閆翠英

新疆博湖縣疾病預(yù)防控制中心，新疆博湖 841400

1 概述

在臨床醫(yī)學(xué)中，通過(guò)引入微生物檢驗(yàn)技術(shù)，不僅能夠?yàn)榕R床醫(yī)師提供極具價(jià)值的分析資料，進(jìn)而保障當(dāng)疾病診斷的準(zhǔn)確性，而且還可以有針對(duì)性地制定出患者疾病的治療措施，從而降低醫(yī)院對(duì)疾病的誤診率和漏診率。近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展以及國(guó)家對(duì)微生物領(lǐng)域的政策和資金支持，微生物檢驗(yàn)已初步應(yīng)用到臨床治療當(dāng)中，并且取得了較好的效果[2]。因此，也引起了世界臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的高度重視。

2 室內(nèi)控制

楊彩鈴[1]（2010）在對(duì)微生物檢驗(yàn)在醫(yī)院感染監(jiān)控中的作用進(jìn)行研究時(shí)指出室內(nèi)控制是微生物檢驗(yàn)中最基礎(chǔ)也是最為重要的工作內(nèi)容，且此項(xiàng)工作開(kāi)展的嚴(yán)格程度以及工作的質(zhì)量水平一方面關(guān)系著臨床結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，另一方面，對(duì)于結(jié)果的可利用性也具有重要的影響。該研究則主要從樣本采集、儀器與試劑的采購(gòu)以及微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境建設(shè)和培養(yǎng)基的選擇方面對(duì)微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)質(zhì)量控制展開(kāi)了深入研究。

2.1 樣本

董艷娥[2](2010)在研究護(hù)理管理在控制醫(yī)院感染中的作用時(shí)從室內(nèi)控制的角度出發(fā)，研究了微生物檢驗(yàn)中此項(xiàng)工作的樣本采集，其指出樣本的采集控制不僅與醫(yī)護(hù)人員有關(guān)，而且同患者自身身體狀況和配合程度也具有較大關(guān)系。在從患者的分泌物、體液以及排泄物中進(jìn)行樣本采集時(shí)，要將相關(guān)要求如實(shí)告知患者，例如空腹、飯后、忌食等。此外，還需對(duì)患者的病史以及相關(guān)藥物的治療歷史進(jìn)行全面而系統(tǒng)的調(diào)查了解。在樣本采集的過(guò)程中，需要遵循具體的微生物附著體的樣本采集制度實(shí)施此項(xiàng)工作。采集過(guò)程中應(yīng)盡量留存規(guī)定采集量或偏多樣本，避免樣本采集量過(guò)小導(dǎo)致致病微生物檢驗(yàn)失敗，進(jìn)而提高微生物檢驗(yàn)準(zhǔn)確性。在樣本采集工作結(jié)束后，采集人員應(yīng)以樣本檢測(cè)的規(guī)定為基準(zhǔn)，將樣本及時(shí)進(jìn)行保存，并將其轉(zhuǎn)送至微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢驗(yàn)。由于樣本多來(lái)自患者的分泌物、體液以及排泄物和血液等部分，而不同位置的分泌物或體液的成分可能不盡相同。因此，樣本的來(lái)源以及檢測(cè)目的也具有不同程度的差異，這便導(dǎo)致了不同樣本的保存條件如溫度、光線、濕度等也有所差別，故在進(jìn)行樣本保存時(shí)，一定要按照相關(guān)規(guī)定和原則對(duì)不同的樣品進(jìn)行保存。

2.2 儀器及試劑

姜波，包志平[3]（2009）在對(duì)臨床微生物檢驗(yàn)與監(jiān)測(cè)在醫(yī)院感染中應(yīng)用方法進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，微生物檢驗(yàn)的室內(nèi)控制工作中，儀器與試劑的標(biāo)準(zhǔn)化程度對(duì)檢驗(yàn)的結(jié)果具有直接影響。其指出，儀器與試劑的選擇是微生物檢驗(yàn)室內(nèi)控制工作中，最為關(guān)鍵的步驟之一，對(duì)于微生物實(shí)驗(yàn)室的儀器而言，均應(yīng)具備較高的標(biāo)準(zhǔn)化程度，在采購(gòu)渠道方面，微生物實(shí)驗(yàn)室所需儀器均應(yīng)由正規(guī)渠道采購(gòu)，經(jīng)上級(jí)質(zhì)檢部門(mén)檢測(cè)合格后方可投入使用[4]。

