張斕

電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)血清絨毛膜促性腺激素的效果分析

張斕

目的 分析血清絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)中應(yīng)用電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)的效果。方法 選取60份正常女性血清標(biāo)本，在檢測(cè)HCG表達(dá)情況中分別選擇放射免疫分析法與電化學(xué)發(fā)光法，最后對(duì)比2組檢測(cè)方法的應(yīng)用效果。結(jié)果 電化學(xué)發(fā)光法敏感度、特異度分別為100.00%和98.33%，與放射免疫法的100.00%和96.67%比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與放射免疫比較，電化學(xué)發(fā)光法線性關(guān)系范圍明顯更寬。結(jié)論 電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)HCG可獲取與放射免疫法相同的檢驗(yàn)效果，其操作簡(jiǎn)單，具有報(bào)告范圍寬、敏感度高、特異性良好、抗干擾能力強(qiáng)等優(yōu)勢(shì)，適用于大規(guī)模普查HCG檢驗(yàn)中。

電化學(xué)發(fā)光法；放射免疫法；絨毛膜促性腺激素（HCG）

絨毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)作為早期妊娠最敏感的血清學(xué)指標(biāo)，在血清β絨毛膜膜促性腺激素(βHCG)臨床檢測(cè)中大多采取放射免疫法，此方法存在操作繁瑣、費(fèi)時(shí)較多等局限性，且所需報(bào)告時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，結(jié)果穩(wěn)定性較差，存在不同程度的同位素污染問(wèn)題[1]。近年來(lái)，電化學(xué)放光法被廣泛應(yīng)用于臨床血清學(xué)檢驗(yàn)中，此方法具有重復(fù)性好、精確無(wú)誤、安全快速等優(yōu)勢(shì)，可獲取最佳的檢測(cè)效果[2]。為了分析電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)血清HCG效果，本研究選取60份正常女性血清標(biāo)本分別采取電化學(xué)發(fā)光法與放射免疫分析法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年3月～2014年3月吉安市中心人民醫(yī)院收集的60份正常女性血清標(biāo)本，標(biāo)本采集人群均知情，并簽訂同意書(shū)。在檢測(cè)中采取全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀、GC-911型-放射免疫計(jì)數(shù)器、電化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑、放射免疫分析試劑進(jìn)行檢測(cè)血清標(biāo)本，同時(shí)進(jìn)行對(duì)照血清標(biāo)本。

1.2 方法 孕婦入院后，第2天清晨抽取空腹靜脈血，于低溫下將血清分為兩份，制作血清編號(hào)后，將血清保存到冰箱里面。同時(shí)，遵循嚴(yán)格的儀器操作規(guī)范與試劑使用說(shuō)明書(shū)，逐一選擇電化學(xué)發(fā)光法與放射免疫法檢測(cè)。

1.2.1 靈敏度檢測(cè) 采取5份標(biāo)本血清均勻性溶解，將儀器尺度調(diào)整為零，采取電化學(xué)發(fā)光法與放射免疫法分別檢測(cè)樣品30次，并進(jìn)行測(cè)定記錄結(jié)果。低限（LID）的計(jì)算，按照LID=均值BIK+2SBIK的公式[3]。獲取計(jì)算結(jié)果后，可知電化學(xué)發(fā)光法LID、放射免疫法LID分別為0.05mIU/L、0.10mIU/L。于低溫下保存標(biāo)本，進(jìn)行解溶對(duì)照品血清，根據(jù)低限實(shí)施定性判斷，分析并統(tǒng)計(jì)檢測(cè)靈敏度、特異度。

