段雪磊,馬奎紅,包永占*,史萬玉*
(河北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,保定071000)
刺五加(RadixAcanthopanacisSenticosl)為五加科五加屬植物的根與根莖,別名五加皮,性溫、味辛、微苦,歸脾、腎、心經(jīng),具有益氣健脾、補(bǔ)腎安神之功效[1]。史載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,被列為本經(jīng)上品。有研究報(bào)道,刺五加具有多種生物活性,是理想的免疫增強(qiáng)劑;還有研究報(bào)道,刺五加可調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能,不僅可以直接消除自由基,而且可降低細(xì)胞膜上脂質(zhì)過氧化作用,因而具有抗衰老的功效;刺五加還含有動(dòng)物機(jī)體所需的微量元素及氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可促進(jìn)食欲,并提高動(dòng)物機(jī)體的免疫力[2-4]。
免疫器官包括中樞免疫器官(胸腺、骨髓或法氏囊(禽類)),外周免疫器官(脾臟和消化道、呼吸道、泌尿生殖道的淋巴結(jié)),免疫器官是動(dòng)物機(jī)體發(fā)揮免疫功能的器官或組織,其發(fā)育狀況直接影響機(jī)體的免疫力。
刺五加對(duì)動(dòng)物免疫器官的作用表現(xiàn)為胸腺、脾臟、法氏囊重量的增加等。黃秀蘭等[5]研究發(fā)現(xiàn),刺五加能夠不同程度的增加小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)的重量、脾臟白髓總體積、細(xì)胞數(shù)目和淋巴結(jié)皮質(zhì)總體積。袁學(xué)千等[6]使用環(huán)磷酰胺(100mg/kg)造出小鼠免疫抑制模型,發(fā)現(xiàn)僅僅使用刺五加多糖就能明顯增強(qiáng)小鼠脾臟和腸系膜淋巴結(jié)的數(shù)目,增加脾臟白髓總體積和淋巴結(jié)皮質(zhì)總體積,再次證明了刺五加可明顯增加動(dòng)物的免疫器官指數(shù)。王洪連等[7]把從刺五加根莖中分離的均一性多糖(PES—A、PES—B)和水溶性多糖(PES—W)飼喂小鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加可以刺激小鼠胸腺增大,其中均一性多糖PES—B的效果最明顯。
骨髓造血、干細(xì)胞是多功能的造血干細(xì)胞,其分化過程就是各種細(xì)胞成熟的過程。又因免疫細(xì)胞均為血細(xì)胞,所以骨髓造血干細(xì)胞有助于增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。
刺五加能增加止常動(dòng)物機(jī)體紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白數(shù)量,可保護(hù)環(huán)磷酰胺引起的白細(xì)胞減少癥,作用與50mg/kg維生系B4一樣[8]。刺五加可修復(fù)小鼠因放射損傷的骨髓造血管,保護(hù)骨髓造血微環(huán)境,增加骨髓中毛細(xì)動(dòng)脈根數(shù)、骨髓造血組織容量、外周血紅細(xì)胞、白細(xì)胞的數(shù)量,降低骨髓中血紅蛋白含量[9-10]。潘玉華等[11]研究報(bào)道,刺五加有增強(qiáng)骨髓造血功能,對(duì)正常小鼠有升高紅血球及血色素的作用,對(duì)白細(xì)胞減少有升高作用。
吞噬細(xì)胞是機(jī)體重要的免疫細(xì)胞,在抗感染和抗腫瘤等方面發(fā)揮著重要的作用,能夠通過處理抗原和釋放可溶性因子來調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能。
丁爾成[12]通過系統(tǒng)研究刺五加與氯喹合用對(duì)氯喹引起機(jī)體免疫抑制的影響,發(fā)現(xiàn)刺五加能夠增強(qiáng)瘧鼠單核巨噬系統(tǒng)和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能。Steinmann等[13]研究刺五加及提取物的免疫學(xué),證明刺五加乙醇提取物能夠增強(qiáng)腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬功能及增加正常(荷瘤)小鼠的巨噬細(xì)胞數(shù)量 有研究報(bào)道,刺五加能增強(qiáng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力,促使玫瑰花結(jié)百分率提高1.2-1.8倍[14]。戎愛群等[15]研究發(fā)現(xiàn),給昆明種小鼠按高中低劑量灌服復(fù)方刺五加2W后,腹腔注射20%雞紅細(xì)胞懸液1m1,30min后頸椎脫臼處死,結(jié)果顯示刺五加各劑量組對(duì)單核巨噬細(xì)胞功能具有明顯的促進(jìn)作用;給每組10只小鼠灌服上述同劑量的刺五加2W 后,尾靜脈注射0.1ml/10g體重,結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加能提高小鼠對(duì)血中碳粒膠體廓清速度,尤其以高劑量作用更明顯。
