劉先勇 田麗娟 鄭桂平 羅愛蓮

HPV在宮頸炎、宮頸癌前病變、宮頸癌中的檢測及意義分析

劉先勇 田麗娟 鄭桂平 羅愛蓮

目的 分析HPV在宮頸炎、宮頸癌前病變、宮頸癌中的檢測及意義。方法 選取72例宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌患者做為此次試驗研究對象，其中宮頸炎24例，宮頸癌前病變31例，宮頸癌17例。結(jié)果 宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌3組患者HPV陽性率以及HPV水平比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 HPV感染可作為宮頸癌前病變和宮頸癌病變的一個判斷因素，預(yù)防和治療HPV感染可以有效防止宮頸癌的發(fā)生。

人乳頭瘤病毒；宮頸炎；宮頸癌前病變；宮頸癌

宮頸癌是最常見的惡性腫瘤之一，發(fā)病年齡主要集中在30～50歲，近年來患者數(shù)量呈現(xiàn)增長趨勢[1]，且逐漸年輕化，因此逐漸受到重視。HPV稱為人乳頭瘤病毒，是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒，感染后癥狀主要表現(xiàn)為尋常疣、生殖器疣等，主要感染途徑有性行為傳播、密切接觸、間接接觸、醫(yī)源性感染和母嬰傳播等[2]。分析人乳頭瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染與宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌的關(guān)系對臨床治療方案的制定具有重大意義，本研究具體分析了HPV在宮頸炎、宮頸癌前病變、宮頸癌中的檢測及意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對象為2012年6月～2014年6月在上猶縣婦幼保健院接受治療，確診為宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌的患者，隨機(jī)選取72例：宮頸炎24例，宮頸癌前病變31例，宮頸癌17例。患者年齡23～68歲，平均年齡（15.3±11.2）歲，患者均無妊娠、月經(jīng)，4周內(nèi)無性生活，3 d內(nèi)沒有使用陰道藥物。3組患者一般資料差異無統(tǒng)計學(xué)意義,具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 取樣方法 對患者進(jìn)行宮頸脫落細(xì)胞采樣，將宮頸取樣毛刷插入宮頸管內(nèi)，使毛刷中央部分到達(dá)子宮頸口，按照順時針方向轉(zhuǎn)動5次，獲得樣本后，將毛刷浸泡在保存液中，循環(huán)操作數(shù)次后，將宮頸刷在保存液中迅速抖動，使細(xì)胞樣本從毛刷上脫落，并將其保存以供檢測。

1.2.2 檢測方法 對取樣進(jìn)行脫氧核糖核酸(Deoxyribose Nucleic Acid，DNA)提取，將樣品放置在細(xì)胞保存液中，進(jìn)行離心處理后，使用基因組試劑盒對DNA進(jìn)行提取。再對聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction，PCR)進(jìn)行擴(kuò)增，對樣本先進(jìn)行加熱，然后進(jìn)行冰水浴處理。將兩者進(jìn)行雜交處理，在樣品已經(jīng)放置于雜交膜下且有硅膠圈隔離的條件下，將樣品放置在雜交液中進(jìn)行雜交，然后排除雜交液，加入變性DNA溶劑，進(jìn)行混合，再次進(jìn)行雜交，將雜交液沖洗干凈。進(jìn)行顯色處理，在樣品中加入顯色溶液，并將樣品置于顯色器械中進(jìn)行催化，一般3～5 min得到結(jié)果。

1.3 觀察指標(biāo) 使用肉眼觀測，如果呈現(xiàn)清晰的藍(lán)紫色圓點，則HPV為陽性，表示受到HPV感染，否則為陰性，表示未受到感染。使用HPV類型分布圖判斷HPV類型，具體措施如下，觀察膜條HPV分型上得藍(lán)紫色圓點，與對照圖進(jìn)行對比，陽性的HPV樣本將在不同類型HPV對照圖的相應(yīng)位置出現(xiàn)藍(lán)紫色圓點，而陰性的HPV樣本不會出現(xiàn)藍(lán)紫色圓點。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料采用“x±s”表示，計量資料采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸病變患者感染HPV檢驗結(jié)果 根據(jù)宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌3組檢測結(jié)果分析，3組患者HPV陽性率以及HPV水平對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 宮頸病變患者感染HPV檢驗結(jié)果

2.2 宮頸病變患者感染HPV類型比較 感染HPV 16的患者數(shù)量最多，其次是HPV 31和HPV 58，與高危型HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68的分布具有一致性。見表2。