1.2.2 線性關(guān)系測(cè)定 將5份標(biāo)本血清進(jìn)行測(cè)定混合解溶后，取其平均值作為理論檢測(cè)值，將標(biāo)本血清梯度稀釋后構(gòu)建8個(gè)梯度濃度。根據(jù)混合血清理論平均值，計(jì)算不同梯度濃度理論檢測(cè)值，選擇兩種檢測(cè)方法進(jìn)行稀釋血清，重復(fù)記錄每個(gè)梯度濃度多次[4]。獲取實(shí)際檢測(cè)值的平均值，全面參考理論檢測(cè)值、實(shí)際檢測(cè)值，綜合判定兩種檢測(cè)方法的線性關(guān)系。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)采取SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，正態(tài)計(jì)量資料采用“x±s”表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計(jì)數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 2種檢測(cè)方法的定性檢測(cè)結(jié)果比較 電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)標(biāo)本、放射免疫法檢測(cè)標(biāo)本血清檢測(cè)陽(yáng)性分別為59份和57份，兩種檢測(cè)方法的對(duì)照血清全部檢測(cè)為陰性。見(jiàn)表1。

表1 兩種檢測(cè)方法定性檢測(cè)結(jié)果比較

2.2 2種檢測(cè)方法的敏感度與特異度比較 電化學(xué)發(fā)光法敏感度、特異度分別為100.00%和98.33%，與放射免疫法的100.00%和96.67%對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 2種檢測(cè)方法敏感度與特異度比較（%）

2.3 直線回歸分析 分析直線回歸，電化學(xué)發(fā)光法直線回歸方程Y=0.957X+10.4，b=214，內(nèi)線性關(guān)系良好范圍為在（0～1498）mIU/mL，放射免疫法的直線回歸方程Y=1.046X+3.262，b=204，內(nèi)線性關(guān)系良好范圍為（0～1020）mIU/mL，與放射免疫法對(duì)比，電化學(xué)發(fā)光法線性關(guān)系范圍明顯更寬。

3 討論

HCG作為一種肽類(lèi)激素，其分泌主要來(lái)源于妊娠女性孕胎盤(pán)滋養(yǎng)層細(xì)胞，且分泌至母體血液的可能性相當(dāng)高。血清濃度于妊娠早期升高較快，在早期便可檢測(cè)[5]。目前，HCG被公認(rèn)為早期妊娠的敏感指標(biāo)。激素及糖蛋白等血清過(guò)程中廣泛應(yīng)用放射免疫方法，此方法通過(guò)利用同位素標(biāo)記的抗原，與抗體之間產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)性抑制反應(yīng)。部分文獻(xiàn)表明[6]，放射免疫法受血清相關(guān)雜質(zhì)的影響較大，結(jié)果會(huì)受到其他結(jié)構(gòu)類(lèi)似的激素干擾。另外，放射免疫法操作繁瑣，需要消耗更長(zhǎng)的時(shí)間，不合適應(yīng)用于大規(guī)模的普查檢測(cè)。電化學(xué)發(fā)光法作為一種新型的方法，在血清學(xué)檢測(cè)中得到了廣泛的應(yīng)用，主要采取單克隆抗體作為免疫標(biāo)記，可獲取滿意的檢測(cè)結(jié)果[7]。整個(gè)檢測(cè)中具有自動(dòng)化特征，無(wú)需手工操作，數(shù)據(jù)處理效率高，充分體現(xiàn)出迅速、精確、可重復(fù)等優(yōu)勢(shì)，被廣泛應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)中。以上研究表明，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)標(biāo)本、放射免疫法檢測(cè)標(biāo)本血清檢測(cè)陽(yáng)性分別為59份和57份，兩種檢測(cè)方法的對(duì)照血清全部檢測(cè)為陰性。2組檢測(cè)結(jié)果的判定及參考價(jià)值相當(dāng)[8]，但與放射免疫法對(duì)比，電化學(xué)發(fā)光法線性關(guān)系范圍明顯更寬，表明在血清HCG極度升高的情況下，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)精確性高于放射免疫法。Tallent等[9]報(bào)道，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)精確性明顯優(yōu)于放射免疫法，其檢測(cè)范圍內(nèi)線性關(guān)系更為良好。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光法的操作具有簡(jiǎn)單方便、報(bào)告范圍寬、敏感度與特異性良好等優(yōu)勢(shì)特征，實(shí)現(xiàn)自動(dòng)控制精度，尤其適用于樣本量較大的普查中。

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.15.047

江西 343000 江西省吉安市中心人民醫(yī)院（張斕）