龔 婭，段德令，何宗忠，王曉冬，史秋霞，林林東，歐煒華（廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院157分院檢驗(yàn)科，廣州 510510）

支原體是目前所知在無(wú)生命培養(yǎng)基上生長(zhǎng)繁殖的最小微生物，其對(duì)呼吸道和泌尿生殖道有天然親和力。解脲支原體（Uu）和人型支原體（Mh）是生殖道感染最常見(jiàn)的2種病原體［1］。生殖道支原體的感染率居高不下，加上抗菌藥物的不合理使用，新的耐藥菌株不斷增加，嚴(yán)重影響了人類(lèi)健康。為了解本地區(qū)支原體感染狀況及藥敏情況，指導(dǎo)臨床合理用藥及預(yù)防耐藥株的產(chǎn)生，現(xiàn)對(duì)2008年1月至2014年6月來(lái)本院就診的19530例患者的送檢標(biāo)本進(jìn)行支原體培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗(yàn)，分析藥敏結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2008年1月至2014年6月來(lái)本院泌尿外科及婦科就診的泌尿生殖道感染患者共19530例，年齡15～72歲，平均30.3歲。標(biāo)本采集后要立即送檢，30min內(nèi)接種。男性：棉拭子深入尿道內(nèi)口2.0～2.5cm處，旋轉(zhuǎn)并停留30s后取出置于無(wú)菌試管內(nèi)。女性：采用脫脂棉簽深入宮頸內(nèi)口1.0～2.0cm處旋轉(zhuǎn)并停留30s，采集單層柱狀上皮細(xì)胞，避免觸及陰道壁。

1.2 方法 支原體鑒定、藥敏試劑盒購(gòu)自珠海市麗拓發(fā)展有限公司；12種抗菌藥物：四環(huán)素、氧氟沙星、紅霉素、強(qiáng)力霉素、交沙霉素、司帕沙星、羅紅霉素、米諾環(huán)素、左氧氟沙星、克拉霉素、阿奇霉素、諾氟沙星，2個(gè)濃度梯度。嚴(yán)格按照檢測(cè)說(shuō)明書(shū)的操作規(guī)程進(jìn)行操作。對(duì)混濁生長(zhǎng)變紅的結(jié)果不報(bào)告，重新采集標(biāo)本復(fù)查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS16.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 支原體培養(yǎng)結(jié)果 19530例送檢樣本支原體陽(yáng)性11178例，陽(yáng)性率為57.24%。其中有10557例做了藥敏試驗(yàn)。女性支原體陽(yáng)性率明顯高于男性，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見(jiàn)表1；各年度支原體陽(yáng)性率見(jiàn)表2。

表1 支原體感染陽(yáng)性率［n（%）］

2.2 支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果 10557例支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果中，支原體對(duì)交沙霉素、強(qiáng)力霉素、米諾環(huán)素、克拉霉素敏感率較高，分別為88.57%、84.32%、76.09%、71.53%，對(duì)喹諾酮類(lèi)抗菌藥物耐藥率較高。Uu感染組中，耐藥率最高的是諾氟沙星（87.02%），其次是氧氟沙星（60.19%）；Mh感染組中，耐藥率較高的前3位是紅霉素（90.00%）、阿奇霉素（85.71%）、羅紅霉素（80.00%）；Uu＋Mh混合感染組中，有6種抗菌藥物的耐藥率均達(dá)80.00%以上，且對(duì)12種抗菌藥物的耐藥率普遍高于Uu和Mh組。見(jiàn)表3。

表2 2008～2014年支原體感染陽(yáng)性率［n（%）］

表3 10557例支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果（%）

2.3 支原體耐藥情況 10557例支原體藥敏試驗(yàn)結(jié)果中，87.99%的菌株對(duì)2種及2種以上抗菌藥物耐藥，說(shuō)明支原體多重耐藥嚴(yán)重。Uu、Mh、Uu＋Mh對(duì)抗菌藥物耐藥種數(shù)呈遞增趨勢(shì)，Uu感染組中，耐藥種數(shù)為3種占比最高（17.19%），且61.74%菌株耐藥種數(shù)為2～5種；Mh感染組中，對(duì)4種抗菌藥物耐藥的比例最高（21.43%），耐4～8種抗菌藥物的菌株占75.72%；Uu＋Mh混合感染組中，占比最高的耐藥種數(shù)是8種（28.34%），對(duì)6～9種抗菌藥物耐藥的比例達(dá)73.78%，且有101例（4.36%）全耐藥株。見(jiàn)表4。

