馬亮亮，關(guān)艷春，李丹丹，方美云

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 血液科，遼寧 大連 116011； 2.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 風(fēng)濕科， 遼寧 大連 116011； 3.營(yíng)口市中心醫(yī)院 腎內(nèi)科， 遼寧 營(yíng)口 115003)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清瘦素和可溶性瘦素受體的檢測(cè)及意義

馬亮亮1，關(guān)艷春2，李丹丹3，方美云1

(1.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 血液科，遼寧 大連 116011； 2.大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院 風(fēng)濕科， 遼寧 大連 116011； 3.營(yíng)口市中心醫(yī)院 腎內(nèi)科， 遼寧 營(yíng)口 115003)

目的探討血清瘦素(leptin, Lp)和可溶性瘦素受體(soluble leptin receptor, sLR)與系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus, SLE)發(fā)病及病情的關(guān)系。方法采用ELISA方法檢測(cè)大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕科收治的87例SLE患者和85例健康對(duì)照者血清Lp和sLR濃度，并將SLE患者分為活動(dòng)期組和穩(wěn)定期組、合并狼瘡腎炎組和無(wú)狼瘡腎炎組、合并關(guān)節(jié)癥狀組和無(wú)關(guān)節(jié)癥狀組分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。分析SLE患者血清Lp和sLR水平與病程、體重指數(shù)(BMI)、血沉、血紅蛋白、血小板、抗核抗體、抗雙鏈DNA抗體、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)、補(bǔ)體(C3、C4)、SLEDAI評(píng)分等臨床指標(biāo)的相關(guān)性。 結(jié)果SLE組血清Lp水平(7.06±3.19)ng/mL高于健康對(duì)照組(5.36±2.66) ng/mL(P<0.05)；血清sLR水平與健康對(duì)照組差異無(wú)顯著性意義(P>0.05)。血清Lp和sLR水平在SLE活動(dòng)期組和穩(wěn)定期組，狼瘡腎炎組和無(wú)狼瘡腎炎組，有關(guān)節(jié)癥狀和無(wú)關(guān)節(jié)癥狀組均無(wú)明顯差異(P>0.05)。 SLE 患者血清Lp水平與BMI呈正相關(guān)(r=0.375，P=0.022)，與sLR 呈負(fù)相關(guān)(r=-0.219，P=0.041)。SLE患者血清sLR水平與血沉、IgG、IgA、 IgM均呈正相關(guān)(r=0.387，P=0.001；r=0.336，P=0.009；r=0.331，P=0.010；r=0.366，P=0.004)，與其它臨床指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論SLE患者血清Lp水平顯著升高，Lp的水平變化可能與SLE的發(fā)病密切相關(guān)，但血清Lp和sLR濃度尚不能作為SLE病情評(píng)價(jià)及監(jiān)測(cè)的指標(biāo)。

瘦素；可溶性瘦素受體；系統(tǒng)性紅斑狼瘡

[引用本文]馬亮亮，關(guān)艷春，李丹丹，等. 系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清瘦素和可溶性瘦素受體的檢測(cè)及意義[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015,37(3)：242-245.

瘦素(leptin，Lp)是由肥胖基因編碼，主要由脂肪細(xì)胞分泌的一類多肽類激素。早期研究發(fā)現(xiàn)其主要作用是降低食欲，促進(jìn)能量消耗，調(diào)節(jié)機(jī)體能量平衡。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)瘦素還參與神經(jīng)內(nèi)分泌、免疫等許多其它生理功能[1]。瘦素可通過(guò)與可溶性瘦素受體(soluble leptin receptor，sLR)結(jié)合對(duì)淋巴細(xì)胞增殖活化及細(xì)胞因子產(chǎn)生發(fā)揮促炎癥性免疫調(diào)節(jié)作用。國(guó)內(nèi)外一些學(xué)者對(duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、自身免疫性腦脊髓膜炎等自身免疫性疾病研究中發(fā)現(xiàn)Lp和sLR與疾病發(fā)病及病情密切相關(guān)[1-4]。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種有多系統(tǒng)損害的慢性自身免疫性疾病，中國(guó)的年患病率約為1/1000，以育齡期女性多見(jiàn)。該病預(yù)后差，尚無(wú)根治方法，參與機(jī)體免疫異常的因素并不明確。目前關(guān)于Lp和sLR與SLE的發(fā)病及疾病活動(dòng)性的相關(guān)報(bào)道較少且并不一致。本研究檢測(cè)SLE患者血清Lp和sLR水平，并分析其與病情和臨床指標(biāo)的相關(guān)性，旨在進(jìn)一步探討SLE的發(fā)病機(jī)制，尋找SLE治療新的靶點(diǎn)。

