涂燕平 姚曉璐 曾黎峰 雷夢覺 王曉華 龔愛斌 魏偉榮 王凌玲 艾文偉 鄔甦

臨床研究

同型半胱氨酸與H型高血壓患者血小板活化的相關(guān)性及依那普利葉酸片的干預(yù)研究

涂燕平 姚曉璐 曾黎峰 雷夢覺 王曉華 龔愛斌 魏偉榮 王凌玲 艾文偉 鄔甦

目的 研究H型高血壓患者血同型半胱氨酸水平與其體內(nèi)血小板活化因子（CD41、CD62P）的關(guān)系，以及依那普利葉酸片對(duì)H型高血壓患者血同型半胱氨酸和血小板活化因子（CD41、CD62P）的影響。方法 選取輕中度H型高血壓患者200例，將其隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組各100例。試驗(yàn)組給予口服依那普利葉酸片，對(duì)照組給予口服依那普利，療程均為3個(gè)月。治療前后分別測量患者血壓、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子（CD41、CD62P）。結(jié)果 治療3個(gè)月后，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組平均動(dòng)脈壓［（80.2±6.6）mm Hg 比（81.6±8.1）mm Hg]、超敏 C 反應(yīng)蛋白［（3.1±1.3）mg/L 比（3.7±1.5）mg/L]、血同型半胱氨酸［（14.1±3.1）μmol/L 比（20.2±4.4）μmol/L]及血小板活化因子 CD41［（47.5±4.1）%比（54.5±3.9）]、CD62P［（18.5±3.1）%比（23.6±3.8）%]均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或 P＜0.01）。相關(guān)分析顯示，血同型半胱氨酸水平與H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化因子呈正相關(guān)（CD41 r=0.61，P＜005；CD62P r=0.55，P＜005）。結(jié)論高同型半胱氨酸可增加H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化。依那普利葉酸片在降血壓和降血漿同型半胱氨酸濃度的同時(shí)還可降低H型高血壓患者炎癥與血小板活化。與單純依那普利治療相比，依那普利葉酸片可更有效減少H型高血壓患者心血管發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

同型半胱氨酸； H型高血壓； 血小板活化； 依那普利葉酸片

血小板活化在動(dòng)脈硬化性心腦血管事件發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用。同型半胱氨酸可影響脂質(zhì)代謝、加重自由基及血管內(nèi)皮損傷等[1-3]，增加高血壓患者卒中發(fā)生率[4]。但其是否會(huì)增加H型高血壓患者血小板活化尚不清楚。依那普利葉酸片（依葉）是中國高血壓指南唯一推薦的作為H型高血壓的干預(yù)治療藥物。本研究旨在探討同型半胱氨酸對(duì)H型高血壓患者血小板活化的影響，以及依那普利葉酸片在降血壓降同型半胱氨酸的同時(shí)，是否會(huì)降低H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化。

1 資料與方法

1.1 一般資料 根據(jù)2010年中國高血壓防治指南修訂版標(biāo)準(zhǔn)（H型高血壓同型半胱氨酸水平在10 μmol/L以上），按住院號(hào)取我院初診的輕中度H型高血壓患者200例，其中男性126例、女性74例，年齡 37～81（63.6±7.2）歲。所有受檢者近期（至少一個(gè)月）內(nèi)無急性損傷、感染及風(fēng)濕等炎癥性疾病。本研究取得每位受試者的知情同意。

1.2 治療方法及觀察指標(biāo) 試驗(yàn)組患者口服依葉10.8 mg（含10 mg依那普利/0.8 mg葉酸），每日1次，由深圳奧薩制藥有限公司提供（國藥準(zhǔn)字號(hào)H20103783）；對(duì)照組口服馬來酸依那普利10 mg，每日1次，由上?，F(xiàn)代制藥有限公司提供（國藥準(zhǔn)字號(hào)H32026567）。每組均服藥3個(gè)月，每周監(jiān)測血壓 2次，記錄收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP），并計(jì)算平均動(dòng)脈壓（MAP）：MAP=（SBP+2×DBP）/3。所有病例治療前及治療3個(gè)月后復(fù)查血脂、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸和血小板活化因子（CD41、CD62P）。