表4 支原體耐藥情況 ［n（%）］

3 討 論

Uu、Mh多定居于男女性泌尿生殖道內(nèi)，當(dāng)機(jī)體免疫力低下或黏膜受損時(shí)，寄居的支原體屬常發(fā)展成致病原，引起尿道炎、宮頸炎、前列腺炎、輸卵管炎等疾病，妊娠婦女還可通過(guò)感染羊水、陰道分娩等方式引發(fā)新生兒感染［2］。支原體感染陽(yáng)性率各地報(bào)道不一［3－6］，可能與檢測(cè)方法、研究人群及地區(qū)差異有關(guān)。本研究結(jié)果顯示支原體培養(yǎng)陽(yáng)性率為57.24%，與汪洪等［7］報(bào)道的56.40%接近；生殖道支原體感染以Uu單一感染最為常見(jiàn)，其次為Uu＋Mh混合感染，單一Mh感染較少，與國(guó)內(nèi)文獻(xiàn)報(bào)道一致［8－9］。Mh不易單獨(dú)感染，易合并Uu感染，這可能與Uu提供了Mh的易感環(huán)境有關(guān)［10］。本研究顯示，女性感染率明顯高于男性，可能原因?yàn)椋海?）男女生殖器局部微環(huán)境不同所致，女性泌尿生殖道的內(nèi)環(huán)境和pH值更有利于支原體寄生于黏膜表面［11］。（2）女性感染者癥狀較男性感染者輕，發(fā)現(xiàn)較晚，易反復(fù)感染。（3）男女生理結(jié)構(gòu)差異及生殖道血液循環(huán)不同，相同劑量的抗菌藥物到達(dá)局部的血藥濃度不同而造成治療上的差異［12］。2008～2014年支原體陽(yáng)性率總體呈上升趨勢(shì)，可能與以下因素有關(guān)：（1）支原體感染的患者癥狀輕微或無(wú)癥狀而常被忽視，易在男女間引起交叉感染。（2）近年來(lái)抗菌藥物的濫用，加大了耐藥株的產(chǎn)生，造成支原體的反復(fù)感染。

支原體是一種缺乏細(xì)胞壁的原核型微生物，對(duì)青霉素類(lèi)和頭孢菌素類(lèi)抗菌藥物天然耐藥，臨床常用干擾蛋白質(zhì)合成的藥物，如大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)等進(jìn)行治療，但支原體感染常常癥狀遷延，反復(fù)發(fā)作，常規(guī)抗菌藥物療效不理想，故支原體培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床合理用藥具有重要參考意義。本研究顯示交沙霉素、強(qiáng)力霉素、米諾環(huán)素、克拉霉素是治療支原體感染的首選藥物，氧氟沙星、諾氟沙星對(duì)治療基本無(wú)效；四環(huán)素類(lèi)抗菌藥物的耐藥率低，與相關(guān)報(bào)道基本一致［13］。喹諾酮類(lèi)抗菌藥物耐藥率最高，不適合作為支原體感染治療的常用藥物，喹諾酮類(lèi)藥物是通過(guò)作用于DNA促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ，阻斷支原體DNA復(fù)制而發(fā)揮作用。支原體對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物的耐藥機(jī)制以編碼DNA促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ的GyrA、ParC基因突變導(dǎo)致靶酶結(jié)構(gòu)改變?yōu)橹鳎部赡芘c生物膜的形成及細(xì)菌外派泵系統(tǒng)的存在有關(guān)［14］，抑或還有基因重排機(jī)制及環(huán)境因素假說(shuō)等非抗菌藥物作用位點(diǎn)改變的機(jī)制等［15］，其更多耐藥機(jī)制還有待深入研究；喹諾酮類(lèi)抗菌藥物的高耐藥性，提示臨床應(yīng)減少使用喹諾酮類(lèi)抗菌藥物治療支原體感染，但支原體對(duì)同一類(lèi)藥物中的不同抗菌藥物耐藥率不同，同一種抗菌藥物對(duì)不同感染類(lèi)型的耐藥率亦不同，因此宜根據(jù)藥敏具體結(jié)果選用藥物。本研究顯示，Uu＋Mh混合感染的耐藥率高于單一感染者，且多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，通過(guò)分析支原體對(duì)12種抗菌藥物的耐藥狀況，發(fā)現(xiàn)不同感染類(lèi)型發(fā)生多重耐藥情況存在差別，Uu、Mh、Uu＋Mh對(duì)抗菌藥物耐藥種數(shù)呈遞增趨勢(shì)，Uu耐藥種數(shù)多為2～5種，Mh則集中在4～8種，而Uu＋Mh對(duì)6～9種抗菌藥物耐藥的比例達(dá)73.78%，值得注意的是，藥敏結(jié)果中有103例對(duì)12種抗菌藥物全部耐藥，且在這全耐藥株中，101例出現(xiàn)在Uu＋Mh混合感染組，可能是混合感染時(shí)多種耐藥機(jī)制同時(shí)發(fā)揮作用導(dǎo)致交叉耐藥而產(chǎn)生更高的耐藥率。

總之，不同地域、不同時(shí)間、不同支原體感染類(lèi)型其耐藥性存在較大差異，因此一定要結(jié)合藥敏結(jié)果合理用藥，足量足療程，提高治療效果，減少耐藥株的進(jìn)一步產(chǎn)生。

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