凌顯楨 莫麗莎

宜州市新生兒臍血血紅蛋白電泳結果分析

凌顯楨 莫麗莎

目的 了解宜州市新生兒地中海貧血的發(fā)生率，探討新生兒臍血篩查地中海貧血的意義，為臨床診斷及預防提供依據(jù)。方法 采用美國Helena SPIFE 3000全自動血紅蛋白電泳儀對1413份新生兒臍血標本進行瓊脂糖凝膠蛋白電泳，并對Hb區(qū)帶進行掃描定量分析。結果 在1413份臍血標本中共檢出Hb Bart's陽性（≥1.0%）187例，陽性率13.23%。其中靜止型96例、標準型86例、中間型4例、重型1例，陽性率分別為6.794%、6.086%、0.283%、0.071%。另外發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病2例，發(fā)生率為0.142%，其中HbD 1例，可疑β-地中海貧血1例。結論 使用全自動血紅蛋白電泳儀對新生兒臍血進行定量檢測，能有效地檢出α-地中海貧血患兒，對開展新生兒α-地中海貧血的早期篩查、遺傳咨詢有重要的指導意義。

α-地中海貧血；新生兒；臍血篩查；血紅蛋白電泳；宜州市

α-地中海貧血（α-地貧）是由于α-珠蛋白基因缺失突變導致α-珠蛋白肽鏈缺如或合成減少而引起的一種遺傳溶血性疾病[1]。地中海貧血的診斷產(chǎn)生于20世紀80年代初期，其診斷研究經(jīng)歷了DNA點雜交、限制性內切酶酶譜分析、限制性片段長度多態(tài)性連鎖分析等等，其中PCR體外基于擴增診斷分析應用較為廣泛，在地中海貧血的研究分析中，得到了廣泛的應用，受到了人們的關注。廣西是地貧高發(fā)區(qū)，胎兒水腫綜合征發(fā)生率為6.66‰，居出生缺陷首位，給家庭和社會帶來沉重的負擔[2]。本研究選擇1413例新生兒的臍血進行檢測，探討廣西宜州市地方新生兒地中海貧血的發(fā)生率，報道如下。

1 資料與方法

1.1 對象 選擇2012年8月～2014年9月在廣西壯族自治區(qū)宜州市中醫(yī)院出生的新生兒共1413例作為研究對象。

1.2 儀器與試劑 采用SPIFE 3000全自動電泳儀及其配套掃描儀和試劑，生產(chǎn)廠家為美國海倫娜（Helena）公司。

1.3 方法 在胎兒出生剪斷臍帶的時候取每1例嬰兒的臍帶血，血量為2mL，將其置于EDTA抗凝管中，在取血的過程中要注意避免母血污染。臍血以3000r/min離心5min，去除血漿后，取100μL紅細胞加入5mL生理鹽水，混勻洗滌紅細胞，離心8min，吸去上清液，加270μL蒸餾水，充分振蕩溶血，再用四氯化碳抽提離心，取上層血紅蛋白液17μL，按儀器操作對所得血紅蛋白液逐步進行點樣、電泳、染色、脫色、烘干、膠片掃描以及結果分析。

1.4 診斷標準[3]α-地中海貧血攜帶者的診斷標準為臍血檢出Hb Bart's。根據(jù)Hb Bart's含量分為4種類型：含量在1.0%～3.0%者為靜止性，3.0%～20.0%者為標準型，20.0%～80.0%者為中間型，＞80.0%者為重型。

2 結果

在1413份臍血標本中共有187份檢出Hb Bart's，且Hb Bart's含量≥1.0%，檢出率為13.23%。其中靜止性96例，檢出率6.794%；標準型86例，檢出率6.086%；中間型4例，檢出率0.283%；重型1例，檢出率0.071%。見表1。另外發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病2例，發(fā)生率為0.142%，其中HbD 1例；疑似β-地中海貧血1例，其標本HbA含量44.77%，HbF含量55.23%，但未做進一步的基因診斷分析。

