李萱，張莉，劉穎群

(1.江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 病理教研室，江西 上饒 334000；2.上饒市人民醫(yī)院 病理科，江西 上饒 334000；3.江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 婦產(chǎn)科，江西 上饒 334000)

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鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案對(duì)宮頸癌患者宮頸上皮組織Bcl-2及MACC1蛋白表達(dá)的影響

李萱1,2Δ，張莉3，劉穎群2

(1.江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 病理教研室，江西 上饒 334000；2.上饒市人民醫(yī)院 病理科，江西 上饒 334000；3.江西醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 婦產(chǎn)科，江西 上饒 334000)

目的 探討鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案對(duì)宮頸癌患者宮頸上皮組織B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)及結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(metastasis-associated in colon cancer-1，MACC1)蛋白表達(dá)的影響。方法 選取2010年1月～2013年1月在上饒市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科接受治療的100例宮頸癌患者為研究對(duì)象，所有患者均采用鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療，對(duì)比患者化療前后的臨床效果及宮頸上皮組織中的Bcl-2和MACC1蛋白的表達(dá)。結(jié)果 宮頸癌患者以鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案進(jìn)行化療后，臨床總有效率占75.0%(75/100)?；熀驜cl-2、MACC1的表達(dá)以及高表達(dá)率較化療前均顯著降低(均P<0.05)。臨床有效組中Bcl-2、MACC1在化療后的高表達(dá)情況較化療前顯著降低(均P<0.05)；臨床無效組中Bcl-2、MACC1在化療后的高表達(dá)情況較化療前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 采取宮頸癌患者以鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案進(jìn)行化療后，宮頸癌患者宮頸上皮組織中Bcl-2 與MACC1的表達(dá)顯著降低，臨床效果明顯。

伊立替康；順鉑；宮頸癌；Bcl-2；MACC1

宮頸癌是目前臨床上一種較為常見的婦科惡性腫瘤，據(jù)調(diào)查顯示，宮頸癌發(fā)病率和死亡率均隨著年齡的增加而增加，且其發(fā)病呈現(xiàn)明顯的年輕化趨勢(shì)，女性應(yīng)重點(diǎn)預(yù)防的惡性腫瘤[1]。目前已有研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生與原癌基因的激活、抑癌基因的失活、環(huán)境因素、遺傳因素等多種因素有關(guān)[2]。目前，在臨床上對(duì)宮頸癌患者實(shí)施治療的過程中， 常用的治療方法主要還是以手術(shù)治療為主，化療為輔[3]。因此本文探討鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案對(duì)宮頸癌患者宮頸上皮組織B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)及結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移相關(guān)基因1(metastasis-associated in colon cancer-1，MACC1)表達(dá)的影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2010年1月～2013年1月在上饒市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科接受治療的100例宮頸癌患者為研究對(duì)象，其中年齡在25～70歲，平均年齡(45.8±8.3)歲。本研究經(jīng)過倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)患者及其家屬同意該治療方案并簽署知情同意書；②所有患者在化療前行宮頸組織活檢術(shù)，活體組織病理玻片檢查證實(shí)為宮頸癌；③所有患者臨床資料完整，來本院治療前均未采取放療、化療或者生物治療等任何治療；④治療前無嚴(yán)重合并癥，常規(guī)檢查提示肝腎功能良好，血液檢查血象結(jié)果(骨髓貯備)、凝血功能良好；⑤無明顯化療禁忌癥。排除標(biāo)準(zhǔn)：肝腎功能嚴(yán)重不全者；有宮頸癌治療史者；有化療禁忌癥者。

根據(jù)活檢術(shù)結(jié)果，其中病理分類為宮頸鱗癌患者80例，宮頸腺癌的患者 20例；根據(jù)最新國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)合會(huì)(The International Federation of Gynecology and Obstetrics，F(xiàn)IGO)，其中臨床分期為IB2期31例，IIB1期22例，IIB2期26例，IIA2期21例。

