楊 毅

HER2基因表達(dá)在胃癌中的臨床研究

楊 毅

目的 探討HER2基因在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義。方法 隨機(jī)選擇送檢的胃標(biāo)本180例(其中正常胃組織80例，胃部良性腫瘤60例，胃癌40例)，均進(jìn)行免疫組化分析HER2表達(dá)情況，并且與胃癌的病理特征進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果 HER2在三者中的陽性表達(dá)分別為（6例）7.5%、（28例）46.7%和（28例）70.0%，而強(qiáng)陽性率表達(dá)分別為（0例）0.0%、（4例）6.7%和（10例）25.0%，對(duì)比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)。HER2的陽性表達(dá)率與與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，胃癌患者不同年齡、體質(zhì)指數(shù)與病理類型中的對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 HER2在胃癌組織中呈現(xiàn)高陽性表達(dá)并且與病理學(xué)轉(zhuǎn)移、分期特征有明顯相關(guān)性，可能是導(dǎo)致胃癌發(fā)生發(fā)展的因素之一。

HER2；胃癌；免疫組化；臨床病理特征

胃癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，目前胃癌的發(fā)病率逐漸升高，發(fā)病年齡有年輕化的趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅患者的身心健康[1-2]。胃癌雖為高發(fā)性腫瘤，但如能超早期發(fā)現(xiàn)，一般預(yù)后較好。在當(dāng)前生物學(xué)理論中，惡性腫瘤的發(fā)生與發(fā)展涉及到一系列分子生物學(xué)機(jī)制的變化與改革[3-4]。其中HER2在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用，其是表皮生長因子受體家族的一員，胞內(nèi)區(qū)具有酪氨酸激酶活性，與表皮生長因子受體(EGFR)、HER3、HER4都屬于Ⅰ類受體酪氨酸激酶(RTK)超家族。通常情況下，HER2在正常組織中比較很少。而在惡性腫瘤細(xì)胞中可檢測到HER2基因過量表達(dá)[5]。本研究通過免疫組織化學(xué)分析探討了HER2基因在胃癌組織中的表達(dá)及臨床意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年8月～2014年6月隨機(jī)選擇岳陽市二人民醫(yī)院病理科送檢的胃部標(biāo)本180例,其中正常胃部組織（正常組）80例，胃部良性腫瘤（良性腫瘤組）60例，胃癌（胃癌組）40例，患者的臨床病歷資料、病理資料均完整；各重要臟器功能基本正常，排除伴中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病或其他影響研究結(jié)果的疾病。正常組中男42例，女38例；年齡26～78歲，平均年齡（57.0±3.1）歲，平均體重指數(shù)（BMI）（23.67±4.11）kg/ m2。良性腫瘤組中男33例，女27例；年齡27～80歲，平均年齡（57.1±4.5）歲，平均BMI（23.92±4.22）kg/m2。胃癌組中男22例，女18例；年齡29～77歲，平均年齡（57.0±3.2）歲；平均BMI（23.65±4.42）kg/m2；TNM分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期6例，Ⅳ期4例；術(shù)前均未接受化療或放療。3組的性別、年齡、BMI等基礎(chǔ)資料對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 標(biāo)本處理 二甲苯、無水乙醇、二抗及其他試劑均由本院病理科提供；二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑購自北京中杉金橋公司；HER2鼠抗人單克隆抗體及SP檢測試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)有限公司。所有標(biāo)本選擇4%甲醛溶液固定后，常規(guī)石蠟包埋，4μm層厚連續(xù)切片。在免疫組織化學(xué)分析中，切片脫蠟和水化后，選擇磷酸鹽緩沖溶液(PBS) 沖洗3次，每次5～10min。加入50μL過氧化物酶阻斷溶液，37℃孵育10min。繼續(xù)選擇重復(fù)PBS沖洗步驟，然后每張切片加入5μL正常非免疫動(dòng)物血清，37℃孵育10min后除去血清，每張切片加入50μL的一抗，37℃孵育1h。重復(fù)PBS沖洗步驟，每張切片加入50μL的二抗，37℃孵育30min。重復(fù)PBS沖洗步驟，每張切片加入50μL鏈霉菌抗生物素-過氧化物酶溶液，37℃孵育10min。重復(fù)PBS沖洗步驟，每張切片加入2滴DAB溶液，放置10min。常規(guī)進(jìn)行蘇木素復(fù)染與切片觀察。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn) 取陽性細(xì)胞占全部腫瘤細(xì)胞的百分比進(jìn)行計(jì)數(shù)(HER2陽性表達(dá)部位在胞膜和/或細(xì)胞質(zhì))，陽性細(xì)胞占各自全部腫瘤細(xì)胞的百分比＜5%計(jì)為(-)，5%～25%為(+)，26%～50%為(++)，≥50% 為(+++)，+～+++表明為陽性，+++表示為強(qiáng)陽性[6]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS14.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。陽性率的比較用選擇χ2檢驗(yàn)或者多組間的方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HER2在胃部組織中的表達(dá)情況 HER2在正常組、良性腫瘤組與胃癌組中的陽性表達(dá)分別為7.5%、46.7%和70.0%，而強(qiáng)陽性率表達(dá)分別為0.0%、6.7%和25.0%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 HER2在胃癌組織中的表達(dá)情況對(duì)比(n)

