楊立群++王平++梁安蘭

摘要 把草莓的莖尖經(jīng)過滅菌和剝?nèi)∏o尖后接種到含有生長素（IBA）和細(xì)胞分裂素（6-BA）的MS培養(yǎng)基上，在合適的溫度（23～28 ℃）與光照條件（2 000 lx）下每天培養(yǎng)13～15 h，經(jīng)過反復(fù)接種可以快速擴(kuò)繁，再經(jīng)過生根和煉苗就可移栽成原種苗或無病毒苗。

關(guān)鍵詞 草莓；匍匐莖尖；組織培養(yǎng)；快速繁殖

中圖分類號 S668.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1007-5739（2015）12-0108-01

草莓是人類大量栽培的主要漿果植物之一，分布很廣，其總產(chǎn)量在漿果類果樹中僅次于葡萄，居世界第2位。草莓果實(shí)柔軟多汁，含豐富的糖、酸、維生素、礦物質(zhì)，其中VC的含量之多超過桃、李、蘋果、梨等。草莓適于鮮食，也是加工果醬、果酒、果露的重要原料，草莓適應(yīng)性強(qiáng)，南北方都可種植，栽培管理容易，生長周期短，結(jié)果快，成熟早，在調(diào)節(jié)果品市場供應(yīng)上有重要作用。

隨著人們生活水平的提高，對草莓質(zhì)和量的需求也在不斷增長。為此，草莓栽培面積迅速擴(kuò)大，同時(shí)在栽培技術(shù)上也向著一年一茬苗的方式發(fā)展，以確保生產(chǎn)出高品質(zhì)的草莓果實(shí)，也因此亟需提供大量的優(yōu)質(zhì)草莓種苗。通過組織培養(yǎng)可以在短期內(nèi)快速大量繁殖草莓種苗，研究人員在生產(chǎn)中已經(jīng)做了大量的有關(guān)工作，證明組培快繁是切實(shí)可行的。

1 組培材料

1.1 供試草莓材料

選擇生長健壯的草莓匍匐莖尖、單株心莖（各品種都可以）。

1.2 培養(yǎng)基

莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L；繼代增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L；生根培養(yǎng)基為1/2 MS+IBA 0.1 mg/L。

上述培養(yǎng)基均添加3%蔗糖和0.7%瓊脂，pH值5.8～6.3，培養(yǎng)溫度為23～28 ℃，光照時(shí)間為13～15 h/d，光照強(qiáng)度為2 000 lx左右。在每次接種時(shí)，打開超靜態(tài)的同時(shí)，也要打開紫外線燈滅菌20～30 min，可以減少操作造成的污染。

2 組培設(shè)備

建立一個(gè)能提供相對潔凈環(huán)境的組培室，其包括稱量室（櫥柜、電子天平、精確到0.1 g的臺式天平、量筒、燒杯、試管、容量瓶、滴管、藥勺、試紙以及各種組培必需的藥劑等），滅菌室（有高壓蒸汽消毒器、擺放培養(yǎng)瓶的操作臺、培養(yǎng)瓶的封口模），容器清洗室（有自來水、水池、塑料桶、電熱蒸餾水器、燒制培養(yǎng)基的灶具和鍋，接種室（有超凈工作臺、鑷子、剪刀、紫外線燈、小車），培養(yǎng)室（有帶日光燈的培養(yǎng)架，紫外線燈），儲(chǔ)藏室（擺放培養(yǎng)瓶、營養(yǎng)缽等組培所需物品）[1-2]。

3 組培方法

3.1 無菌材料的獲得

到田間尋找第1次種草莓的地塊，露天栽培于5—11月，保護(hù)地栽培可在任意時(shí)間選擇優(yōu)良品種健壯植株的葡匐莖或當(dāng)年形成的幼苗作為建外植體的材料，將草莓匍匐莖帶莖尖的3～5 cm莖段或單株莖心剝掉可見葉，放在自來水下沖洗1 h左右，再放到超凈臺上先用70%～75%酒精處理15～30 s，再用0.1%～0.2% HgCl2消毒3～4 min，然后用無菌水沖洗3～5次，用無菌紙吸干外植體表面的水分[4]。最后在超凈臺上剝?nèi)∏o尖生長點(diǎn)，接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，在剝?nèi)∏o尖時(shí)根據(jù)目的、需要不同，莖尖留取的大小不同，如果要生產(chǎn)無病毒苗，結(jié)合熱處理，莖尖留取0.3～0.5 mm（帶1～2個(gè)葉原基），如果進(jìn)行普通快繁，莖尖留取2.0～3.0 mm。

3.2 分化培養(yǎng)

將莖尖接種在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上的前3 d，有的莖尖在培養(yǎng)基中出現(xiàn)褐化現(xiàn)象，要及時(shí)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)基中。4～5 d后，莖尖開始明顯膨大并不斷分化生長，當(dāng)苗長到3～5 cm時(shí)，就可以將叢生芽分離轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行繼代培養(yǎng)，40～50 d后形成的叢生苗可以繼代也可以接種到生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)，經(jīng)過20 d后可移栽，在繼代增殖培養(yǎng)基上不能培養(yǎng)時(shí)間過長，否則芽苗老化或玻璃化就不能用于繼代。

3.3 移栽

移栽前要進(jìn)行土壤處理，將普通的滅過菌的田園土、腐熟的有機(jī)肥和珍珠巖以4∶1∶1的比例混和均勻，然后分裝在直徑8～10 cm的營養(yǎng)缽內(nèi)。瓶苗移栽前先敞開瓶口煉苗3～4 d，再用鑷子小心地取出帶根草莓苗，用自來水洗凈沾附的培養(yǎng)基，用多菌靈800倍液浸泡5～10 min備用，最后把苗移入營養(yǎng)缽，并用薄塑料膜罩住保濕。前5～7 d適當(dāng)遮蔭并保持80%～90%的相對濕度，以后逐漸放風(fēng)，半月后全部揭掉覆蓋物，就可移入大田了。如果在4—5月移栽，當(dāng)年即可結(jié)果，如果要在大田擴(kuò)繁育苗，就必須摘去花果[6]，其余田間管理與普通的草莓栽培相同。

4 參考文獻(xiàn)

[1] 裘文達(dá).園藝植物組織培養(yǎng)[M].上海：上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，1986.

[2] 葉正文，鄭宏清.草莓栽培實(shí)用技術(shù)[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1997.

[3] 沈克軍.草莓組織培養(yǎng)與快速繁殖[J].蕪湖職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004（3）：83-84.

[4] 梁貴秋，唐燕梅.草莓的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].廣西熱帶農(nóng)業(yè)，2004（6）：8-9.

[5] 潘超，黃文江，張小平，等.草莓的組織培養(yǎng)與快速繁殖研究[J].生物學(xué)雜志，2005（2）：27-29.

[6] 盛紅萍，申屠年.草莓的組織培養(yǎng)和快速繁殖[J].蔬菜，2001（8）：15-16.endprint