1.2 方法

1.2.1 具體化療方法如下：鹽酸伊立替康(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20020687)60 mg/m2，在治療后的第1天、第8天以及第15天的同一時(shí)間注射1 h；順鉑(江蘇康緣藥業(yè)有限公司，注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)JX20090030)為60 mg/m2，根據(jù)靜脈注射的方式于治療的第1天使用，注射時(shí)間為4 h。治療15 d

1.2.2 觀察指標(biāo)：①臨床有效率：根據(jù)RECIST國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)[4-5]評(píng)定2組患者的臨床有效率，評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)為：完全緩解(complete response，CR)，自基線評(píng)估后所有目標(biāo)病灶消失；部分緩解(partial response，PR)，和基線期相比，目標(biāo)病灶最長(zhǎng)徑之和總至少減少30%；疾病進(jìn)展(progressive disease，PD)，與治療開始以來所記錄的最小長(zhǎng)徑之和相比，目標(biāo)病灶最長(zhǎng)徑之和至少增加20%，出現(xiàn)一個(gè)或多個(gè)新病灶；疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)，與治療開始以來所記錄的最小長(zhǎng)徑之和相比，既不符合PD又不符合PR評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。有效=CR+PR，無效=SD+PD；

② 免疫組化檢測(cè)宮頸上皮組織中Bcl-2和MACC1蛋白表達(dá)：所有患者在接受治療前后行宮頸組織活檢術(shù)取宮頸上皮組織切片，并采用免疫組化SP(streptavidin-perosidase)法，即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結(jié)法檢測(cè)宮頸上皮組織中Bcl-2和MACC1蛋白的表達(dá)(試劑盒購(gòu)自上海雅吉生物科技有限公司，并嚴(yán)格按照說明書操作)。MACC1和Bcl-2免疫組化染色以細(xì)胞質(zhì)核膜內(nèi)呈現(xiàn)黃色顆粒為陽性表達(dá)。結(jié)果采用半定量標(biāo)準(zhǔn)：即陰性(-)，無陽性細(xì)胞；弱陽性(+)，陽性細(xì)胞<25%；中度陽性(++)，陽性細(xì)胞25%～50%之間；強(qiáng)陽性(+++)，陽性細(xì)胞≥50%。其中，陽性細(xì)胞數(shù)≥50%的稱為高表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS19.0軟件分析，計(jì)數(shù)資料采用[n(%)]表示，2組間比較進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn)。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 宮頸上皮組織中Bcl-2和MACC1蛋白的表達(dá) 宮頸上皮組織中Bcl-2和MACC1蛋白的表達(dá)情況見圖1。

A：Bcl-2表達(dá) B:MACCI表達(dá)圖1 宮頸癌患者宮頸上皮組織中Bcl-2和MACC1蛋白的表達(dá)(×300)Fig.1 Expression of Bcl-2 and MACC1 protein levels in cervical epithelial tissue of patients with uterine cervix cancer(×300)

2.1 化療后不同病理分類及臨床分期的療效情況 行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后，總有效率為75.0%(75/100)，總無效率為25.0%(25/100)?；熀蟛煌±矸诸惣芭R床分期的療效情況，見表1。

表1 100例患者化療后病理分類及臨床分期的療效[n(%)]Tab.1 Efficacy of 100 cases of pathological classification and clinical stages post-chemotherapy[n(%)]

2.2 Bcl-2、MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后的表達(dá)情況對(duì)比 在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后Bcl-2、MACC1蛋白表達(dá)較化療前顯著降低(P<0.05)。見表2。

表2 Bcl-2、MACC1蛋白在化療前后表達(dá)水平對(duì)比(n)Tab.2 Comparison of expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment(n)

2.3 Bcl-2、MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后的高表達(dá)情況對(duì)比 Bcl-2和MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后的高表達(dá)率較化療前顯著降低(均P<0.05)。見表3。

