凌顯楨 莫麗莎

宜州市新生兒臍血血紅蛋白電泳結(jié)果分析

凌顯楨 莫麗莎

目的 了解宜州市新生兒地中海貧血的發(fā)生率，探討新生兒臍血篩查地中海貧血的意義，為臨床診斷及預(yù)防提供依據(jù)。方法 采用美國Helena SPIFE 3000全自動血紅蛋白電泳儀對1413份新生兒臍血標本進行瓊脂糖凝膠蛋白電泳，并對Hb區(qū)帶進行掃描定量分析。結(jié)果 在1413份臍血標本中共檢出Hb Bart's陽性（≥1.0%）187例，陽性率13.23%。其中靜止型96例、標準型86例、中間型4例、重型1例，陽性率分別為6.794%、6.086%、0.283%、0.071%。另外發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病2例，發(fā)生率為0.142%，其中HbD 1例，可疑β-地中海貧血1例。結(jié)論 使用全自動血紅蛋白電泳儀對新生兒臍血進行定量檢測，能有效地檢出α-地中海貧血患兒，對開展新生兒α-地中海貧血的早期篩查、遺傳咨詢有重要的指導(dǎo)意義。

α-地中海貧血；新生兒；臍血篩查；血紅蛋白電泳；宜州市

α-地中海貧血（α-地貧）是由于α-珠蛋白基因缺失突變導(dǎo)致α-珠蛋白肽鏈缺如或合成減少而引起的一種遺傳溶血性疾病[1]。地中海貧血的診斷產(chǎn)生于20世紀80年代初期，其診斷研究經(jīng)歷了DNA點雜交、限制性內(nèi)切酶酶譜分析、限制性片段長度多態(tài)性連鎖分析等等，其中PCR體外基于擴增診斷分析應(yīng)用較為廣泛，在地中海貧血的研究分析中，得到了廣泛的應(yīng)用，受到了人們的關(guān)注。廣西是地貧高發(fā)區(qū)，胎兒水腫綜合征發(fā)生率為6.66‰，居出生缺陷首位，給家庭和社會帶來沉重的負擔(dān)[2]。本研究選擇1413例新生兒的臍血進行檢測，探討廣西宜州市地方新生兒地中海貧血的發(fā)生率，報道如下。

1 資料與方法

1.1 對象 選擇2012年8月～2014年9月在廣西壯族自治區(qū)宜州市中醫(yī)院出生的新生兒共1413例作為研究對象。

1.2 儀器與試劑 采用SPIFE 3000全自動電泳儀及其配套掃描儀和試劑，生產(chǎn)廠家為美國海倫娜（Helena）公司。

1.3 方法 在胎兒出生剪斷臍帶的時候取每1例嬰兒的臍帶血，血量為2mL，將其置于EDTA抗凝管中，在取血的過程中要注意避免母血污染。臍血以3000r/min離心5min，去除血漿后，取100μL紅細胞加入5mL生理鹽水，混勻洗滌紅細胞，離心8min，吸去上清液，加270μL蒸餾水，充分振蕩溶血，再用四氯化碳抽提離心，取上層血紅蛋白液17μL，按儀器操作對所得血紅蛋白液逐步進行點樣、電泳、染色、脫色、烘干、膠片掃描以及結(jié)果分析。

1.4 診斷標準[3]α-地中海貧血攜帶者的診斷標準為臍血檢出Hb Bart's。根據(jù)Hb Bart's含量分為4種類型：含量在1.0%～3.0%者為靜止性，3.0%～20.0%者為標準型，20.0%～80.0%者為中間型，＞80.0%者為重型。

2 結(jié)果

在1413份臍血標本中共有187份檢出Hb Bart's，且Hb Bart's含量≥1.0%，檢出率為13.23%。其中靜止性96例，檢出率6.794%；標準型86例，檢出率6.086%；中間型4例，檢出率0.283%；重型1例，檢出率0.071%。見表1。另外發(fā)現(xiàn)異常血紅蛋白病2例，發(fā)生率為0.142%，其中HbD 1例；疑似β-地中海貧血1例，其標本HbA含量44.77%，HbF含量55.23%，但未做進一步的基因診斷分析。