細(xì)胞因子是免疫細(xì)胞和某些非免疫細(xì)胞經(jīng)刺激產(chǎn)生而合成分泌的低分子量可溶性蛋白質(zhì).包括白細(xì)胞介素、干擾素、集落刺激因子等,具有參與免疫應(yīng)答、調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、分化和效應(yīng)等功能。
楊吉成[16]發(fā)現(xiàn),刺五加多糖及其苷B,D和E具有促誘生干擾素的能力。有報(bào)道表明ASPS組對(duì)IFN-α 和γ-IFN誘生能力比常規(guī)組顯著提高,γ-IFN效價(jià)比常規(guī)組提高6倍,而IFN-α 效價(jià)提高5倍[17]。采用ASPS誘導(dǎo)小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IL-2的作用存在劑量依賴關(guān)系,劑量為5-40mg/L時(shí)均可誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-2;當(dāng)劑量在40mg/L時(shí),其作用明顯下降;在80mg/L時(shí),對(duì)脾細(xì)胞產(chǎn)生IL一2的作用消失,出現(xiàn)該現(xiàn)象的原因有待于進(jìn)一步研究[18]。另有報(bào)道刺五加多糖還能增強(qiáng)CTL?;钚院蚦onA刺激小鼠脾細(xì)胞產(chǎn)生IL-2[14]。楊一清等[20]研究報(bào)道,給小鼠使用黃芩刺五加復(fù)合制劑或單一制劑,結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加均能促進(jìn)小鼠體內(nèi)NK、TNF和IL-2的產(chǎn)生。黃德彬等[21]報(bào)道,給小鼠連續(xù)注射刺五加注射液5d后,發(fā)現(xiàn)刺五加可誘生小鼠產(chǎn)生腫瘤壞死因子TNF—α,且對(duì)多種靶細(xì)胞有顯著的殺傷作用。
腫瘤是危害機(jī)體健康的一類惡性疾病。中草藥具有抗腫瘤的作用,其作用是多環(huán)節(jié)、多途徑、多靶點(diǎn)的,且不良反應(yīng)較小。中草藥抗腫瘤近年來受到廣泛關(guān)注和研究。
蔡寧等[22]采用含藥血清方法處理小鼠腫瘤細(xì)胞HT29,U937和A549,結(jié)果顯示5-80g/kg含藥血清對(duì)各腫瘤株細(xì)胞均有明顯抑制作用,且與劑量成正相關(guān)。張敬一等[23]研究報(bào)道,刺五加有抑制腫瘤生長(zhǎng),在試驗(yàn)性肺癌侵襲轉(zhuǎn)移過程中顯示出了一定的干預(yù)作用。葉紅軍等[24]研究表明,Ass通過促使胃癌細(xì)胞的Ca2+內(nèi)流,誘導(dǎo)SGC790I胃癌細(xì)胞凋亡,隨著時(shí)間的增加和劑量的加大,誘發(fā)凋亡作用增強(qiáng)。HibasamiI等[25]研究發(fā)現(xiàn)刺五加水提物可以抑制胃癌KATOIII細(xì)胞的生長(zhǎng)。另有報(bào)道,刺五加皮水提物可以顯著抑制colon26一M3.1腺癌細(xì)胞的肺轉(zhuǎn)移,其作用可能與活化NK細(xì)胞和巨噬細(xì)胞有關(guān)[26]。
體液免疫是由B細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答,是由B細(xì)胞通過對(duì)抗原的識(shí)別、活化、增殖,最后分化成漿細(xì)胞并分泌抗體來實(shí)現(xiàn)。體液免疫是動(dòng)物機(jī)體產(chǎn)生抗體的能力,對(duì)動(dòng)物抵抗疾病具有重要防御功能,通常通過測(cè)定血清免疫球蛋白的含量來反應(yīng)這種功能。
許世凱[27]等研究報(bào)道,給LACA系小鼠腹腔注射不同劑量的刺五加多糖(ASPS),于不同時(shí)間段分別給0.2mI5%綿羊紅細(xì)胞(SRBC)于腹腔免疫IgM和IgG的溶血空斑試驗(yàn)(PFC),結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加多糖能夠促進(jìn)機(jī)體分泌免疫球蛋白IgG和IgM。將刺五加浸膏(生藥)10g/kg灌胃于注射有肺炎雙球菌的家兔和腦膜炎雙球菌的豚鼠,結(jié)果發(fā)現(xiàn)刺五加能促進(jìn)機(jī)體產(chǎn)生抗體[28]。林秋葉等[29]采用腹腔注射LACA系小鼠ASPS,結(jié)果發(fā)現(xiàn)小鼠脾細(xì)胞分泌IgM的PFC有所增加時(shí)ASS注射量為125mg/kg,而使小鼠脾細(xì)胞分泌IgG的PFC顯著降低的ASS注射劑量為100mg/kg。Han等[20]發(fā)現(xiàn)刺五加組織培養(yǎng)的果實(shí)中分離的均一化多糖可增加小鼠機(jī)體免疫球蛋白M的B細(xì)胞數(shù)量。
