尹麗萍 （廣西平樂縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 542400）

農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果初探

尹麗萍 （廣西平樂縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 542400）

本文通過對(duì)農(nóng)村部分散養(yǎng)免疫土雞采血進(jìn)行血凝抑制試驗(yàn)檢測抗體以評(píng)估禽流感抗體水平的高低，探討農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果。結(jié)果表明，總體免疫合格率效價(jià)達(dá)4log2以上，占抽樣樣本的59.65%。

散養(yǎng) 土雞 禽流感 免疫效果 抗體 探討

長期以來農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果檢測得不到重視，沒有農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果的評(píng)估，農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感的免疫注射各級(jí)政府及動(dòng)物防疫部門高度重視，春秋防疫工作要求免疫密度達(dá)到100%。如果一旦發(fā)生雞禽流感疫情，對(duì)農(nóng)村群眾生命健康安全會(huì)造成嚴(yán)重的威脅，同時(shí)也給農(nóng)戶造成了一定的經(jīng)濟(jì)損失，嚴(yán)重影響農(nóng)村散養(yǎng)土雞的發(fā)展，不利于農(nóng)民的增收，因此研究農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果顯得非常有必要，這不僅僅有利于農(nóng)村土雞養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展，而且可以控制雞禽流感疫情在農(nóng)村的發(fā)生。禽流感（Avian Ifluenza，AI）是由正粘病毒科A型流感病毒引起的一種禽類烈性傳染病，雞、火雞、鴨、鶴鶉等家禽及野鳥、水禽、海鳥等均可感染，且對(duì)人類和低等哺乳動(dòng)物也能引起嚴(yán)重的疾病［1］。由于禽流感病毒亞型多，毒株變異大，給本病的防治帶來很大困難，該病被國際獸醫(yī)局（OIE）規(guī)定為A類傳染病。我國也將其列為一類動(dòng)物疫?。?］。禽流感潛伏期一般為3～5d。發(fā)病時(shí)體溫升高43.5～44.5℃。病雞精神沉郁，食欲減退或不食，羽毛蓬亂。鼻腔流出清水樣鼻液，后期鼻腔被黃色干酪樣滲出物堵塞。張口呼吸，單側(cè)或雙側(cè)性眼瞼紅腫。有的眼眶周圍腫脹，成為金魚眼，甚至失明。頭部浮腫，肉垂和頸部腫脹，雞冠肉垂發(fā)黑呈藍(lán)紫色。母雞產(chǎn)蛋明顯減少，有些發(fā)病迅速，看不到任何癥狀就死亡［3］。目前主要是通過注射疫苗來預(yù)防禽流感的發(fā)生，大規(guī)模暴發(fā)禽流感疫情的情況已經(jīng)很難發(fā)生，當(dāng)前主要是以亞臨床的禽流感發(fā)生較多見，典型的雞禽流感基本上不易發(fā)現(xiàn)，H9N2亞型禽流感病毒感染種雞和蛋雞后，盡管雞群不表現(xiàn)出明顯的癥狀。但可造成產(chǎn)蛋率、孵化率顯著下降。病毒感染15～30d齡左右的雛雞時(shí)，病雞則主要表現(xiàn)為有嚴(yán)重的呼吸道癥狀，在氣管又有干酪樣物堵塞，氣管充血、出血，死亡率10%～25%。此外，H9N2亞型禽流感病毒感染后，還會(huì)導(dǎo)致雞群產(chǎn)生一定程度的免疫抑制。使雞群的抵抗力及對(duì)其它疫苗的免疫應(yīng)答能力大大降低，容易繼發(fā)各種疾?。ㄌ貏e是新城疫、傳染性支氣管炎和慢性呼吸道病等）的感染［4］。因此做好禽流感的防控工作對(duì)于預(yù)防其它雞呼吸道疾病意義重大，當(dāng)前由于雞禽流感各種疫苗免疫的時(shí)間不同，產(chǎn)生的免疫力時(shí)間長短也不盡相同，只有通過抗體監(jiān)測才能達(dá)到確切保護(hù)雞免受禽流感的攻擊［5］。當(dāng)前盡管對(duì)雞禽流感進(jìn)行了普遍的強(qiáng)制免疫預(yù)防，但是對(duì)農(nóng)村散養(yǎng)土雞免疫注射效果的檢測評(píng)估還沒有切實(shí)的探究。

1　材料及方法

1.1試驗(yàn)動(dòng)物 分別隨機(jī)抽樣某縣兩個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)10個(gè)村莊每個(gè)村莊抽樣100日齡的土雞200羽，總共2000羽進(jìn)行采血分離血清檢測抗體，采樣土雞均在9日齡、21日齡免疫過禽流感疫苗，全部實(shí)行放養(yǎng)。