表3 Bcl-2、MACC1蛋白在化療前后的高表達(dá)水平對(duì)比[n(%)]Tab.3 Comparison of high expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment[n(%)]

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment

2.4 不同臨床療效組的宮頸上皮組織中Bcl-2、MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后表達(dá)情況 經(jīng)治療后，100例宮頸癌患者有75例判定為臨床有效，25例為臨床無效。臨床有效組中Bcl-2、MACC1在化療后的高表達(dá)情況較化療前顯著降低(均P<0.05)；臨床無效組中Bcl-2、MACC1在化療后的高表達(dá)情況較化療前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表4。

表4 不同臨床療效組患者Bcl-2、MACC1蛋白在化療前后表達(dá)水平比較[n(%)]Tab.4 Comparison of expression levels of Bcl-2 and MACC1 protein pre-and post-treatment between different efficacy groups

*P<0.05，與治療前比較，compared with pre-treatment

3 討論

宮頸癌是目前臨床上一種常見的婦科疾病，宮頸癌的發(fā)病是個(gè)漫長(zhǎng)且復(fù)雜的過程，與細(xì)胞凋亡以及抑癌基因的調(diào)控和癌基因的表達(dá)均相關(guān)[6]，隨著長(zhǎng)期以來對(duì)細(xì)胞凋亡的深入研究發(fā)現(xiàn)，Bcl-2基因的表達(dá)產(chǎn)物是強(qiáng)有力的細(xì)胞凋亡抑制蛋白，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡機(jī)制紊亂而促使宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展[7]。而MACC1是由科研工作者通過對(duì)結(jié)腸癌的原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移灶以及正常結(jié)腸組織進(jìn)行全基因組表達(dá)譜分析，最終確定的一種新發(fā)現(xiàn)的致癌基因[8]。MACC1在多個(gè)惡性腫瘤(結(jié)腸癌、宮頸癌、乳腺癌等)中高表達(dá)，其異常高表達(dá)與良性病變轉(zhuǎn)變成惡性組織密切相關(guān)[9-10]。經(jīng)文獻(xiàn)報(bào)道，在白血病和淋巴瘤患者中首次發(fā)現(xiàn)Bcl-2蛋白是一種對(duì)細(xì)胞凋亡具有抑制作用的基因[11]。后來經(jīng)許多研究者通過臨床機(jī)制研究的深入鉆研證實(shí)，Bcl-2抑制細(xì)胞凋亡的機(jī)制是通過抑制封閉細(xì)胞核的運(yùn)轉(zhuǎn)以及細(xì)胞內(nèi)鈣離子含量的上升和抗氧化作用進(jìn)而達(dá)到抑制細(xì)胞凋亡的作用[12]，Lee等[13]研究發(fā)現(xiàn)Bcl-2的過度表達(dá)則使得受損細(xì)胞無法正常凋亡而抑制細(xì)胞凋亡。目前臨床研究表明，MACC1不僅能通過結(jié)合c-Met啟動(dòng)子，進(jìn)而進(jìn)行一系列的誘導(dǎo)，而最終導(dǎo)致細(xì)胞增長(zhǎng)，上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，血管生成，細(xì)胞運(yùn)動(dòng)，侵襲和轉(zhuǎn)移[14]，還可以激活下游靶細(xì)胞基因MAPK信號(hào)通路，進(jìn)而激活MACC1啟動(dòng)子，最終導(dǎo)致促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖分裂[15]。既然Bcl-2和MACC1與宮頸癌關(guān)系密切，因此本文通過對(duì)比宮頸癌患者行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案前后宮頸上皮組織Bcl-2及MACC1的表達(dá)情況，探討該化療方案對(duì)宮頸癌的具體影響。