除了需要注意使用方法的準(zhǔn)確性外，還應(yīng)定期對(duì)各類(lèi)檢驗(yàn)儀器進(jìn)行養(yǎng)護(hù)，在出現(xiàn)故障時(shí)，應(yīng)及時(shí)上報(bào)至設(shè)備檢修部門(mén)通知其對(duì)故障設(shè)備進(jìn)行維修，維修完成后應(yīng)使用標(biāo)準(zhǔn)曲線校正后方可正常使用，指派專(zhuān)人做好養(yǎng)護(hù)及維修記錄[5]。在試劑的采購(gòu)方面，應(yīng)從國(guó)內(nèi)外知名的試劑廠家進(jìn)行采集，并根據(jù)不同試劑對(duì)環(huán)境的具體要求，將其進(jìn)行科學(xué)的保存。對(duì)于避光的試劑應(yīng)放在陰涼處，而對(duì)環(huán)境干度具有較高要求的試劑應(yīng)置于干燥處保存[6]。此外，在每次進(jìn)行微生物檢驗(yàn)后，還應(yīng)及時(shí)對(duì)相關(guān)試劑的庫(kù)存數(shù)量進(jìn)行清點(diǎn)，對(duì)于過(guò)期的試劑應(yīng)以正確的方法對(duì)其進(jìn)行及時(shí)處理。此外，還需注意的是，若儀器需更換使用試劑，應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線校正后再實(shí)施微生物檢驗(yàn)。

2.3 環(huán)境

微生物實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境建設(shè)是保證微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵性工作，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境水平的高低，不僅影響著微生物檢驗(yàn)室內(nèi)控制的結(jié)果，而且對(duì)于患者感染程度的判定以及相關(guān)治療方案的制定也具有較大影響。微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)、使用標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)符合國(guó)家規(guī)定的二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室相關(guān)要求，實(shí)驗(yàn)室溫度應(yīng)維持在22～28℃恒溫狀態(tài)，并每隔一段時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行全面滅菌，確保通風(fēng)狀態(tài)、照明、懸浮微粒、噪聲、濕度、震動(dòng)及電場(chǎng)等因素達(dá)標(biāo)，在條件允許的情況下，醫(yī)院還可組織專(zhuān)業(yè)人員定期檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境，并對(duì)于在環(huán)境檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)的問(wèn)題進(jìn)行及時(shí)處理，進(jìn)而從整體上確保微生物檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可利用性[7]。

2.4 培養(yǎng)基

培養(yǎng)基作為微生物檢驗(yàn)當(dāng)中的重要組成部分，其自身質(zhì)量在一定程度上影響著微生物檢驗(yàn)的結(jié)果以及有效性。根據(jù)樣本及培養(yǎng)對(duì)象選擇合適的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基濕度、pH 值、滅菌等情況均可對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響，避免貽誤患者的治療時(shí)機(jī)[8]。培養(yǎng)完成后以及滅菌，消除非病原對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的影響。

2.5 方法

微生物檢驗(yàn)工作的進(jìn)行應(yīng)該應(yīng)嚴(yán)格以國(guó)家、地方、行業(yè)制訂的各類(lèi)微生物檢驗(yàn)方法為依據(jù)。需要說(shuō)明的是，在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí)，若某項(xiàng)微生物檢驗(yàn)內(nèi)容目前并不具備任何標(biāo)準(zhǔn)的方法，則應(yīng)查閱知名書(shū)籍、技術(shù)組織、權(quán)威期刊所涉及的檢驗(yàn)方法，根據(jù)當(dāng)前實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)條件及設(shè)備選擇合適方法并實(shí)施驗(yàn)證、鑒定，以確保檢驗(yàn)結(jié)果具有相較于其他一般性方法而言，具有較高的全面性、可靠性和真實(shí)性[9]。在檢驗(yàn)工作結(jié)束后，將驗(yàn)證及鑒定結(jié)果報(bào)上級(jí)有關(guān)部門(mén)審批并獲得許可后方可完成該微生物檢驗(yàn)。值得注意的是，在微生物檢驗(yàn)工作結(jié)束后，需要依據(jù)國(guó)家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行清理，包括通風(fēng)環(huán)境、干濕度和溫度的調(diào)整以及設(shè)備和試劑的清洗等[10]。

3 室間控制

所謂微生物檢驗(yàn)的室間質(zhì)量控制主要是由實(shí)驗(yàn)室外部的機(jī)構(gòu)或是組織對(duì)實(shí)驗(yàn)室整體進(jìn)行的質(zhì)量評(píng)價(jià)。

3.1 菌株的選擇

Lawrence[11]（2012）在研究微生物檢驗(yàn)在控制感染中所起到的作用時(shí)指出，室間控制是影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果的主要因素，而菌株的選擇則直接影響著室間控制的結(jié)果。其指出對(duì)于菌株的選擇與保存，具體來(lái)源主要分為兩方面內(nèi)容。一方面，美國(guó)典型菌種保存中心(ATCC)；另一方面，英國(guó)國(guó)家典型菌種保存中心(NCTC)，該實(shí)驗(yàn)菌株主要來(lái)自于美國(guó)典型菌株保存中心。菌株的具體保存時(shí)間需要根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行調(diào)整，滿(mǎn)足檢驗(yàn)要求。