1　資料與方法

1.1研究對(duì)象

收集2010年5月—2013年12月大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院風(fēng)濕科住院的SLE患者87例，其中男性11例，女性76例，年齡18～78歲，平均(43.14±14.70)歲，體重指數(shù)(BMI) (21.25±2.37)kg/m2，診斷均符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)1997修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中合并狼瘡腎炎(lupus nephritis，LN) 47例。有關(guān)節(jié)癥狀39例。疾病活動(dòng)性判斷根據(jù)SLE疾病活動(dòng)指數(shù)(SLEDAI)評(píng)分，SLEDAI評(píng)分≥10分為活動(dòng)期，<10分為穩(wěn)定期。活動(dòng)期患者40例，穩(wěn)定期患者47例。健康對(duì)照組85例，均來(lái)自門(mén)診健康體檢者，其中男性14例，女性71例，年齡24～76歲，平均年齡(45.73±12.89)歲，體重指數(shù)(BMI)(22.89±2.11)kg/m2。所有患者及健康對(duì)照組均無(wú)高血壓、糖尿病、妊娠、腫瘤及其他自身免疫病，采血前醋酸潑尼松的劑量<5 mg/d，兩組性別、年齡、BMI差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2 標(biāo)本采集

采集SLE患者及健康人晨空腹靜脈血2 mL，4 ℃靜置后1500 r/min離心10 min，分離血清，分裝后儲(chǔ)存于-80 ℃冰箱待測(cè)。

1.3血清Lp及sLR水平檢測(cè)

采用雙抗體夾心ELISA試劑盒檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)操作及結(jié)果判讀嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。人瘦素和可溶性瘦素受體ELISA檢測(cè)試劑盒均購(gòu)自武漢博士德公司。采用同批號(hào)ELISA試劑盒，批間差異<10%。

1.4其它指標(biāo)檢測(cè)

血常規(guī)、尿常規(guī)、24 h尿蛋白定量、血沉(ESR)、免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)，補(bǔ)體(C3、C4)，抗核抗體，抗雙鏈DNA抗體等按本院常規(guī)方法測(cè)定。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2　結(jié)　果

2.1SLE組、對(duì)照組血清Lp和sLR水平比較

SLE組血清Lp水平高于健康對(duì)照組，差異具有顯著性意義(P<0.05)；SLE組血清sLR水平與健康對(duì)照組無(wú)明顯差異(P>0.05)。SLE患者的活動(dòng)期組和穩(wěn)定期組，狼瘡腎炎組和無(wú)狼瘡腎炎組，有關(guān)節(jié)癥狀組和無(wú)關(guān)節(jié)癥狀組組間比較，血清Lp和sLR水平均無(wú)明顯差異(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2SLE患者血清Lp和sLR水平與臨床指標(biāo)的相關(guān)性

SLE 患者血清Lp水平與BMI呈正相關(guān)(r=0.375，P=0.022)，與sLR 呈負(fù)相關(guān)(r=-0.219，P=0.041)。SLE患者血清sLR水平與血沉、免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均呈正相關(guān)(r=0.387，P=0.001;r=0.336，P=0.009;r=0.331，P=0.010;r=0.366，P=0.004)，與其它臨床指標(biāo)無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表2。