1.3 檢測方法 超敏C反應(yīng)蛋白的測定采用免疫散射測濁法。血同型半胱氨酸測定采用高效液相色譜法，試劑盒由Mindrya深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司提供，具體檢測步驟參照說明書。血小板活化因子（CD41、CD62P）檢測采用美國貝克曼庫爾特公司生產(chǎn)的Coulter Epics XL型流式細(xì)胞儀。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理。計(jì)量資料以±s表示，同型半胱氨酸與血脂、超敏C反應(yīng)蛋白、血小板活化因子（CD41、CD62P）的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，兩組治療前后血壓、血脂、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子（CD41、CD62P）的比較采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前一般資料和各項(xiàng)指標(biāo)比較 兩組患者年齡、性別，治療前平均血壓、血脂、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子比較，均未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05），見表 1。

表1 兩組患者治療前各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s）

表1 兩組患者治療前各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s）

CD62P（%）依那普利組 100 61/39 63.3±8.4 5.74±0.61 1.76±0.71 92.9±7.3 4.7±1.2 20.6±3.6 55.6±4.5 24.5±3.5依葉組 100 65/35 64.2±7.8 5.68±0.48 1.72±0.58 93.4±8.2 4.8±1.1 21.7±3.8 56.1±3.3 24.3±3.2 t/χ2值 0.34 0.92 0.84 0.75 1.18 0.89 1.07 0.68 0.78 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＞0.05組別 例數(shù) 男/女 年齡（歲）總膽固醇（mmol/L）甘油三酯（mmol/L）平均動(dòng)脈壓（mm Hg）超敏C反應(yīng)蛋白（mg/L）同型半胱氨酸（μmol/L）CD41（%）

2.2 兩組治療后血壓、血脂、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子比較 治療3個(gè)月后，與單純依那普利治療組相比，依葉治療組血壓、超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子（CD41、CD62P）均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或 P＜0.01），見表 2。

表2 兩組患者治療后各項(xiàng)指標(biāo)的比較（±s）

表2 兩組患者治療后各項(xiàng)指標(biāo)的比較（±s）

CD62P（%）依那普利組 100 5.70±0.54 1.70±0.39 81.6±8.1 3.7±1.5 20.2±4.4 54.5±3.9 23.6±3.8依葉組 100 5.64±0.60 1.69±0.44 80.2±6.6 3.1±1.3 14.1±3.1 47.5±4.1 18.5±3.1 t值 0.88 1.25 2.17 2.36 6.35 5.14 3.55 P值 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.01 ＜0.01 ＜0.01組別 例數(shù) 總膽固醇（mmol/L）甘油三酯（mmol/L）平均動(dòng)脈壓（mm Hg）超敏C反應(yīng)蛋白（mg/L）同型半胱氨酸（μmol/L）CD41（%）

2.3 同型半胱氨酸與血小板活化因子相關(guān)性分析將兩組同型半胱氨酸與血小板活化因子進(jìn)行Spearman相關(guān)性分析，結(jié)果顯示，血同型半胱氨酸水平與H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化因子呈正相關(guān)（CD41 r=0.61，P＜0.05；CD62P r=0.55，P＜0.05）。

3 討論

H型高血壓是指合并血同型半胱氨酸（Homocysteine，Hcy）升高的高血壓病。同型半胱氨酸是一種含硫的非必需氨基酸。引起同型半胱氨酸增高的原因主要有遺傳因素和營養(yǎng)不良。前者是指與同型半胱氨酸代謝相關(guān)的關(guān)鍵酶基因發(fā)生突變致使同型半胱氨酸代謝異常，常見的有亞甲基四氫葉酸還原酶、甲基轉(zhuǎn)移酶等基因突變?cè)斐擅富钚韵陆?；而營養(yǎng)不良時(shí)體內(nèi)維生素B6、維生素B12、葉酸等維生素或輔酶含量嚴(yán)重缺乏，同樣影響同型半胱氨酸代謝[5]。流行病學(xué)調(diào)查、臨床和實(shí)驗(yàn)研究表明，高同型半胱氨酸與高血壓卒中等密切相關(guān)[6]。Lim等[7]對(duì)同型半胱氨酸和血壓進(jìn)行了一項(xiàng)歷時(shí)4年的橫斷面調(diào)查，發(fā)現(xiàn)在調(diào)整了心血管危險(xiǎn)因素后，同型半胱氨酸水平仍然與血壓呈獨(dú)立正相關(guān)，同型半胱氨酸水平每升高5 μmol/L，相應(yīng)的血壓男性升高 0.7/0.5 mm Hg（1 mm Hg=0.133 kPa），女性升高1.2/0.7 mm Hg。Pezzini等[8]通過Meta分析發(fā)現(xiàn)，血漿同型半胱氨酸升高5 μmol/L，腦卒中風(fēng)險(xiǎn)增加59%，同型半胱氨酸降低 3 μmol/L，腦卒中風(fēng)險(xiǎn)降低約24%。2002調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國成人高血壓患病率為18.8%，成年高血壓患者平均同型半胱氨酸水平為15 μmol/L，約75%的高血壓患者伴有血漿同型半胱氨酸水平升高。與西方人群相比，我國人群MTHFR677TT基因型的攜帶率約為25%，遠(yuǎn)高于西方國家10%～16%的水平[9]，TT基因型患者的血漿同型半胱氨酸水平高，故H型高血壓在我國更普遍。高血壓與高同型半胱氨酸有協(xié)同作用，是患者卒中最重要的危險(xiǎn)因素。雖然H型高血壓與腦卒中風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系已基本確認(rèn)，但在冠心病的研究中，高同型半胱氨酸作為獨(dú)立危險(xiǎn)因子的地位尚未得到最終肯定[10]。同型半胱氨酸在心腦血管發(fā)病中的確切作用機(jī)制還有待更多更深的研究。