表1 1413例臍血Hb Bart's含量及α-地中海貧血分型

3 討論

地中海貧血是一種溶血性貧血，具有遺傳性，是由于血紅蛋白珠蛋白鏈合成部分受抑制或完全受抑制而導(dǎo)致的[4]。α-地中海貧血是由于α鏈合成的減少造成非α（如β、γ）的相對過剩而形成四聚體，如Hb Bart's（γ4）和HbH（β4）。根據(jù)總的α-基因缺失數(shù)目的不同，α-地中海貧血被分為靜止型、標準型、中間型（HbH?。┡c重型（Bart's胎兒水腫綜合征4種類型[5]。其中靜止型α-地中海貧血的發(fā)病機制為1個α基因的缺失或者點突變，可造成各種肽鏈的合成障礙，致使血紅蛋白的組分改變，一般在臨床上沒有明顯的癥狀表現(xiàn)，只能在出生時的血液中Hb Bart's的含量為1%～3%。標準型α-地中海貧血的發(fā)病機制為2個α基因的缺失或者點突變，一般在臨床上無明顯癥狀表現(xiàn)，部分患者會出現(xiàn)輕度溶血性貧血癥狀，檢測中可發(fā)現(xiàn)出生時血液中Hb Bart's的含量為3%～20%。中間型α-地中海貧血，也可以被稱為HbH病，其發(fā)病機制為3個α基因的缺失或者點突變。慢性溶血性貧血的發(fā)病機制為紅細胞中的β四聚體HbH（β4）附著于紅細胞膜上，對紅細胞造成破壞而引起的?；純撼錾鷷rHb Bart's含量為20%～40%，3個月后逐漸變?yōu)镠bH。重型α-地中海貧血的發(fā)病機制為4個α基因的缺失或者點突變，主要癥狀表現(xiàn)為新生兒在胎兒期不能合成正常的HbF(α2γ2)，從而導(dǎo)致胎兒出現(xiàn)全身水腫、四肢短小腹大以及肝脾腫大等，絕大部分此類新生兒都在出生前在子宮內(nèi)發(fā)生死亡，或者出生后1～2h死亡[6]。在國際上α-地中海貧血都是以Hb Bart's這一特殊的血紅蛋白含量為指標進行檢測和診斷的，具有便捷性和準確性。隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，基因診斷也開始應(yīng)用于α-地中海貧血的診斷中，準確率有了進一步的提高，但是由于基因診斷技術(shù)對設(shè)備和操作的要求都較高，成本昂貴，因此難以在廣大醫(yī)院中得以廣泛的推廣和應(yīng)用。而與之相比，血紅蛋白電泳的方法具有取材方便、簡便快速、準確靈敏以及無創(chuàng)傷等優(yōu)點，將其應(yīng)用于α-地中海貧血的篩查是一種非?？尚械耐緩?。

本研究對宜州市1413例新生兒臍血標本檢測的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，檢出α-地中海貧血187例，發(fā)生率為13.23%。比張春榮等[7]統(tǒng)計的結(jié)果（12.36%）略高，但比黃作群[8]統(tǒng)計的結(jié)果（14.34%）稍低，這可能與人口分布和流動差異有關(guān)。在檢出的患者中，有6.794%的新生兒為靜止型α-地中海貧血，有6.086%的新生兒為標準型α-地中海貧血，這2種所占比例最多，由此可見靜止型和標準型是廣西宜州市地方α-地中海貧血的主要類型。在實際的醫(yī)療工作中，必須要重視臍血的篩查，并采取一定的措施對α-地中海貧血的防治工作進行的加強和完善，以降低地中海貧血的發(fā)生率。廣西是地中海貧血高發(fā)區(qū)，對新生兒α-地中海貧血早期篩查顯得尤為重要，新生兒α-地中海貧血篩查有利于及早發(fā)現(xiàn)患兒，做出相應(yīng)的處理，為進一步進行基因診斷和遺傳咨詢提供基礎(chǔ)。

[1] 陳廷娥，郭廣洲，張宇英，等.α-地中海貧血產(chǎn)前篩查及基因型分析[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2007，7（4）:504-505.

[2] 黃越華，陳赤，曾萼.2000～2005年廣西出生缺陷監(jiān)測結(jié)果分析[J].應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2006，12（6）:367-368，344.

[3] 張之南.血液病診斷及療效標準[M].2版，北京:科學(xué)出版社，1999:51.

[4] 李璞.醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)[M].北京:中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2006.

[5] 康熙雄.臨床電泳[M].北京:人民衛(wèi)生出版社，2006:296-297.

[6] 陸國輝，徐湘民.臨床遺傳咨詢[M].北京:北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2007:238.

[7] 張春榮，黃小明，馬巧瑩，等.全自動電泳系統(tǒng)對8093例產(chǎn)前孕婦和新生兒地中海貧血的檢測分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009，7（6）: 1165-1166.

[8] 黃作群，唐萍，易菲，等.1422例新生兒臍血α-地中海貧血篩查[J].廣西醫(yī)學(xué)，2006，28（12）:1941-1942.

[摘 要] 目的 分析深圳市龍華新區(qū)2013年以來百白破疫苗接種的不良反應(yīng)情況。方法 分析百白破疫苗接種不良反應(yīng)的臨床診斷，分析基礎(chǔ)免疫和加強免疫引起的不良反應(yīng)差別以及同期引起局部不良反應(yīng)和全身不良反應(yīng)的差別。結(jié)果 2013年以來全區(qū)共接種無細胞百白破疫苗198877例，疫苗引起不良反應(yīng)共158例，發(fā)生率為79.44/100000；一般反應(yīng)90例，異常反應(yīng)49例，偶合反應(yīng)17例，待定2例。基礎(chǔ)免疫接種例數(shù)150550例，發(fā)生不良反應(yīng)41例，發(fā)生率為27.23/100000；加強免疫接種例數(shù)48327例，發(fā)生不良反應(yīng)117例，發(fā)生率為242.10/100000，兩者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；2013年全年共接種135717例，發(fā)生不良反應(yīng)71例，發(fā)生率為52.31/100000，2014年共接種63160例，發(fā)生不良反應(yīng)87例，發(fā)生率為137.74/100000，兩者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 盡管百白破疫苗具有良好的預(yù)防傳染病作用，但同時也有很多不良反應(yīng)，一定要重視。疫苗運用之前要仔細檢查是否清亮，有無分層等，使用時應(yīng)充分搖勻。根據(jù)不同的月齡選擇合適的針頭，嚴格按操作規(guī)范注射，嚴格把握禁忌證，注意接種后嬰兒、兒童的護理。

[關(guān)鍵詞] 無細胞百白破疫苗；不良反應(yīng)；發(fā)生率

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.28.113

廣西 546300 廣西壯族自治區(qū)宜州市中醫(yī)院檢驗科 （凌顯楨莫麗莎）