辛華棟 張莉華 武艷霞 焦茹 吳士茜 袁艷龍

1邯鄲市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲056001

邯鄲市中心醫(yī)院2婦二科，3口腔外科，4體檢中心，5病理科，河北邯鄲056001

COX-2與淋巴結轉移對宮頸癌預后影響的研究

辛華棟1張莉華2#武艷霞2焦茹3吳士茜4袁艷龍5

1邯鄲市第一醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河北邯鄲056001

邯鄲市中心醫(yī)院2婦二科，3口腔外科，4體檢中心，5病理科，河北邯鄲056001

目的研究環(huán)氧合酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）及淋巴結轉移對宮頸癌預后的影響。方法采用免疫組化SP法，檢測95例宮頸癌患者中COX-2的表達情況，并采用生存分析法評估COX-2表達與淋巴結轉移對宮頸癌預后的影響。結果COX-2在95例宮頸癌中的陽性表達率為65.26%（62/95），COX-2的陽性表達與淋巴結轉移、宮旁或脈管浸潤呈正相關（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。生存分析顯示，COX-2陽性表達（P=0.005）、淋巴結轉移（P=0.000）與宮頸癌患者的預后密切相關。結論COX-2及淋巴結轉移是宮頸癌患者預后的獨立影響因素，對判斷預后及指導治療具有重要的臨床價值。

宮頸癌；環(huán)氧合酶-2；淋巴結轉移；預后

Oncol prog,2015,13(4)

環(huán)氧合酶（cyclooxygenase，COX）是前列腺素合成過程中的限速酶，其亞型之一——COX-2在多種惡性腫瘤組織中的表達異常增高。另外，COX-2與腫瘤侵襲和轉移的關系亦越來越受到關注[1]，但國內(nèi)外對COX-2與宮頸癌預后相關性的報道卻較為罕見。淋巴結轉移是宮頸癌主要的轉移途徑之一，與腫瘤的遠處轉移及患者術后復發(fā)密切相關。本研究旨在探討COX-2及淋巴結轉移對宮頸癌患者預后的影響。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選取2008年6月至2009年10月住院治療的宮頸癌患者95例，所有病例均經(jīng)確診且臨床資料完整，無并發(fā)其他惡性腫瘤及心腦血管疾病。患者年齡為27～80歲，中位年齡42歲。按照2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟（Federation International of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO）宮頸癌臨床分期標準診斷為Ⅰ期的患者有22例，Ⅱ期43例，Ⅲ～Ⅳ期30例。按照病理分型診斷為高、中、低分化者分別為16例、49例及30例。其中鱗癌77例，腺癌11例，腺棘細胞癌5例，小細胞未分化癌1例，透明細胞癌1例。所有病理結果均經(jīng)兩位資深病理科醫(yī)生確診。

1.2 研究方法

采用免疫組化SP法進行檢測。羊抗人COX-2多克隆抗體、即用型羊SPkate檢測試劑盒、DAB顯色試劑盒、SP試劑盒均購自北京中山生物技術有限公司。參照陽性細胞百分比及陽性細胞染色強弱進行免疫組化評分（immunohistochem ical scores，IHS）[2]：IHS=a×b（a，代表陽性細胞百分比：a=0，無陽性細胞；a=1，陽性細胞為1%～10%；a= 2，陽性細胞為11%～50%；a=3，陽性細胞為51%～80%；a=4，陽性細胞≥81%。b，代表陽性細胞染色強弱：b=0，陰性；b=1，弱陽性；b=2，中度陽性；b=3，強陽性）。IHS為0分計為陰性；≥1分計為陽性。以已知的COX-2表達陽性的肺癌切片作為對照。

1.3 隨訪

通過電話、門診復查、書信等方式對患者進行隨訪，從確診之日起至2014年10月結束隨訪，隨訪時間為8.6～76個月。95例宮頸癌患者失訪3例，死亡26例，其中9例死于局部復發(fā)，8例死于遠處轉移，7例死于局部復發(fā)并發(fā)遠處轉移，1例死于心肌梗死，1例死于腦出血。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計學軟件進行分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗；雙變量相關分析采用Pearson相關檢驗；繪制生存曲線采用Kaplan-Meier法；兩組間生存狀況的比較采用Log-rank檢驗。

