(guān)鍵蛋白。

表3 Vimentin在正常前列腺組織和前列腺癌組織中表達(dá)情況

表4 Vimentin表達(dá)與前列腺癌的臨床分期、Gleason評(píng)分及生存率的關(guān)系

圖4 前列腺癌患者Vimentin表達(dá)與生存率關(guān)系

本研究通過(guò)對(duì)臨床前列腺癌標(biāo)本收集進(jìn)行免疫組化分析，發(fā)現(xiàn)E-cadherin的表達(dá)水平在前列腺癌標(biāo)本中明顯低于正常對(duì)照組，而且其表達(dá)水平與前列腺癌臨床分期，Gleason評(píng)分呈負(fù)相關(guān)，和生存率呈正相關(guān)。這提示E-cadherin表達(dá)水平可能與前列腺癌發(fā)生、轉(zhuǎn)移有關(guān)。

Vimentin調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架蛋白、細(xì)胞粘附分子等蛋白間作用，在維持和調(diào)節(jié)細(xì)胞功能中發(fā)揮作用。同時(shí)對(duì)中間絲蛋白Vimentin在人類(lèi)惡性腫瘤中的研究也發(fā)現(xiàn)Vimentin 參與腫瘤轉(zhuǎn)移，在腫瘤細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞遷移、黏附以及上皮間質(zhì)化、腫瘤細(xì)胞凋亡中發(fā)揮作用。Sousa等[11]研究指出Vimentin表達(dá)增加和細(xì)胞角蛋白的減少可以作為乳腺癌侵襲性的參考指標(biāo)。Shirahata等[12,13]發(fā)現(xiàn)Vimentin高度甲基化可以作為結(jié)腸癌、胃癌的診斷指標(biāo)之一。而Wu等[14]發(fā)現(xiàn)Vimentin表達(dá)水平與雄激素非依賴性前列腺癌特異性抗原水平有關(guān)，同時(shí)與前列腺癌遷移、侵襲及轉(zhuǎn)移能力有關(guān)。

本研究通過(guò)免疫組化發(fā)現(xiàn)在前列腺癌上皮細(xì)胞中Vimentin的表達(dá)水平明顯高于正常對(duì)照組，其細(xì)胞內(nèi)表達(dá)水平與前列腺癌的臨床分期、Gleason評(píng)分成正相關(guān)，與患者生存率成反比。

綜上所述，通過(guò)檢測(cè)E-cadherin和Vimentin在前列腺癌上皮細(xì)胞中表達(dá)以及臨床分期，可以提高對(duì)前列腺癌的侵襲性及轉(zhuǎn)移性程度的準(zhǔn)確性，為治療提供依據(jù)。同時(shí)還可以對(duì)患者生存率進(jìn)行初步估計(jì)?？梢酝ㄟ^(guò)聯(lián)合檢測(cè)E-cadherin和Vimentin對(duì)前列腺癌侵襲性及生存預(yù)后判斷具有重要意義。目前已有研究發(fā)現(xiàn)提高E-cadherin的表達(dá)水平成為治療膀胱癌的一種新方法[15]。但本研究存在一定局限性，需要增大樣本量，延長(zhǎng)隨訪時(shí)間，進(jìn)行更深層次研究分析，從而明確E-cadherin和Vimentin與前列腺癌關(guān)系，及其作用機(jī)制的探討。

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（2015-02-13收稿）

The expressions of E-cadherin and vimentin in prostate cancer and their clinical signifcance

Yu Yang, Li Kejun*
Department of Urology, the First College of Clinical Medical Science, China Three Gorges University.Yichang Central People's Hospital, Hubei Yichang 443003, China Corresponding author: Li Kejun, E-mail: 1642042208@qq.com

Objective To investigate the expressions of E-cadherin and vimentin in prostate cancer and their clinical signifcance. Methods The expressions of E-cadherin and vimentin in 50 cases of prostate cancer were measured by immunohistochemistry. Correlation between the expression levels of E-cadherin and vimentin and clinical stage, Gleason score and survival rates was analyzed by Chi-square test. Results The positive expression rates of E-cadherin in normal prostate tissue samples and prostate cancer tissue samples were 90% and54%(P＜0.05).The positive expression rates of vimentin were 20% and 60% (P＜0.05). The expressions of E-cadherin and vimentin were correlated with clinical stage, Gleason score and survival rates (P＜0.05). Conclusion The expressions of E-cadherin and vimentin were closely associated with tumor grade ,Gleason score and survival rate. E-cadherin and vimentin may be as biomarkers to predict the malignant degree and prognosis of the patients with prostate cancer.

cadherins; vimentin; prostatic neoplasms

10.3969/j.issn.1008-0848.2015.05.003

R 737.25

*通訊作者, E-mail: 1642042208@qq.com