姚瑞英

血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響

姚瑞英

目的 探討血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響。方法 選擇無償獻(xiàn)血者標(biāo)本60份作為研究對象，把該組標(biāo)本與CPD（枸櫞酸鹽—磷酸鹽—萄葡糖血液保養(yǎng)液，Citrate Phosphate Dextrose）保養(yǎng)液進(jìn)行充分混合，然后把混合液逐步封閉成3段，分別標(biāo)記為A、B、C組，A組在采集后第1天、B組在第15天、C組在第30天，分析血液標(biāo)本中RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8指標(biāo)情況。結(jié)果 B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD 2個指標(biāo)明顯低于A組，2組患者RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)均明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。C組患者的RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標(biāo)低于B組，RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能有一定影響，時間延長，免疫功能下降，但是在臨床輸血治療過程中，需要注意的是臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)不同的輸血目的為患者選擇最佳血液，更能有效提高血站血液的利用價值。

血液儲存時間；紅細(xì)胞免疫功能；影響

輸血在臨床上已經(jīng)成為一種對患者進(jìn)行救治的常規(guī)手段，越來越多人也開始關(guān)注其安全性。通過不斷努力研究，經(jīng)血液傳播的相關(guān)疾病已經(jīng)得到很好的控制[1]。但是近些年來，有些研究結(jié)果表明，在給病危的患者輸注采集時間在2周以上的血液時，患者的死亡率會顯著增加，對于出現(xiàn)該現(xiàn)象的具體原因還沒有定論[2]。本文探討不同的血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響，分析兩者之間的關(guān)系，提高臨床用血的安全性，讓患者能夠輸注到更加安全的血液。在整個過程中，該研究采用的是隨機(jī)抽取本站采集的健康無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本共60份，留取小樣，將其分為A、B、C 3組,A組在采集后第1天、B組在第15天、C組在第30天對血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8指標(biāo)情況進(jìn)行檢測，然后對檢測結(jié)果進(jìn)行對比分析，總結(jié)不同的血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 按照完全隨機(jī)的方法，選擇南陽市中心血站在2014年3月～2014年4月采集的無償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本60份作為研究對象，所有獻(xiàn)血者均符合相關(guān)獻(xiàn)血要求。把該組標(biāo)本與CPD保養(yǎng)液進(jìn)行充分混合，然后把混合液逐步封閉成3段，分別標(biāo)記為A、B、C組。60例獻(xiàn)血對象中男41名，女19名；年齡19～36歲,平均年齡（28.0±1.4）歲；獻(xiàn)血對象的所有自然資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 治療方法 所有標(biāo)本均采用全自動生化儀（貝克曼庫爾特AU5800）進(jìn)行分析。紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率實(shí)驗(yàn)步驟：首先取0.1mL清滌紅細(xì)胞配制成1.5×107/mL濃度的紅細(xì)胞懸液。然后再用0.9%的生理鹽水把補(bǔ)體致敏酵母菌進(jìn)行1次洗滌離心，配制呈l×108/mL濃度的懸液。兩種懸液配好以后，分別取50μL紅細(xì)胞懸液和50μl補(bǔ)體致敏酵母菌懸液，在試管內(nèi)進(jìn)行充分的混合，放置在水溫為37℃的恒溫水箱中，共30min。然后加100mL的生理鹽水進(jìn)行稀釋。稀釋完成后加50mL0.25%戊二醛進(jìn)行固定，做瑞氏染色。在高倍鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)，一般計(jì)數(shù)200個紅細(xì)胞。在1個紅細(xì)胞上結(jié)合有2個或2個以上酵母菌的細(xì)胞為花環(huán)紅細(xì)胞。最后把RBC-C3b受體活性轉(zhuǎn)換算成結(jié)合百分率。RBC-SOD、RBC-IC的測定方法與RBC-C3b酵母花環(huán)實(shí)驗(yàn)相同，僅僅需要用未致酵母菌替換致酵母菌。IL-8仿真實(shí)驗(yàn)步驟：第1管內(nèi)加0.2mL全血和0.2mL生理鹽水溶液，在第2管中進(jìn)行充分混合，然后放置在37.2℃的恒溫水浴箱中60min，以2500轉(zhuǎn)/min進(jìn)行離心，取出0.1mL的上清液，滴入放射免疫試劑盒中來測定IL-8。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察A、B、C 3組血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 本次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料結(jié)果用“±s”表示，其中組間數(shù)據(jù)對比采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料對比采用χ2檢驗(yàn)；以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