血管內(nèi)皮功能受損、炎癥反應(yīng)、血小板活化在動(dòng)脈硬化性心腦血管事件發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用[11,12]。CD62P也稱P-選擇素，是識(shí)別活化血小板的標(biāo)志物，介導(dǎo)血小板和內(nèi)皮細(xì)胞的黏附；CD41又稱αⅡb整合素，血小板活化時(shí)，此復(fù)合物因構(gòu)象改變而暴露出與纖維蛋白原的受體結(jié)合部位，在血小板的第一相聚集和第二相聚集中起著重要作用。流式細(xì)胞儀分析血小板表面CD41和CD62P的表達(dá)量，可從分子水平反映血小板激活程度，是目前公認(rèn)的評(píng)估血小板活化狀態(tài)及血栓形成傾向的快捷而且靈敏的方法之一[13]。

同型半胱氨酸是一種具有細(xì)胞毒性的含硫氨基酸[14]。研究表明，同型半胱氨酸影響脂質(zhì)代謝，加重自由基及血管內(nèi)皮損傷，與高血壓心腦血管疾病相關(guān)。但目前同型半胱氨酸是否會(huì)增加高血壓患者血小板活化，依那普利葉酸片在降低H型高血壓治療的同時(shí)是否會(huì)降低同型半胱氨酸和血小板活化因子尚不太清楚。我們對(duì)200例H型高血壓患者進(jìn)行了研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，血同型半胱氨酸水平與H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化因子（CD41、CD62P）呈正相關(guān)。治療3個(gè)月后，與單純依那普利治療組相比，依葉治療組超敏C反應(yīng)蛋白、同型半胱氨酸、血小板活化因子（CD41、CD62P）均下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說明高同型半胱氨酸會(huì)增加H型高血壓患者體內(nèi)血小板活化，依那普利葉酸片在降血壓和降血漿同型半胱氨酸濃度的同時(shí)還可降低H型高血壓患者血小板活化。與單純依那普利治療相比,依那普利葉酸片可更有效地減少H型高血壓患者心血管發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。依葉治療組患者在同型半胱氨酸降低的同時(shí)血壓進(jìn)一步下降，其機(jī)制可能與同型半胱氨酸會(huì)激活H型高血壓RASS通路有關(guān)[15]，同時(shí)也表明依那普利葉酸片比單純依那普利更適于H型高血壓治療。

［1]Sontakke AN，Tilak MA，Dhat VV，et al.Prevalence of elevated serum homocysteine and serum lipoprotein‘a(chǎn)’in women.J Clin Diagn Res，2014，8：CC13-15.

［2]Liu HH，Shih TS，Huang HR，et al.Plasma homocysteine is associated with increased oxidative stress and antioxidant enzyme activity in welders.Scientific World Journal，2013，2013：370487.

［3]Cao C，Hu J，Dong Y，et al.Gender differences in the risk factors for endothelial dysfunction in chinese hypertensive patients：homocysteine is an independent risk factor in females.PLoS One，2015，10：e0118686.

［4]Fu HJ，Zhao LB，Xue JJ，et al.Elevated serum homocysteine（Hcy） levels may contribute to the pathogenesis of cerebral infarction.J Mol Neurosci，2015 Feb 15［Epub ahead of print]．

［5]Fukuda N，Hamajima N，Wakai K，et al.A cross-sectional study to find out the relationship of methylenetetrahydrofolate re－ductase（MTHFR）C677T genotype with plasma levels of folate and total homocysteine by daily folate intake in Japanese.J Nutr Sci Vitaminol（Tokyo），2014，60：231-238.