2 結果

2.1 COX-2在宮頸癌中的表達

COX-2陽性表達為胞質(zhì)內(nèi)可見棕黃色或棕褐色的顆粒。在95例原發(fā)宮頸癌患者中，COX-2表達陽性的患者為62例（65.26%）。在有無淋巴結轉移患者中的陽性表達率分別為78.4%（29/37）及56.9%（33/58），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.598，P= 0.032）。在有無宮旁或脈管浸潤患者中的陽性表達率分別為81.5%（22/27）及58.8%（40/68），差異有統(tǒng)計學意義（χ2=4.377，P=0.036）。COX-2的陽性表達與淋巴結轉移、宮旁或脈管浸潤呈正相關（r=0.220，P=0.032；r=0.215，P=0.037）。（圖1）

2.2 宮頸癌預后的單因素分析

COX-2表達陽性和陰性患者的生存狀況見圖2，COX-2陰性的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于COX-2陽性的患者（P=0.005）；有無淋巴結轉移患者的生存狀況見圖3，無淋巴結轉移的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于有淋巴結轉移的患者（P= 0.000）。

3 討論

圖3 COX-2在宮頸癌中的表達

COX-2是花生四烯酸合成前列腺素的重要限速酶，在大多數(shù)組織中不表達或低表達，但在炎性介質(zhì)、生長因子、促癌因素、內(nèi)毒素、癌基因等作用下短時間內(nèi)表達迅速增加，被稱為誘導型即刻反應基因。COX-2通過促進細胞增殖、抑制細胞凋亡、誘導新生腫瘤血管形成、介導細胞間黏附異常、降解細胞外基質(zhì)、參與腫瘤免疫逃逸等機制增強腫瘤細胞浸潤及轉移等惡性潛能[3]，并影響患者的預后[4]。Saba等[5]對頭頸部腫瘤的研究結果顯示，COX-2的表達與總生存時間有關，COX-2高表達患者5年生存時間顯著低于COX-2低表達者。在一項宮頸癌的多因素分析研究中顯示[6]，COX-2、淋巴結轉移、宮旁浸潤或脈管瘤栓與預后顯著相關；COX-2陽性組的宮頸癌患者3年生存時間明顯短于陰性組患者。該結果與本研究的結果一致。本研究中COX-2陰性組的宮頸癌患者5年生存率顯著優(yōu)于COX-2陽性組，提示COX-2的表達與宮頸癌患者的預后密切相關。COX-2作為一項預后指標，對評估病情、指導治療及監(jiān)測預后發(fā)揮了積極的作用。本研究為COX-2分子靶向治療提供了實驗依據(jù)，已有學者對此進行了初步探討[7]。

圖2 COX-2表達陰性和陽性宮頸癌患者的生存曲線

圖3 有無淋巴結轉移宮頸癌患者的生存曲線

大量的文獻表明[3-5]，腫瘤的局部浸潤及淋巴結轉移與患者的5年生存率密切相關。本研究的結果顯示，淋巴結轉移明顯影響宮頸癌患者的的預后。張莉華等[6]和劉平等[8]進行宮頸癌Cox比例風險模型分析，結果支持以上觀點，認為淋巴結轉移是宮頸癌的獨立預后因素。在惡性腫瘤組織中，因新生血管及淋巴管生長迅速、密集而紊亂，以及多種細胞因子及酶類表達異常，使細胞間接觸抑制減弱、基底膜溶解或破壞而致新生淋巴管及血管管壁結構不完整，細胞間隙擴大，不能阻止癌細胞的侵入，從而促使癌細胞通過脈管系統(tǒng)向周圍淋巴結及遠處轉移。在腫瘤組織切片中可見到未成熟的淋巴管內(nèi)成簇的腫瘤細胞。本研究中有淋巴結轉移的宮頸癌患者5年生存率顯著低于無淋巴結轉移的患者，再次證明了宮頸癌經(jīng)淋巴結轉移及脈管浸潤的惡性生物學行為。