3 討論

據(jù)本研究宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌3組檢測結(jié)果分析，3組患者HPV陽性率以及HPV水平具有明顯差異，其間對比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），可見通過檢測HPV感染可以有效預(yù)防宮頸癌病變。此外，HPV 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68等型號在本次監(jiān)測中出現(xiàn)頻次較高，是高危型病菌，需要在臨床上予以高度重視。HPV檢測也有其局限性，醫(yī)護(hù)人員應(yīng)該不斷深入研究，完善檢測方法，進(jìn)一步提高宮頸疾病的檢測水平，提高防治質(zhì)量。

宮頸癌是一種惡性腫瘤，早期癥狀主要表現(xiàn)為陰道接觸性出血，中晚表現(xiàn)為不規(guī)則地陰道流血，出血量根據(jù)病情不同而不同，并有陰道排液異常，表現(xiàn)為早期液體呈白色或血色，有異味，晚期其為濃稠液體且有膿性惡臭，并發(fā)癥有尿頻、尿急、便秘、下肢腫痛、輸尿管梗阻、腎盂積水及尿毒癥等[3]。宮頸癌患者數(shù)量呈逐年增長的趨勢，且逐漸年輕化，引起了醫(yī)學(xué)界的高度關(guān)注。預(yù)防和篩查宮頸疾病，盡快采取治療措施，防止其惡化，是降低宮頸癌患者數(shù)量的重要方法。

HPV稱為人乳頭瘤病毒，是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤空泡病毒。癥狀主要表現(xiàn)為尋常疣、生殖器疣等癥狀，主要感染途徑有性行為傳播、密切接觸、間接接觸、醫(yī)源性感染和母嬰傳播等[4]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，HPV的持續(xù)感染將會導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生，長時間感染可能導(dǎo)致浸潤瘤的出現(xiàn)[5]。從實驗結(jié)果來看，宮頸炎、宮頸癌前病變和宮頸癌患者絕大部分都感染HPV病毒，本次研究所選72例患者中HPV陽性40例，其中宮頸炎患者4例，感染陽性率為16.7%，宮頸癌前病變患者例23例，感染陽性率為74.2%，宮頸癌患者例13例，感染陽性率為88.2%。宮頸癌的患病是一個漫長的過程，早期宮頸炎逐漸發(fā)展成慢性宮頸炎，如果得不到有效的治療將會發(fā)展為宮頸癌前病變，進(jìn)一步則發(fā)展成宮頸癌[6]。根據(jù)實驗結(jié)果，宮頸炎HPV的感染率較低，但是宮頸癌前病變感染率較高，因此，HPV感染與宮頸癌的發(fā)生關(guān)系密切。在HPV類型中，感染率最高的是HPV 16、HPV 31和HPV 58，該型也屬于高危型HPV，需要加強(qiáng)此類HPV預(yù)防和治療措施的研究。

需要注意的是，HPV的檢測需要對患者進(jìn)行宮頸脫落細(xì)胞采樣，對取樣進(jìn)行DNA提取，再對PCR進(jìn)行擴(kuò)增，將兩者進(jìn)行雜交處理，最后觀察顯色結(jié)果[7-8]，在操作過程中容易受到人為的影響，例如，對患者采樣的位置有偏差，在進(jìn)行DNA提取和PCR擴(kuò)增過程中操作不當(dāng)將會導(dǎo)致檢驗結(jié)果有誤差[9]。因此，在實際操作過程中，應(yīng)該對檢測人員進(jìn)行專業(yè)培訓(xùn)，保證檢測質(zhì)量，同時醫(yī)療工作者應(yīng)該結(jié)合實際操作的經(jīng)驗，改進(jìn)操作流程，使檢測更加規(guī)范，避免結(jié)果的偏差導(dǎo)致臨床上的誤診[10]。

本次研究對宮頸疾病的防治工作具有指導(dǎo)意義，目前我國宮頸疾病預(yù)防機(jī)制并不完善，我國對宮頸疾病篩查沒有明確的科室規(guī)定也是防治工作質(zhì)量不高的重要原因之一。在宮頸疾病防治工作中，要求醫(yī)護(hù)人員重視HPV在宮頸炎、宮頸癌前病、宮頸癌中的檢測結(jié)果，以HPV的檢測情況作為宮頸疾病的判斷標(biāo)準(zhǔn)。普及宮頸疾病的防治知識，要求女性主動配合宮頸癌的篩查工作，實現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早治療。根據(jù)我國宮頸疾病患者的實際情況，建立符合國情的篩查標(biāo)準(zhǔn)，減少宮頸疾病檢查的遺漏現(xiàn)象，有效提高我國宮頸癌防治效率。建立健全的防治機(jī)制，保證女性生活的健康。

表2 宮頸病變患者感染HPV類型檢驗結(jié)果

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10.3969/j.issn.1009-4393.2015.33.011

；江西 341200 上猶縣婦幼保健院檢驗科 （劉先勇 田麗娟 鄭桂平 羅愛蓮）