摘 要 用揮發(fā)油提取器提取揮發(fā)油，利用氣相色譜分析各化學(xué)成分含量，測(cè)定白千層二次扦插苗在移栽過程中精油的得油率和茶樹油質(zhì)量的變化，并對(duì)比兩次扦插的枝葉有效生物量和精油產(chǎn)量。結(jié)果表明，二次扦插繁殖后種植的白千層提取的精油基本保持初選優(yōu)株的品質(zhì)，各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到ISO 4730：2004標(biāo)準(zhǔn)，但枝葉有效生物量和精油產(chǎn)量有所降低，這需要在白千層生長(zhǎng)過程中加強(qiáng)管護(hù)。

關(guān)鍵詞 茶樹油 ；白千層 ；二次扦插

分類號(hào) S722.7 ；TQ654+.2

Abstract During the course of cultivation from the second cutting seedlings，tea tree oil was extracted by Volatile oil extractor and its relative contents of chemical compositions were analyzed by GC. Effective biomass of superior individual and tea tree oil weight was measured after cutting seedlings.The results showed the tea tree oil maintained the primary quality and the index was to ISO4730： 2004 standard，but effective biomass of superior individual and tea tree oil weight was lower than the first cutting seedlings. It is necessary to strengthen management in the course of Myrlaceaca growth.

Keywords tea tree oil ； Melaleuca ； the second cutting seedlings

茶樹油是利用互葉，輪葉，散花白千層以及其他種類的白千層的葉和枝進(jìn)行水蒸汽蒸餾得到的符合ISO 4730：2004標(biāo)準(zhǔn)要求的精油，是市場(chǎng)上利用最多的白千層油。由于它具有明顯的廣譜殺菌和抗菌作用，被廣泛應(yīng)用于制藥、日化、食品、香料等行業(yè)。茶樹油的原料白千層芳香油樹自20世紀(jì)90年代引入我國(guó)，目前在國(guó)內(nèi)形成了一定的規(guī)模[1]。但是引進(jìn)的白千層種子價(jià)格不斷上揚(yáng)，制約了白千層發(fā)展，國(guó)內(nèi)學(xué)者開始研究扦插和組培繁殖培育[2-3]苗木。梁忠云等[4]研究了一次扦插苗在栽培過程中，白千層枝葉所含的精油主要指標(biāo)達(dá)到ISO 4730：2004標(biāo)準(zhǔn)，而二次扦插苗是否有相同的結(jié)果未見報(bào)道。本試驗(yàn)通過對(duì)二次扦插繁殖后種植的白千層植株枝葉所含精油主要指標(biāo)測(cè)定，驗(yàn)證扦插繁殖對(duì)精油質(zhì)量的影響，解決白千層種苗繁殖方式的問題。

1 材料與方法

1.1 材料

白千層：從澳大利亞引進(jìn)種子繁育，種植在廣西欽州市林科所4～5年生白千層林地，經(jīng)初選確定為優(yōu)株的28#，一次扦插成活幼苗移栽，2年生。

1.2 方法

1.2.1 二次扦插

按照文獻(xiàn)[5]方法，2012年4月剪取萌芽條，浸蘸ABT生根粉插到已澆透水的紅心土基質(zhì)中，定期管護(hù)成活的幼苗。

1.2.2 栽培

2013年2月將扦插成活的幼苗移栽，進(jìn)行定期撫育。

1.2.3 枝葉含油率和精油質(zhì)量的測(cè)定

2013年12月（10個(gè)月）， 2014年12月（22個(gè)月）取移栽成活的白千層枝葉，采集除去大于1 cm枝干的枝葉（有效生物量），測(cè)定含油率和精油成分。

1.2.3.1 含油率的測(cè)定

將采集的枝葉切成1～2 cm的長(zhǎng)段，裝入2 000 mL的圓底燒瓶，加水適量，按《中華人民共和國(guó)藥典》2005年版一部附錄XD中揮發(fā)油測(cè)定法甲法水蒸汽蒸餾法[6]測(cè)定，按照以下公式計(jì)算：

得油率（%）=W1/W×100，式中：W1為精油重量（g），W為枝葉重量（g）

1.2.3.2 精油化學(xué)成分的定性定量分析

參照氣-質(zhì)聯(lián)用的定性分析和梁忠云結(jié)果[7]，并按照ISO4730：2004標(biāo)準(zhǔn)[8]確定白千層油主要的化學(xué)成分，氣相色譜法進(jìn)行分析，確定各組分的含量。

GC定量分析條件：Agilent7890A氣相色譜儀。彈性石英毛細(xì)管柱AT35（60 m×0.25 mm×0.25 μm），載氣為氮?dú)?，程序升溫?0 ℃（1 min），以5℃/min升至150℃，以10℃/min升至220℃，保持5 min。進(jìn)樣口250℃，汽化室250℃，分流比1∶50。進(jìn)樣量0.3 μL。