3組血液的RBC-C3b、RBC-SOD、RBC-IC和IL-8情況對比結(jié)果。B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標(biāo)均明顯低于A組，2組患者RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)均明顯高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。C組患者的RBC-C3b、RBCSOD這2個指標(biāo)低于B組，RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)高于B組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 第1、15、30天3組血液的4個指標(biāo)情況（±s）

表1 第1、15、30天3組血液的4個指標(biāo)情況（±s）

注：與A組比較，aP<0.05；與B組比較，aP<0.05

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3 討論

紅細(xì)胞膜上粘附C3b分子能與未致敏的酵母菌形成RBC-IC花環(huán)。紅細(xì)胞膜上的C3b受體能與補(bǔ)體致敏的酵母菌形成RBC-C3bR花環(huán)。這兩種的花環(huán)率可以作為紅細(xì)胞免疫粘附功能的指標(biāo)。如果RBC-IC花環(huán)率增高，而RBC-C3b受體花環(huán)率降低，則為繼發(fā)性免疫功能下降，是由于紅細(xì)胞粘附IC過多引起的。如這兩項(xiàng)指標(biāo)都降低，則為原發(fā)性免疫功能低下，為紅細(xì)胞膜C3b受體受到破壞的。在臨床上，這兩項(xiàng)試驗(yàn)可作為免疫性疾病療效和預(yù)后的檢測指標(biāo)。隨儲存時間延長，RBC-IC水平不斷增加，這表明RBC的清除能力正在逐漸的減弱[3-5]。隨著儲存時間延長，C3b水平降低的現(xiàn)象表明紅細(xì)胞的CRI數(shù)量已經(jīng)開始減少，導(dǎo)致其對病理循環(huán)免疫復(fù)合物的清除能力明顯減弱，且會導(dǎo)致補(bǔ)體過度活化的現(xiàn)象。SOD水平是反映機(jī)體內(nèi)自由基含量的重要指標(biāo)之一，其水平與自由基含量呈明顯負(fù)相關(guān)。對機(jī)體中的自由基清除干預(yù)對策、自由基代謝紊亂以及對判斷患者病程轉(zhuǎn)歸和動態(tài)監(jiān)測具有重要參考價值。在血液中，IL-8是對紅細(xì)胞免疫反應(yīng)程度進(jìn)行評加的重要指標(biāo)，主要是由于紅細(xì)胞膜上具有的許多廣譜趨化因子受體的配體；同時IL-8也是一種非常重要的白細(xì)胞趨化因子，可以引起一系列的炎癥反應(yīng)[6-7]。本研究探討血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能的影響中，B、C2組患者RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標(biāo)均明顯低于A組，RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)均明顯高于A組，C組患者的RBC-C3b、RBC-SOD這2個指標(biāo)低于B組，RBC-IC、IL-8這2個指標(biāo)高于B組相比有差異，與王怡涵[8]等人結(jié)論一致。說明儲存血的時間長短對紅細(xì)胞的免疫功能有一定影響。從傳統(tǒng)輸血發(fā)展至成分輸血，臨床醫(yī)生的輸血觀念也應(yīng)該走出傳統(tǒng)輸血時代認(rèn)識的誤區(qū),個別醫(yī)生會認(rèn)為凡有輸血指征者輸注“新鮮血”效果好。其實(shí)，所謂“新鮮血”只是一個相對的概念，它的含義應(yīng)該隨輸血目的的不同而不同。例如，若輸血目的是糾正貧血特別是慢性貧血，解決患者的運(yùn)氧力的不足，用保存期內(nèi)任何一天的全血即可。單純糾正貧血使患者血紅蛋白升高，氧狀態(tài)改變，21天的為最好；若輸血目的是為了補(bǔ)充凝血因子，由于IL-8不穩(wěn)定容易喪失活性，則應(yīng)輸當(dāng)天全血。因此，在臨床輸血過程中，需要注意的是臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)不同的輸血目的為患者選擇最佳血液。這樣不僅能達(dá)到最佳的治療效果，同時也能有效提高血站血液的利用率。

綜上所述，血液儲存時間對紅細(xì)胞免疫功能有一定影響，時間延長，免疫功能下降，但是在臨床輸血過程中，醫(yī)生應(yīng)根據(jù)不同的輸血目的為患者選擇最佳血液，不僅有利于患者病情的緩解和治愈，也能有效提高血站血液的利用價值。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.11.044

河南 473000 南陽市中心血站檢驗(yàn)科（姚瑞英）