表1　SLE患者不同臨床特征組與對(duì)照組血清瘦素和可溶性瘦素受體水平的比較Tab 1 Serum leptin levels and SLR levels in SLE patients and control groups 　(mean±SD, ng/mL)

表2　SLE患者血清LP和sLR濃度與各臨床指標(biāo)相關(guān)性分析Tab 2 Relationship between serum leptin, sLR levels and other clinical indexes in patients with SLE

3　討　論

血清Lp的水平是否與SLE病情相關(guān)，目前尚無(wú)定論。本研究將SLE患者根據(jù)病情分為活動(dòng)期組、合并狼瘡腎炎組、有關(guān)節(jié)癥狀組，分別與穩(wěn)定期組、無(wú)狼瘡腎炎組、無(wú)關(guān)節(jié)癥狀組患者進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)血清Lp濃度在相應(yīng)組間并無(wú)明顯差異。再將血清Lp水平與患者BMI、年齡、病程、抗核抗體滴度、抗雙鏈DNA抗體、血紅蛋白、血小板、免疫球蛋白(IgG、IgM及IgA)、補(bǔ)體C3、補(bǔ)體C4、ESR、SLEDAI評(píng)分等臨床指標(biāo)做相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)SLE患者血清Lp水平僅與BMI呈正相關(guān)，與上述其它指標(biāo)均無(wú)相關(guān)性。本研究結(jié)論與Kim等[5]的研究結(jié)果相同，提示血清Lp參與SLE的發(fā)病，但尚不能作為SLE病情的預(yù)測(cè)及評(píng)價(jià)指標(biāo)。但也有研究發(fā)現(xiàn)血清Lp水平與SLE患者的臨床特征或病情密切相關(guān)，如Vadacca等[7-8]發(fā)現(xiàn)血清Lp水平與SLE患者SLEDAI評(píng)分和心血管疾病的發(fā)生呈正相關(guān)；Wisowska等[9]發(fā)現(xiàn)血清Lp水平與患者血紅蛋白、年齡、病程呈正相關(guān)，與關(guān)節(jié)炎負(fù)相關(guān)；Afroze等[6]發(fā)現(xiàn)血清Lp水平與患者的關(guān)節(jié)炎呈正相關(guān)。以上研究結(jié)果不盡相同，可能與不同研究的入組病例數(shù)，患者的臨床特征，病情及檢測(cè)靈敏性等多因素有關(guān)，有待進(jìn)一步深入探討。

Lp在體內(nèi)發(fā)揮作用需與其受體結(jié)合后，參與多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，介導(dǎo)其生理功能。可溶性瘦素受體是血漿中主要的瘦素結(jié)合蛋白。根據(jù)其胞內(nèi)長(zhǎng)度及氨基酸序列組成不同可分為長(zhǎng)型和短型兩種。長(zhǎng)型具有瘦素受體所有的功能區(qū)，是執(zhí)行瘦素功能的主要受體。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)sLR減少Lp與其膜表面受體結(jié)合，抑制下丘腦長(zhǎng)型瘦素受體介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)，促進(jìn)實(shí)驗(yàn)鼠攝食和體重增加，提示sLR在調(diào)控血漿中游離Lp水平及其激活方面發(fā)揮作用[10-12]。Bagheri等[13]檢測(cè)34例SLE患者血清sLR水平，發(fā)現(xiàn)其顯著低于健康對(duì)照組(P<0.05)，并與患者BMI呈負(fù)相關(guān)。而Afroze等[6]檢測(cè)100例初發(fā)未治的SLE患者和100例健康對(duì)照者血清sLR濃度，未發(fā)現(xiàn)顯著差異；但發(fā)現(xiàn)SLE 患者血清Lp水平與sLR 呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果與后者相同，未發(fā)現(xiàn)SLE患者和對(duì)照組血清sLR濃度存在差異，但也發(fā)現(xiàn)SLE 患者血清Lp水平與sLR 呈負(fù)相關(guān)，提示Lp與sLR之間可能存在反饋調(diào)控。