在本次試驗(yàn)中，100例宮頸癌患者經(jīng)應(yīng)用鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后，臨床治療有效率占75.0%(75/100)，總無效率占25.0%(25/100)。通過免疫組化對(duì)100例宮頸癌患者在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，Bcl-2、MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后表達(dá)較化療前顯著性降低(均P<0.05)，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)， Bcl-2和MACC1在行鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后的高表達(dá)率較化療前顯著性降低(均P<0.05)。本研究還比較了Bcl-2及MACC在不同臨床療效組中鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療前后的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)臨床有效組中Bcl-2、MACC在化療后的高表達(dá)情況較化療前顯著性降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)；臨床無效組中Bcl-2、MACC1在化療后的高表達(dá)情況較化療前差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，由此本研究認(rèn)為Bcl-2與MACC1的表達(dá)情況可能與化療療效有關(guān)，宮頸癌患者宮頸上皮組織局部相對(duì)高濃度的化療藥物可能通過抑制 Bcl-2與MACC1的表達(dá)從而增加腫瘤細(xì)胞的凋亡，減少腫瘤血管的生成，縮小局部腫瘤的體積，增加了手術(shù)的機(jī)會(huì)。因此本研究認(rèn)為 Bcl-2 與MACC1有可能成為鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療的療效評(píng)價(jià)指標(biāo)。

綜上所述，宮頸癌患者以鹽酸伊立替康聯(lián)合順鉑方案化療后，宮頸癌患者宮頸上皮組織中Bcl-2 與MACC1的表達(dá)顯著性降低，臨床效果明顯，近期療效良好。

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(編校：王儼儼)

Effect of irinotecan hydrochloride combined with cisplatin on Bcl-2 and MACC1 protein expressions in cervical epithelial tissue of cervical cancer patients

LI Xuan1,2Δ, ZHAGN Li3, LIU YING-qun2

(1. Department of Pathology, Jiangxi Medical College, Shangrao 334000, China; 2. Department of Pathology, Shangrao City People’s Hospital, Shangrao 334000, China; 3. Department of Obstetrics and Gynecology, Jiangxi Medical College, Shangrao 334000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of irinotecan hydrochloride combined with cisplatin on B-cell lymphoma-2 (Bcl-2) and metastasis-associated in colon cancer-1 (MACC1) protein expressions in cervical epithelial tissue of cervical cancer patients.Methods100 patients with cervical cancer from January 2010 to January 2013 in Department of Obstetrics and Gynecology of Shangrao City People’s Hospital were selected as objects. All patients were treated with irinotecan hydrochloride and cisplatin for combination chemotherapy. The clinical effect and the protein expressions of Bcl-2 and MACC1 of cervical epithelial tissue were compared pre-and post-chemotherapy.ResultsThe total efficiency was 75.0%(75/100) after cervical cancer patients were given irinotecan hydrochloride combined with cisplatin chemotherapy program. The expressions and high expression rates of Bcl-2 and MACC1 post-chemotherapy were significantly lower than that pre-chemotherapy(P< 0.05) . In clinically effective group, the high expression rates of Bcl-2 and MACC1 post-chemotherapy significantly reduced than pre-treatment (P<0.05), and in clinical invalid group, the difference of the high expression rates of Bcl-2 and MACC1 had no statistically significant.ConclusionAfter combination chemotherapy with irinotecan hydrochloride and cisplatin on cervical cancer, the expression of Bcl-2 and MACC1 in cervical epithelial tissue significantly reduce, and the clinical efficacy is aignificant.

irinotecan hydrochloride; cisplatin; cervical cancer; Bcl-2; MACC1

2012年國(guó)家醫(yī)學(xué)教育發(fā)展中心課題項(xiàng)目(2012-28-07-033)

李萱，通信作者，女，碩士，講師，主治醫(yī)師，研究方向：病理學(xué)教學(xué)及科研，E-mail：licuanxuan@163.com。

R737.33

A

1005-1678(2015)11-0086-04