3.2 試劑、試紙、診斷血清的質(zhì)量控制

Sarita R[12]（2013）研究了試劑、試紙以及診斷血清德國(guó)工作對(duì)于微生物檢驗(yàn)中室間控制的重要性，其對(duì)氧化酶、觸酶、凝固酶試劑的使用做出了如下規(guī)定，即上述試劑每次使用要用已知陰性、陽(yáng)性菌株做對(duì)照，β-內(nèi)酰胺酶試紙、診斷血清、抗原檢測(cè)試劑每次使用均要設(shè)陰、陽(yáng)性對(duì)照，染色液可每周質(zhì)控一次。實(shí)現(xiàn)對(duì)試劑、試紙以及診斷血清的質(zhì)量控制。但需要注意的是革蘭染色是細(xì)菌鑒定的關(guān)鍵因素，避免錯(cuò)判染色結(jié)果產(chǎn)生。在實(shí)驗(yàn)室具體檢測(cè)過(guò)程中，需確保多種染色方法，避免漏檢。

3.3 培養(yǎng)基質(zhì)量控制

與培養(yǎng)基的應(yīng)用，需要確保每個(gè)品種以及每一批次應(yīng)取總數(shù)的3%作為無(wú)菌試驗(yàn)，保證各項(xiàng)檢驗(yàn)合格?；谶x擇性培養(yǎng)基的內(nèi)容，至少需要選擇兩株菌株進(jìn)行培養(yǎng)，實(shí)現(xiàn)可生長(zhǎng)菌生長(zhǎng)良好，抑制菌株不聲張，證明生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)合格。對(duì)鑒定與藥敏應(yīng)用的板條，可運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證其有效性，過(guò)期丟棄。

4 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，對(duì)于臨床微生物檢驗(yàn)工作而言，由于受其自身工作多重屬性的影響，使得此項(xiàng)工作在具體的鑒定和室內(nèi)外控制過(guò)程中的開(kāi)展較為復(fù)雜。并且由于微生物自身特點(diǎn)的影響，造成嚴(yán)謹(jǐn)性受到干擾。在進(jìn)行微生物檢驗(yàn)在感染控制方面的應(yīng)用，應(yīng)重視適用性，按照檢驗(yàn)結(jié)果用藥后，患者臨床癥狀得到緩解，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)效果良好。

[1]楊彩玲.微生物檢驗(yàn)在醫(yī)院感染監(jiān)控中的作用[J].臨床合理用藥雜志，2010(24)：5.

[2]董艷娥.護(hù)理管理在控制醫(yī)院感染中的作用[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010(15)：94-98.

[3]姜波，包志平.臨床微生物檢驗(yàn)與監(jiān)測(cè)在醫(yī)院感染中的意義[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009(15)：2047.

[4]蔣瓊，陳曉玲.探析微生物檢驗(yàn)于醫(yī)院感染控制中的重要意義與應(yīng)用[J].大家健康：學(xué)術(shù)版，2014(3)：56.

[5]劉軍，楊會(huì)，李成剛.感染控制中微生物檢驗(yàn)的科學(xué)應(yīng)用分析[J].大家健康：學(xué)術(shù)版，2014(11)：68-69.

[6]楊娜.微生物檢驗(yàn)在醫(yī)院感染控制中的臨床觀察[J].吉林醫(yī)學(xué)，2014(29)：6521.

[7]陳葉.臨床微生物在感染控制中作用[J].生物技術(shù)世界，2014(9)：94.

[8]高迎春.微生物檢驗(yàn)在感染控制中的實(shí)踐應(yīng)用[J].大家健康：學(xué)術(shù)版，2014(22)：66.

[9]陳麗.微生物檢驗(yàn)在醫(yī)院感染控制中的價(jià)值分析[J].藥物與人，2014(7)：46-47.

[10]桑勇先.微生物檢驗(yàn)在醫(yī)院感染控制中的地位及作用[J].中國(guó)醫(yī)藥指南，2014(34)：381.

[11]Lawrence F Muscarella.Medical errors，infection-control breaches and the use of adulterated and misbranded medical devices [J].World Journal of Clinical Infectious Diseases，2012(2)：21-22.

[12]Shah Sarita R，Kasper F Kurtis，Mikos Antonios G.Perspectives on the prevention and treatment of infection for orthopedic tissue engineering applications[J].Chinese Science Bulletin，2013(35)：5-7.