1.2.4 精油旋光度的測(cè)定

按照ISO 4730：2004標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同時(shí)期枝葉得油率和有效生物量

從表1看，白千層二次扦插苗在栽培10個(gè)月，22個(gè)月后枝葉得油率與初選的5年生的優(yōu)株（1.52%）差距較大，這可能與植株生長(zhǎng)有關(guān)，需要一定的生長(zhǎng)才趨于穩(wěn)定；這一規(guī)律與一次扦插苗[4]相似。在實(shí)際生產(chǎn)中，作為芳香油樹種的白千層至少每年砍伐加工精油一次，屬超短周期植物，得油率低會(huì)使生產(chǎn)成本增加，這是繁殖種植過程中迫切需要解決的問題。有研究表明，短周期持久經(jīng)營(yíng)是引起地力衰退的原因之一[9]。引入固氮樹種或肥土植物與之混種或輪作可顯著維持或改善地力。因此，白千層生長(zhǎng)過程中需要撫育管護(hù)。兩次扦插苗測(cè)定結(jié)果表明，在同一段時(shí)間內(nèi)，二次扦插苗有效生物量和精油總量較第一次扦插有所降低，是否通過改變?cè)耘喾绞浇鉀Q這一問題有待研究。

2.2 不同時(shí)期茶樹油質(zhì)量指標(biāo)

從表2來(lái)看，白千層二次扦插苗在種植過程中，其枝葉精油各項(xiàng)理化指標(biāo)及成分均達(dá)到ISO 4730：2004和國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 26514-2011[10]的要求。精油的特征組分1，8-桉葉素含量基本穩(wěn)定，4-松油醇含量略有增長(zhǎng)的趨勢(shì)；理化指標(biāo)中旋光度沒有下降至+5°，沒出現(xiàn)文獻(xiàn)[11]報(bào)道的旋光由正變?yōu)樨?fù)的現(xiàn)象，說(shuō)明本試驗(yàn)二次扦插沒有影響茶樹油的質(zhì)量，同時(shí)也說(shuō)明扦插繁殖苗在短時(shí)間內(nèi)（1～2年）不影響精油質(zhì)量。但試驗(yàn)采用2年生的扦插苗進(jìn)行扦插，而采用不同時(shí)間的扦插苗進(jìn)行扦插是否會(huì)影有響有待進(jìn)一步研究。

2.3 植物來(lái)源是保證精油品質(zhì)的先決條件

在不影響精油質(zhì)量的情況下，可選擇扦插，組培等方式對(duì)原料進(jìn)行擴(kuò)繁。而影響茶樹油質(zhì)量和產(chǎn)量的因素是多方面的，其中原料繁殖只是其中的一個(gè)因素，其它因素如白千層的品種選擇，栽培模式，施肥等等，需要進(jìn)一步研究。只有不斷監(jiān)測(cè)白千層種植過程中精油的變化，才能選擇更好的栽培方案。

3 結(jié)論

白千層二次扦插苗在種植過程中，精油質(zhì)量達(dá)到ISO 4730：2004標(biāo)準(zhǔn)，但得油率和精油總量較一次扦插有所降低，需要加強(qiáng)撫育管護(hù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 張孝祺，白懋嘉. 我國(guó)互葉白千層（精）油的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)[J]. 廣東化工，20011，38（4）：3-14，11.

[2] 陳碧華，吳麗君，李乾振，等. 互葉白千層研究進(jìn)展[J]. 福建林業(yè)科技，2010，37（4）：177-182.

[3] 李恒樹，黃耀恒.互葉白千層的栽培技術(shù)[J]. 廣西林業(yè)科學(xué)，2007，36（3）：156-157.

[4] 梁忠云，蔡 林，李桂珍，等. 白千層扦插苗栽培過程中枝葉揮發(fā)油的變化[J].香料香精化妝品，2013（5）：1～3.

[5] 常新民，梁忠云. 4-松油醇型白千層優(yōu)良單株扦插繁殖試驗(yàn)研究[J]. 林業(yè)實(shí)用技術(shù)，2013（6）：30-32.

[6] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部[S]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社.2005版附錄X D.Ⅵ.R.

[7] 梁忠云，劉 虹，陳海燕，等. 不同工藝生產(chǎn)茶樹油產(chǎn)品質(zhì)量的研究[J]. 林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2009，29（1）：107-109.

[8] 國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO4730：2004 Oil of Melaleuca，Terpinen-4-ol type[S].

[9] 徐化成. 關(guān)于人工林地力下降問題[J]. 世界林業(yè)研究，1992（1）：66-71.

[10] 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 26514-2011互葉白千層（精）油，4-松油烯醇型[茶樹（精）油][S].

[11] 張孝祺，白懋嘉，黃少烈. 栽培環(huán)境對(duì)互葉白千層油旋光方向變化的影響初報(bào)[J]. 廣東化工，2009，36（12）：100-101.