表1 1413例臍血Hb Bart's含量及α-地中海貧血分型

3 討論

地中海貧血是一種溶血性貧血，具有遺傳性，是由于血紅蛋白珠蛋白鏈合成部分受抑制或完全受抑制而導致的[4]。α-地中海貧血是由于α鏈合成的減少造成非α（如β、γ）的相對過剩而形成四聚體，如Hb Bart's（γ4）和HbH（β4）。根據(jù)總的α-基因缺失數(shù)目的不同，α-地中海貧血被分為靜止型、標準型、中間型（HbH病）與重型（Bart's胎兒水腫綜合征4種類型[5]。其中靜止型α-地中海貧血的發(fā)病機制為1個α基因的缺失或者點突變，可造成各種肽鏈的合成障礙，致使血紅蛋白的組分改變，一般在臨床上沒有明顯的癥狀表現(xiàn)，只能在出生時的血液中Hb Bart's的含量為1%～3%。標準型α-地中海貧血的發(fā)病機制為2個α基因的缺失或者點突變，一般在臨床上無明顯癥狀表現(xiàn)，部分患者會出現(xiàn)輕度溶血性貧血癥狀，檢測中可發(fā)現(xiàn)出生時血液中Hb Bart's的含量為3%～20%。中間型α-地中海貧血，也可以被稱為HbH病，其發(fā)病機制為3個α基因的缺失或者點突變。慢性溶血性貧血的發(fā)病機制為紅細胞中的β四聚體HbH（β4）附著于紅細胞膜上，對紅細胞造成破壞而引起的?；純撼錾鷷rHb Bart's含量為20%～40%，3個月后逐漸變?yōu)镠bH。重型α-地中海貧血的發(fā)病機制為4個α基因的缺失或者點突變，主要癥狀表現(xiàn)為新生兒在胎兒期不能合成正常的HbF(α2γ2)，從而導致胎兒出現(xiàn)全身水腫、四肢短小腹大以及肝脾腫大等，絕大部分此類新生兒都在出生前在子宮內發(fā)生死亡，或者出生后1～2h死亡[6]。在國際上α-地中海貧血都是以Hb Bart's這一特殊的血紅蛋白含量為指標進行檢測和診斷的，具有便捷性和準確性。隨著醫(yī)學技術的發(fā)展，基因診斷也開始應用于α-地中海貧血的診斷中，準確率有了進一步的提高，但是由于基因診斷技術對設備和操作的要求都較高，成本昂貴，因此難以在廣大醫(yī)院中得以廣泛的推廣和應用。而與之相比，血紅蛋白電泳的方法具有取材方便、簡便快速、準確靈敏以及無創(chuàng)傷等優(yōu)點，將其應用于α-地中海貧血的篩查是一種非常可行的途徑。

本研究對宜州市1413例新生兒臍血標本檢測的結果發(fā)現(xiàn)，檢出α-地中海貧血187例，發(fā)生率為13.23%。比張春榮等[7]統(tǒng)計的結果（12.36%）略高，但比黃作群[8]統(tǒng)計的結果（14.34%）稍低，這可能與人口分布和流動差異有關。在檢出的患者中，有6.794%的新生兒為靜止型α-地中海貧血，有6.086%的新生兒為標準型α-地中海貧血，這2種所占比例最多，由此可見靜止型和標準型是廣西宜州市地方α-地中海貧血的主要類型。在實際的醫(yī)療工作中，必須要重視臍血的篩查，并采取一定的措施對α-地中海貧血的防治工作進行的加強和完善，以降低地中海貧血的發(fā)生率。廣西是地中海貧血高發(fā)區(qū)，對新生兒α-地中海貧血早期篩查顯得尤為重要，新生兒α-地中海貧血篩查有利于及早發(fā)現(xiàn)患兒，做出相應的處理，為進一步進行基因診斷和遺傳咨詢提供基礎。

[1] 陳廷娥，郭廣洲，張宇英，等.α-地中海貧血產(chǎn)前篩查及基因型分析[J].中國熱帶醫(yī)學，2007，7（4）:504-505.

[2] 黃越華，陳赤，曾萼.2000～2005年廣西出生缺陷監(jiān)測結果分析[J].應用預防醫(yī)學雜志，2006，12（6）:367-368，344.

[3] 張之南.血液病診斷及療效標準[M].2版，北京:科學出版社，1999:51.

[4] 李璞.醫(yī)學遺傳學[M].北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學出版社，2006.

[5] 康熙雄.臨床電泳[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:296-297.

[6] 陸國輝，徐湘民.臨床遺傳咨詢[M].北京:北京大學醫(yī)學出版社，2007:238.

[7] 張春榮，黃小明，馬巧瑩，等.全自動電泳系統(tǒng)對8093例產(chǎn)前孕婦和新生兒地中海貧血的檢測分析[J].檢驗醫(yī)學與臨床，2009，7（6）: 1165-1166.

[8] 黃作群，唐萍，易菲，等.1422例新生兒臍血α-地中海貧血篩查[J].廣西醫(yī)學，2006，28（12）:1941-1942.

[摘 要] 目的 分析深圳市龍華新區(qū)2013年以來百白破疫苗接種的不良反應情況。方法 分析百白破疫苗接種不良反應的臨床診斷，分析基礎免疫和加強免疫引起的不良反應差別以及同期引起局部不良反應和全身不良反應的差別。結果 2013年以來全區(qū)共接種無細胞百白破疫苗198877例，疫苗引起不良反應共158例，發(fā)生率為79.44/100000；一般反應90例，異常反應49例，偶合反應17例，待定2例。基礎免疫接種例數(shù)150550例，發(fā)生不良反應41例，發(fā)生率為27.23/100000；加強免疫接種例數(shù)48327例，發(fā)生不良反應117例，發(fā)生率為242.10/100000，兩者比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；2013年全年共接種135717例，發(fā)生不良反應71例，發(fā)生率為52.31/100000，2014年共接種63160例，發(fā)生不良反應87例，發(fā)生率為137.74/100000，兩者比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論 盡管百白破疫苗具有良好的預防傳染病作用，但同時也有很多不良反應，一定要重視。疫苗運用之前要仔細檢查是否清亮，有無分層等，使用時應充分搖勻。根據(jù)不同的月齡選擇合適的針頭，嚴格按操作規(guī)范注射，嚴格把握禁忌證，注意接種后嬰兒、兒童的護理。

[關鍵詞] 無細胞百白破疫苗；不良反應；發(fā)生率

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.28.113

廣西 546300 廣西壯族自治區(qū)宜州市中醫(yī)院檢驗科 （凌顯楨莫麗莎）