本研究顯示，COX-2在有淋巴結轉移組及有宮旁或脈管浸潤組中的陽性表達率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。COX-2分別與淋巴結轉移及宮旁或脈管浸潤進行相關性分析，結果均呈正相關（P＜0.05），由此推測COX-2、淋巴結轉移、宮旁或脈管浸潤在宮頸癌中可能通過某些機制協(xié)同發(fā)揮作用。在對卵巢癌、非小細胞肺癌及大腸癌的研究中亦顯示COX-2與淋巴結轉移密切相關[9-11]。血管內(nèi)皮生長因子-C（vascular endothelial grow th factor C，VEGF-C）是重要的促淋巴管生長因子，VEGF-C mRNA是影響盆腔淋巴結轉移的獨立因素[12]。COX-2和VEGF-C的表達與多種腫瘤的發(fā)生呈正相關，也是和預后相關的獨立因素[13-14]。本研究的結果表明，COX-2通過多種分子機制上調(diào)VEGF-C的表達，誘導實體瘤瘤內(nèi)或腫瘤周圍的淋巴管生成和擴張，促進惡性腫瘤的淋巴結轉移。另有研究顯示，COX-2通過多種分子途徑誘導促血管生成因子表達上調(diào)，促使血管內(nèi)皮細胞移位，并抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡，從而促進腫瘤細胞的浸潤和轉移[15]。本研究得出結論，COX-2、淋巴結轉移及宮旁或脈管浸潤在分子水平通過多因素、多途徑、多步驟協(xié)同的機制發(fā)揮著復雜的作用，進一步增強了腫瘤細胞的侵襲性，對宮頸癌的預后具有重要的臨床意義。

綜上所述，COX-2的表達與淋巴結轉移、宮旁或脈管浸潤呈正相關，是宮頸癌的獨立預后因素。在美國國家綜合癌癥網(wǎng)絡（National Comprehensive Cancer Network，NCCN）指南的臨床分期中，淋巴結轉移雖然對腫瘤分期無影響，但卻是影響宮頸癌預后最顯著的因素。在治療前應進行MRI等輔助檢查，全面評估患者的病情及淋巴結轉移情況，并制訂周密的治療方案，手術宜徹底、規(guī)范地切除宮旁組織及淋巴結，確定個體化的放療劑量及照射野，這些均有利于提高宮頸癌患者的生存率。COX-2與宮頸癌的浸潤、轉移及預后密切相關，可作為宮頸癌預后的監(jiān)測指標之一，并可用于指導臨床治療。COX-2抑制劑作為宮頸癌治療的新靶點，具有一定的應用前景，但還需要更多的體外試驗及臨床試驗進一步論證其應用價值。

［1］Cheng J，F(xiàn)an XM.Role of cyclooxygenase-2 in gastric cancer development and progression[J].World JGastroenterol,2013,19(42):7361-7368.

［2］歐陽艷瓊,吳緒峰,陳惠禎,等.宮頸癌組織中環(huán)氧合酶-2和誘生型一氧化氮合酶的表達及其意義[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展,2003,12(5):363-366.

［3］Stasinopoulos I,Shah T,Penet MF,et al.COX-2 in cance:Gordian knot or Achilles heel[J].Front,Pharmacol,2013,28(4):34.

［4］Yao L,Liu F,Hong L,et al.The function and mechanism of COX-2 in angiogenesis of gastric cancer cells [J].JExp Clin Cancer Res,2011,25(30):13.

［5］Saba NF,Choi M,Muller S,et al.Role of Cyclooxygenase-2 in tumor progression and survival of head and neck squamous cell carcinoma[J].Cancer Prev Res, 2009,2(9):823-829.