本研究對(duì)SLE患者血清sLR的亞組進(jìn)行比較未發(fā)現(xiàn)顯著差異。將血清sLR濃度與SLE患者臨床指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析示sLR水平與ESR、免疫球蛋白IgG、IgM及IgA呈正相關(guān)，而與其它指標(biāo)無(wú)相關(guān)性。而ESR、IgG、IgM及IgA并非SLE病情特異的臨床指標(biāo)，還與多因素有關(guān)。因此不能將血清sLR水平作為評(píng)價(jià)SLE病情的預(yù)測(cè)指標(biāo)。

綜上，本研究發(fā)現(xiàn)SLE患者血清Lp水平高于健康對(duì)照組，而血清 sLR水平與健康對(duì)照組無(wú)明顯差異，提示Lp在SLE的發(fā)病中起一定的作用，抑制機(jī)體Lp的生成或阻斷Lp的作用可能成為治療SLE新的靶點(diǎn)。本研究未發(fā)現(xiàn)血清Lp和sLR水平與SLE患者的病情具有相關(guān)性，提示還不能將兩者作為SLE病情的評(píng)價(jià)和監(jiān)測(cè)指標(biāo)，應(yīng)擴(kuò)大病例，并深入到基因和蛋白水平及Lp與sLR結(jié)合后的分子調(diào)節(jié)機(jī)制方面深入研究。

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Detection of serum leptin and soluble leptin receptor levels and its significance in patients with systemic lupus erythematosus

MA Liang-liang1，GUAN Yan-chun2，LI Dan-dan3，F(xiàn)ANG Mei-yun1

(1.DepartmentofHematology，theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity，Dalian116011，China；2.DepartmentofRheumatology，theFirstAffiliatedHospitalofDalianMedicalUniversity，Dalian116011，China；3.DepartmentofNephrology,YingkouCenteralHospital,Yingkou115003,China)

Objective To investigate the serum levels of leptin and soluble leptin receptor in patients with systemic lupus erythematosus (SLE) and to analyze their correlation with SLE disease activity and clinical parameters. Methods Serum leptin and soluble leptin receptor levels of 87 patients with SLE and 85 matched healthy controls were measured by ELISA assays. The liner correlation analysis was used to evaluate the relationship between levels of leptin and soluble leptin receptor with their clinical parameters. Results Compared to normal controls, serum level of leptin was significant higher in SLE patients [(7.06±3.19) ng/mL vs. (5.36±2.66) ng/mL,P<0.05]. No significant difference was found in soluble leptin receptor levels between SLE patients and controls. Furthermore there were no differences in the levels of leptin and soluble leptin receptor between active and inactive SLE patients, patients with and without lupus nephritis (LN) and patient with and without arthritis, respectively. A positive association was observed between leptin levels in SLE patients and body mass index (BMI) (r=0.375,P=0.022); a negative correlation was observed between leptin and soluble leptin re-ceptor levels in SLE patients (r=-0.219,P=0.041). The serum soluble leptin receptor levels were positively correlated with ESR, IgG, IgA and IgM (r=0.387,P=0.001;r=0.336,P=0.009;r=0.331,P=0.010;r=0.366,P=0.004, respectively). Conclusion Abnormal levels of leptin might be involved in the pathogenesis of SLE. However, levels of serum leptin and soluble leptin receptor could not be used as a clinical index to evaluate the severity of SLE.

leptin; soluble leptin receptor; systemic lupus erythematosus

論著10.11724/jdmu.2015.03.08

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81370604)； 遼寧省醫(yī)學(xué)高峰工程建設(shè)項(xiàng)目(200933)

馬亮亮(1980- )，女，陜西漢中人，主治醫(yī)師。E-mail：maliangliangdy@163.com

方美云，教授，博士生導(dǎo)師。E-mail:fangmeiyun@aliyun.com

R446.6

A

1671-7295(2015)03-0242-04

2015-02-01；

2015-05-07)