細(xì)胞免疫主要由T細(xì)胞介導(dǎo),在特異性免疫應(yīng)答中起關(guān)鍵作用。中草藥對(duì)活化的T細(xì)胞有促進(jìn)增值用,可通過促有絲分裂作用,調(diào)控T細(xì)胞功能,從而發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。
把刺五加多糖分25、50、100mg/kg3個(gè)劑量給小鼠灌胃,連續(xù)7d,結(jié)果顯示,與對(duì)照組(灌服鹽水)相比,刺五加多糖各劑量均可極顯著提高小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率(P<0.01);小鼠脾指數(shù)均極顯著增加 (P<0.01);高劑量組小鼠CD3+CD4+/CD3+CD8+比值極顯著提高P 刺五加廣泛分布于俄羅斯遠(yuǎn)東的針葉林一帶,日本和朝鮮的北方地區(qū),在中國主要是生長(zhǎng)在東北、河北和山西等地,其中中國東北是刺五加的主要產(chǎn)地[34]。刺五加栽植技術(shù)簡(jiǎn)便,周期短、見效快、產(chǎn)量高、效益好,優(yōu)勢(shì)明顯,市場(chǎng)前景廣闊[35]。刺五加中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和生物活性物質(zhì),對(duì)動(dòng)物機(jī)體的免疫作用起著積極地作用,是一種珍貴的藥用植物。因此,應(yīng)大力開展對(duì)刺五加的開發(fā)利用,發(fā)揮其經(jīng)濟(jì)效益、生態(tài)效益和社會(huì)效益。 , [1]國家藥典委員會(huì),中華人民共和國藥典[M]一部.化學(xué)工業(yè)出版社.2005:143一144. [2]李芙蓉,呂博.刺五加多糖的微波提取及含量測(cè)定[J].新疆中醫(yī)藥.2003,2l(01):11一12. [3]張濤,樸俊虹,袁蕾,等.刺_五加化學(xué)成分及自由基清除活性研究[J].2012,06(43):1057一1060. [4]魏鳳仙,陳亮,胡驍飛,等.刺五加提取物在飼料中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2010(09):138-140. [5]黃秀蘭,朱家媛,胡宏.刺五加增強(qiáng)小鼠免疫功能的作用[J].四川師范學(xué)院學(xué)報(bào)(白然科學(xué)版),1998,19(02):20].一203. [6]袁學(xué)干,王淑梅,高權(quán)國.刺五加多糖增強(qiáng)小鼠免疫功能的實(shí)驗(yàn)研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2004,32(04):48—49. [7]王洪連,明光君,譚琦玲,等.剌五加活性成分提取與保健功能及其在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用[J].吉林畜牧獸醫(yī),2007,28(12):1 7一19. [8]王曉光.淺析刺五加的藥理作用及其臨床應(yīng)用[J].中國醫(yī)藥指南,2014,12(30):27 l一272. [9]陶明飛,楊衛(wèi)東,王俊和.刺五加注射液對(duì)放射損傷小鼠骨髓造血微環(huán)境的保護(hù)作用[J].南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2004,20(3):175—177. [10]陶明飛,楊衛(wèi)東,王俊和.刺五加對(duì)放射損傷骨髓微血管的保護(hù)作用[J].中國公共衛(wèi)生,2004,20(6):683—685. [11]潘玉華,陳晨,李波.刺五加藥理作用分析[J].公企分刊,2010,23(03):75—76. [12]丁爾成,張學(xué)敏,陳賜福.中草藥非特異性免疫作用在抗瘧療效中的意義[J].福建中醫(yī)藥,1989,20(01):45-46. [13]Steinmann GG,Esperseter A,JollerP.Immunopharmacologica in vitroeffectsof Eleutherococcur senticosusextracts[J].Znein Forsh Res,2001,51(1):76-83. [14]郭愛民.刺五加的現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用,2009,53(10):194. [15]戎愛群,江年.