［6]ZHONG C，LV L，LIU C，et al.High homocysteine and blood pressure related to poor outcome of acute ischemia stroke in chinese population.PLoS One，2014，9：e107498.

［7]Lim U，Cassano PA．Homocysteine and blood pressure in the Third National Health and Nutrition Examination Survery.AMJ Epidemiol，2012，156：1105.

［8]Pezzini A，Zotto ED，Padovani A．Homocysteine and cerebral ischemia：pathogenic and therapeutical implications.CMC，2007，4：1-14.

［9]Goldstein LB，Bushnell CD，Adams RJ，et al.Guidelines for the primary prevention of stroke：a guideline for healthcare professionals from the American Heart Associ-ation/American Stroke Association.Stroke，2011，42：517-584.

［10]Cacciapuoti F.Hyper-homocysteinemia：a novel risk factor or a powerful marker for cardiovascular diseases pathogenetic and therapeutical uncertainties.J Thromb Thrombolysis，2011，32：82-88.

［11]于濤，李婧，張文杰.炎性因子在急性心肌梗死發(fā)病中的作用及不同劑量他汀類藥物對(duì)其影響.中國心血管病研究，2006，4：441-443.

［12]陳穎，徐培敬，張楓林.冠心病患者血小板活化因子（CD62p、CD63）表達(dá)的臨床意義.中國心血管病研究，2007，5：112-113.

［13]洪強(qiáng)，陳漢水.流式細(xì)胞術(shù)與三種活化血小板檢測方法的比較.中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，29：59-60.

［14]Lin N，Qin S，Luo S，et al．Homocysteine induces cytotoxicity and proliferation inhibition in neuralstem cellsvia DNA methylation in vitro.FEBS J，2014，281：2088-2096.

［15]姜衡，于曼麗，魏勇，等.同型半胱氨酸在大鼠血管平滑肌細(xì)胞上通過激活ERK1/2信號(hào)通路促進(jìn)血管緊張素Ⅱ受體1表達(dá).第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，35：45-50.

Elevated homocysteine is associated with increased platelet activation in H-type hypertensive patients:effects of Enalapril/folic acid administration

TU Yan-ping，YAO Xiao-lu，ZENG Li-feng，et al.Department of Geratology，Jiangxi Provincial People′s Hospital，Nanchang 330006，China

ObjectiveTo study the relationship between serum homocysteine and platelet activator（CD62P，CD41），and the influence of Enalapril/folic acid on platelet activator （CD62P，CD41） in H-type hypertensive patients.Methods200 patients with mild to moderate hypertension were enrolled and randomly divided into two groups（the treatment group and the control group），100 for each group respectively.Patients in the treatment group were treated with Enalapril/folic acid for 3 months，while the control group with Enalapril.Blood pressure，high sensitive c-reactive protein，homocyseine，platelet activator（CD62P、CD41）were measured in all patients pre-and post-3 month's therapy.ResultsMean arterial blood pressure（80.2±6.6）mm Hg vs（81.6±8.1）mm Hg，high sensitive c-reactive protein（3.1±1.3）mg/L vs （3.7±1.5）mg/L，homocysteine（14.1±3.1）μmol/L vs（20.2±4.4）μmol/L，platelet activator CD41（47.5±4.1）%vs （54.5±3.9）and CD62P（18.5±3.1）%vs （23.6±3.8）% in the treatment group were all reduced significantly as compared with that in the control group （P＜0.05 or P＜0.01）and homocysteine was positively correlated to serum platelet activator in H-type hypertensive patients（CD41 r=0.61，P＜0.05，CD62P r=0.55，P＜0.05）.ConclusionHomocysteine can increase platelet activation in H-type hypertensive patient，Enalapril/folic acid is not only effective in controling of blood pressure but also effective in reducing of inflammation and platelet activation in H-type hypertensive patient，Enalapril/folic acid ismore effective in lowing cardiovascular risk as compared with Enalapril in H-type hypertensive patient.

Homocysteine； H-type hypertension； Platelet activation； Enalapril/Folic Acid

江西省衛(wèi)生廳科技計(jì)劃項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：20141017）

330006 江西省南昌市，江西省人民醫(yī)院干部病房

10．3969/j．issn．1672－5301．2015．08．014

R544.1

A

1672-5301（2015）08-0727－04

2015-04-09）