［6］張莉華,辛華棟,李麗,等.宮頸癌預后影響因素的臨床分析及研究[J].中國熱帶醫(yī)學,2013,13(10): 1272-1274.

［7］Kim N,Kim CH,Ahn DW,et al.Anti-gastric cancer effects of celecoxib,a selective COX-2 inhibitor,through inhibition of Akt signaling[J].J Gastroenterol Hepatol, 2009,24:480-487.

［8］劉平,段愛紅,張莉華,等.環(huán)氧合酶-2對宮頸癌患者預后的影響[J].河北醫(yī)藥,2013,35(11):1686-1688.

［9］任芳,林杉,史惠蓉,等.環(huán)氧合酶-2和HER-2/neu蛋白在卵巢上皮性癌中的表達及其臨床意義[J].中國計劃生育和婦產(chǎn)科,2013,5(2):59-63.

［10］牛艷清.NSCLC中COX-2和CD44v6的表達與淋巴結轉移關系[J].長治醫(yī)學院學報,2014,28(3):178-180.

［11］鄔黎青.大腸癌組織VEGF-C、COX-2、Flt-4及mn23表達與淋巴管生成及淋巴結轉移的關系[J].細胞與分子免疫學雜志,2010,26(6):597-598.

［12］石小燕,張亞東,趙良平,等.早期宮頸癌組織中VEGF-C、COX-2的表達及相關性[J].華中科技大學學報(醫(yī)學版),2013,42(3):307-310.

［12］Gou HF,Chen XC,Zhu J,et al.Expressions of COX-2 and VEGF-C in gastric cancer:correlations w ith lymphangiogenesis and prognostic implications[J].J Exp Clin Cancer Res,2011,30:14-21.

［14］Rabindra NB,A lexander VT,Jing C,et al.Relationship between Cyclooxygenase-2 and human epidermal growh factor receptor 2 in vascular endothelial grow th factor C up-regulation and lymphangiogenesis in human breast cancer[J].Cancer Sci,2010,101(9):2026-2032.

［13］Mariani F,Sena P,Marzona L,et al.Cyclooxygenase-2 and Hypoxia-Inducible Factor-1 alpha protein expression is related to inflammation,and up-regulated since the early steps of colorectal carcinogenesis[J].Cancer Lett, 2009,27(9):221-229.

Effectsof COX-2 and lymph-nodemetastasison prognosisof cervical cancer

XIN Hua-dong1ZHANG Li-hua2#WU Yan-xia2JIAO Ru3WU Shi-qian4YUAN Yan-long51Departmentof Neurology of Handan Municipal FirstHospital,Handan 056001,Hebei,China2Second Departmentof Gynecology,3Departmentof OralSurgery,4MedicalExam ination Center,5Departmentof Pathology of Handan MunicipalCentralHospital,Handan 056001,Hebei,China

Objective To study the effects of COX-2 and lymph-nodemetastasis on the prognosis of cervical cancer.MethodThe expression of COX-2 was identified by immunohistochemically S-PMethodin the paraffin sections,and survival analysis was applied to evaluated the effect of COX-2 expression and lymph-node metastasis on the prognosis of cervical cancer,while Kaplan-Meier plots provided.ResultThe positive expression rate of COX-2 was 65.26%(62/95)in 95 patients w ith cervical cancer,which was positively associated w ith lymph-nodemetastasis and latero-uterus or vessel infiltration(r=0.220,P=0.032;r=0.215,P=0.037,respectively).Survival analysis indicated that positive expression of COX-2 and lymph-nodemetastasis were both closely related w ith the prognosis of cervical cancer(P=0.005;P=0.000,respectively).ConclusionCOX-2 and lymph-node metastasis are independent prognosis factors in cervical cancer,whichmay serve as predictorsw ith clinical importance.

cervical cancer；COX-2；lymph-nodemetastasis；prognosis

R737.3

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2015.13.04.19

#通信作者（corresponding author），e-mail：drabing@163.com

2015-03-12）