復(fù)方刺五加對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].中草藥,2009,31(10):1628—1629. [16]楊吉成.多糖類及刺五加苷類的干擾素促誘生效應(yīng)[J].中草藥,1990,21(01):27. [17]錢農(nóng),楊吉成,盛偉華,等.人參多糖及其皂苷等5種中藥提取物促誘生人干擾素的研究[J].蘇州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),1997:17(01):31-33. [18] 謝蜀生,呂秀鳳,秦鳳華,等.刺五加多糖免疫調(diào)節(jié)機(jī)理初探[J]中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志,1989,09(03):153—155. [19]佟麗,黃添友,吳波,等.三種植物多糖對(duì)脾細(xì)胞產(chǎn)生IL一2的影響[J].中國藥理學(xué)通報(bào),1994,10(06):473—474. [20]楊一清,畢愛華,王立人,等.黃芪刺五加合劑對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)[J].同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),1998,27(01):62. [21]黃德彬,冉瑞智,余昭芬.刺五加注射液對(duì)小鼠腫瘤壞死因子的誘生作用[J].2004,2l(01):29—31. [22]蔡寧,陳冰,余紹蕾,等.刺五加提取物含藥血清抗腫瘤作用的研究[J].2006,40(01):58—59. [23]張敬一,許順江,楊慧敏,等.刺五加抗癌作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用腫瘤學(xué)雜志,2004,18(06):422—427. [24]葉紅軍,吳遠(yuǎn),房家智,等.刺五加皂甙對(duì)胃癌細(xì)胞膜電位和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的影響[J].中華消化雜志,2002,22(1):48. [25]HibasamiH,F(xiàn)u jikawa T,Nishibe S,etal.Induction 0f a.poptosisby A can thopanaxsenticosus HARMSand its component,sesamin in human stomach cancer KATO IIIcells[J]OncolRep,2000,7(6):1213—1216. [26]Yoon TJ,Y 00YC,Lee SW,etal.Anti—metastatic activityofAcanthopanax senticosusex tractand its possible immunologicalmechanism ofaction[J].J Ethnopharm,2004,93(2/3):247—253. [27]林秋葉,李龍華,金禮吉,等.刺五加化學(xué)成分及其藥理作用研究進(jìn)展[J].中獸醫(yī)醫(yī)雜志2009(2):26—27. [28]許世凱.刺五加多糖(ASPS)對(duì)小鼠免疫功能的影響[J].中成藥,1990,12(03):25—26. [29]黑龍江省祖國醫(yī)藥研究所.青核桃及刺五加抗癌作用的藥理研究[J].中草藥,1980,11(07):313. [30]HANSB,YOONYD,AHNH J,eta1.Tol卜1ike receptormediated activation of B celIs and macrophages by polysaccharide isolated from cell culture of Acanthopanaxsenticosus [J]. International lmmunopharmac010gy,2003,3(9):1301—1312. [31]羅強(qiáng),任鴻,孫黎,等.刺五加多糖對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率及外周血淋巴細(xì)胞亞群的影響[J].河南農(nóng)業(yè)科學(xué),2013,42(08):137—140. [32]程秀娟.刺五加多糖的抗腫瘤作用及免疫作用[J].癌癥,1981,03(03):119. [33]孟繁磊,陳瑞戰(zhàn),魏春雁,等.剌五加葉多糖的分離純化及免疫活性研究[J].特產(chǎn)研究,2011(1):12—15. [34]賈繼明,王宏濤,王宗權(quán)等.刺五加的藥理活性研究進(jìn)展[J].中國現(xiàn)代中藥,2010,12(2):7-9. [35]陳思,孫春玉,王義.藥用植物刺五加研究進(jìn)展[J].園藝與種苗,2011(4):108—111.