2.2 HER2在胃癌中的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系HER2的陽性表達(dá)率與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，胃癌患者不同年齡、BMI中的對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表2。

表2 HER2在胃癌中的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系(n=40)

3 討論

胃癌是我國常見的一種惡性腫瘤，發(fā)病率一直處于高位。手術(shù)治療胃癌是至今唯一有效并可能治愈早期胃癌的方法，但因缺乏特異性的初篩指標(biāo)，大多數(shù)患者就診時(shí)已處于進(jìn)展期，導(dǎo)致預(yù)后生存率不高[7]。不過胃癌的發(fā)生經(jīng)歷多種過程，可通過相關(guān)生物學(xué)的檢測來早期發(fā)現(xiàn)胃疾病的發(fā)生，從而改善預(yù)后。HER2為表皮生長因子受體家族成員之一，它是EGF/erbB生長因子受體家族中的一員。HER2基因的擴(kuò)增和過度表達(dá)與許多有害的細(xì)胞特性有關(guān)，包括血管生成、細(xì)胞生存能力的增強(qiáng)、生長促進(jìn)、細(xì)胞生成、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)等，其過度表達(dá)與細(xì)胞的過度分裂、增殖和癌變有關(guān)[8]。也有學(xué)者認(rèn)為HER2在胃癌高表達(dá)，與胃癌的發(fā)生、發(fā)展關(guān)系密切，可能成為胃癌預(yù)后不良的一個(gè)標(biāo)志物，同時(shí)也成為治療胃癌的一個(gè)新靶點(diǎn)[9]。本研究中HER2在正常組、良性腫瘤組與胃癌組中的陽性表達(dá)分別為7.5%、46.7%和70.0%，而強(qiáng)陽性率表達(dá)分別為0.0%、6.7%和25.0%，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，胃癌組陽性表達(dá)和強(qiáng)陽性表達(dá)明顯高于正常組及良性腫瘤組，與相關(guān)研究結(jié)果吻合。可以通過對(duì)HER-2陽性表達(dá)實(shí)施監(jiān)測，可用于早期判斷腫瘤細(xì)胞的分化。

HER2基因表達(dá)與胃部腫瘤的惡性程度有關(guān)，良性腫瘤中表達(dá)量低，而惡性腫瘤中表達(dá)量高。HER2/基因過度表達(dá)的胃癌患者中，淋巴結(jié)有轉(zhuǎn)移者早期復(fù)發(fā)，生存率明顯降低。而免疫組織化學(xué)是利用免疫反應(yīng)來定位組織或細(xì)胞中某些抗原成分的存在和分布的一門新的技術(shù)[10]。HER2可促進(jìn)癌細(xì)胞的生長，并保護(hù)異常細(xì)胞免于自然死亡，同時(shí)增強(qiáng)其轉(zhuǎn)移能力[11]。本研究中HER2的陽性表達(dá)率與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況和臨床分期對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，胃癌患者不同年齡、BMI中的對(duì)比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。具體來說，HER2激活后可通過多種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)血管新生進(jìn)行直接或間接調(diào)控，從而增加腫瘤的體積及惡性程度。

總之，HER2基因在胃癌組織中呈現(xiàn)高陽性表達(dá)并且與病理學(xué)轉(zhuǎn)移、分期特征有明顯相關(guān)性，可能是導(dǎo)致胃癌發(fā)生、發(fā)展的因素之一。

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Objective To investigate the expression and clinical significance of HER2 in gastric tissue. Methods 180 cases of gastric specimens were selected (included 80 cases of normal gastric tissue, 60 cases of gastric benign, 40 cases of gastric cancer), there were given the immunohistochemical analysis for HER2 expression and the pathological features of breast cancer were given the correlation analysis. Results The HER2 expression in normal gastric group, gastric benign group and gastric cancer groups were 7.5%, 46.7% and 70.0%,respectively，while the strong positive expression rate were 0.0%, 6.7% and 25.0%, the differences among the three groups were statistically significant (P<0.05). The positive expression rate of HER2 in gastric cancer patients compared at the different ages and BMI and pathological type were not significant; and the axillary lymph node status and clinical stage compared were significant difference (P<0.05). Conclusion HER2 shows high expression in gastric cancer, and it has significantly correlated to the metastasis and pathological staging features, it may be one of the factors that leads to the development of gastric cancer.

HER2; Gastric cancer; Immunohistochemistry; Clinicopathological features

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.11.010

湖南 414000 岳陽市二人民醫(yī)院胃腸外科（楊毅）