1.2抗體檢測方法 按雞禽流感微量血凝抑制（HI）試驗(yàn)法固定抗原倍比稀釋法進(jìn)行，測出備檢雞只的血清HI效價(jià)值。（1）用微量移液器在96孔V型微量反應(yīng)板中，每孔加入生理鹽水50ul，在第一列中每孔加入無菌采取的翼靜脈血清50ul。（2）從第1列至第12列依次倍比稀釋血清，將最后50ul棄去。（3）在每孔中加入所備試驗(yàn)用抗原，置于微量振蕩器上混勻30s左右，置室溫（20～25℃）下20min。（4）在每孔中加入1%紅細(xì)胞懸液501～L，置于微量振蕩器上30s左右，置于室溫（20～25℃）下作用40～60min，觀察結(jié)果。

2　結(jié)果

見附表及附圖。

附表 農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫抗體檢測結(jié)果

附圖 農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫抗體檢測結(jié)果

3　討論

（1）通過對(duì)農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽禽流感抗體檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)免疫抗體合格率偏低，總體免疫合格率抗體效價(jià)達(dá)4 log2以上占抽檢樣本的59.65%。抽檢的10個(gè)村莊中土雞禽流感免疫抗體效價(jià)達(dá)4log2以上超過60%的只有5個(gè)村莊，僅僅占抽檢村莊的50%。顯然農(nóng)村散養(yǎng)土雞禽流感免疫效果非常不理想，因此基層獸醫(yī)工作者在應(yīng)對(duì)農(nóng)村散養(yǎng)土雞預(yù)防禽流感方面的工作必須加強(qiáng)。（2）存在這種情況的原因可能是由于疫苗保存方法存在一定的問題，尤其是農(nóng)村地區(qū)疫苗使用過程中的保溫措施不當(dāng)，在農(nóng)村由于各家各戶散養(yǎng)的雞并不是很多，戶與戶之間又存在一定的距離，疫苗開啟后不能保證及時(shí)用完，造成疫苗失效或者免疫效力降低，造成免疫不可靠影響了有效免疫力的產(chǎn)生。（3）引起禽流感免疫抗體效價(jià)過低也許存在母源抗體的干擾，一定水平的母源抗體具有一定的保護(hù)作用，過早免疫，母源抗體中和了疫苗抗原，免疫效果并不好。首免日齡太小，雞只發(fā)育不完全，對(duì)疫苗應(yīng)答較差，15日齡以前免疫其他疫苗較多，導(dǎo)致免疫無應(yīng)答或者應(yīng)答效果較差，直接影響禽流感疫苗的免疫效果。

4　建議

（1）制定適合農(nóng)村土雞的免疫程序及免疫方法，應(yīng)該在15日齡左右進(jìn)行雞禽流感疫苗免疫，用量保持在2羽份/只，以保證足夠產(chǎn)生免疫抗體的免疫劑量，以保證免疫效果的可靠性，在30日齡進(jìn)行雞禽流感加強(qiáng)二次免疫，用量保持在2羽份/只進(jìn)行肌肉注射，70日齡再用禽流感疫苗苗加強(qiáng)免疫一次。（2）疫苗使用要及時(shí)，最好在1h內(nèi)免疫注射完畢，據(jù)了解有相當(dāng)一部分基層獸醫(yī)工作者在進(jìn)行雞禽流感疫苗免疫時(shí)往往半天才用完稀釋的疫苗，致使疫苗失去效力，造成免疫效果不理想。（3）進(jìn)行疫苗免疫注射后前后5d以上停止使用消毒藥和抗生素類藥物。免疫后2-3d，雞飲水中加入少量脫脂奶粉和黃芪多糖以提高免疫效果。

［1］ 楊萍萍， 崔言順. 禽流感病毒及預(yù)防研究進(jìn)展［J］. 山東畜牧獸醫(yī)，2002（3）： 38-39.

［2］ 黃京燕. 禽流感病毒分子生物學(xué)檢測方法［J］. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展， 2006，27（11）： 108-111.

［3］ Dombovari Z， Molnar B， Bocsi J， et al. Biologic detection methods in the comparison of circulating tumor cells and micrometastases［J］. orv Hetil， 1998， 139（30）： 1793-1797.

［4］ Van Deusen R A，Hinlshwa V S．Micro neuraminidase inhibition assay for cla- ssification of influenza A virus nevrmainidases ［J］．Avian Dis， 1983， 27（3）： 745-750.

［5］ 甘孟侯. 禽流感［M］. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2002.

S828.31

A

1007-1733（2015）06-0014-02