孔紅梅，李宗枝

(1.山東省日照市皮膚病醫(yī)院 藥劑科，山東 日照 276800；2.山東省日照市皮膚病醫(yī)院 美容科，山東 日照 276800)

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三白沖劑對白癜風(fēng)患者的影響研究

孔紅梅1，李宗枝2

(1.山東省日照市皮膚病醫(yī)院 藥劑科，山東 日照 276800；2.山東省日照市皮膚病醫(yī)院 美容科，山東 日照 276800)

目的 探討三白沖劑對白癜風(fēng)患者的影響。方法 選取本院2013年8月～2014年12月確診為白癜風(fēng)的患者180例，根據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為2組：對照組90例，予甲氧沙林片10 mg，1次/天口服，服藥后2 h進(jìn)行日光照射，聯(lián)合復(fù)方卡力孜然酊及鹵米松適量外用等常規(guī)治療；實(shí)驗(yàn)組90例，在常規(guī)治療的基礎(chǔ)上加服三白沖劑。觀察2組患者血清中酪氨酸酶活性、黑素生成量、臨床療效和皮膚新生片數(shù)。結(jié)果 與對照組比較，實(shí)驗(yàn)組患者血清中酪氨酸酶活性、黑素生成量均高于對照組(P<0.05)；臨床癥狀改善的總有效率高于對照組(P<0.05)；皮膚新生片數(shù)顯著多于對照組(P<0.05)。結(jié)論 三白沖劑能夠有效提高白癜風(fēng)患者的酪氨酸酶活性和黑素生成量，對治療白癜風(fēng)具有重要意義。

三白沖劑；白癜風(fēng)；酪氨酸酶；黑素；臨床療效；皮膚新生片數(shù)

白癜風(fēng)是一種臨床上常見的皮膚或粘膜色素脫失的損容性疾病，其發(fā)病特點(diǎn)是皮膚白斑大小不等、形態(tài)各異，邊界清楚，可發(fā)病于任何部位[1]。在我國，白癜風(fēng)的發(fā)病率大約為0.1%～0.2%，可見于任何年齡，無明顯的性別差異，有色人種發(fā)病率高于白種人，目前研究尚未發(fā)現(xiàn)白癜風(fēng)可對機(jī)體組織器官、系統(tǒng)產(chǎn)生直接的損害。關(guān)于白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制尚不明確，多認(rèn)為其可能與遺傳、內(nèi)分泌、神經(jīng)免疫、精神因素及環(huán)境等因素有關(guān)[2]。目前白癜風(fēng)的治療尚無有效方法，臨床上根據(jù)患者發(fā)病年齡、皮損類型及病情程度等，予以內(nèi)服甲氧沙林、皮膚刺激劑局部外涂、照射紫外線等對癥治療，并未達(dá)到滿意的治療效果。白癜風(fēng)屬于中醫(yī)“白駁風(fēng)”的范疇，其主要致病機(jī)制是肝氣郁結(jié)，或肝腎不足，或氣血不足、瘀血阻絡(luò)，導(dǎo)致氣血失和，肌膚失養(yǎng)引發(fā)白癜風(fēng)。中醫(yī)治療白癜風(fēng)有著獨(dú)特的經(jīng)驗(yàn)，適用于各型白癜風(fēng)，療效肯定[3]。白癜風(fēng)的治療以疏肝解郁、滋補(bǔ)肝腎、活血祛風(fēng)為主要法則，研究證實(shí)三白沖劑具有滋補(bǔ)肝腎、活血祛風(fēng)的作用，治療白癜風(fēng)療效佳[4]。有研究表明[5]，蘑菇酪氨酸酶活性和黑色素生成量與白癜風(fēng)患者的病情密切相關(guān)。本文通過探討三白沖劑治療白癜風(fēng)患者對蘑菇酪氨酸酶活性、黑色素生成量、臨床療效及皮膚新生片數(shù)的影響，以期為白癜風(fēng)患者的治療提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集山東省日照市皮膚病醫(yī)院2013年8月～2014年12月的確診為白癜風(fēng)的患者180例，年齡在20～60歲。按照隨機(jī)數(shù)字法將患者隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對照組。實(shí)驗(yàn)組90例，平均年齡(39.27±6.53)歲，男性42例，女性48例；病程1個(gè)月～30年，平均(7.56±1.06)年；病損共1308處。對照組90例，平均年齡(38.92±6.72)歲，男性43例，女性47例；病程1個(gè)月～30年，平均(7.83±1.14)年；病損共1285處。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①診斷根據(jù)《皮膚學(xué)》[6]關(guān)于白癜風(fēng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)：皮損成小大不等、形態(tài)各異的斑點(diǎn)或斑片，逐漸擴(kuò)大，邊界清楚，周邊色素常反見增加；②年齡在20～60歲之間；③治療前1個(gè)月內(nèi)未進(jìn)行系統(tǒng)治療，2周內(nèi)未應(yīng)用內(nèi)服和外用藥物治療，未用過糖皮質(zhì)激素和中藥治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有嚴(yán)重的肝功能、腎功能不全；②患者或家屬拒絕參與本實(shí)驗(yàn)；③妊娠或哺乳期婦女；④伴有心衰、、嚴(yán)重高血壓、呼吸衰竭及血液系統(tǒng)疾病等嚴(yán)重的原發(fā)疾??；⑤年齡小于20歲或大于60歲；⑥對紫外線或中藥過敏者。

1.2 治療方法 用藥前2組患者均停用一切中藥制劑2周，常規(guī)治療不變。予實(shí)驗(yàn)組患者三白沖劑(內(nèi)蒙古康恩貝藥業(yè)有限公司圣龍分公司，國藥準(zhǔn)字Z20050074，生產(chǎn)批號：20100428)，每次6 g，2次/天，飯后0.5 h溫服。同時(shí)予甲氧沙林片(遠(yuǎn)大醫(yī)藥(中國)有限公司，國藥準(zhǔn)字H42022361，生產(chǎn)批號：20100630)10 mg，1次/天口服，服藥后2 h進(jìn)行日光照射，聯(lián)合復(fù)方卡力孜然酊(新疆維阿堂制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字Z65020003，生產(chǎn)批號：20100519)及鹵米松(Halometasone Cream，注冊證號：HC20100038，生產(chǎn)批號：20101104)適量外用，連續(xù)治療2個(gè)月為一療程。對照組予甲氧沙林片10 mg，1次/天口服，服藥后2 h進(jìn)行日光照射，聯(lián)合復(fù)方卡力孜然酊及鹵米松適量外用，連續(xù)治療2個(gè)月為一療程。2組患者均連續(xù)治療3個(gè)療程。服藥期間詳細(xì)記錄服藥過程中出現(xiàn)的任何不良反應(yīng)。

1.3 觀察指標(biāo)及檢測方法 2組白癜風(fēng)患者均在治療前、治療結(jié)束后空腹采集4 mL肘靜脈血，裝入預(yù)先裝有EDTA的抗凝采血管中。將采血管按3000 r/min離心10 min，待離心結(jié)束后將上層血清裝入EP管中，放入-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?。以上均由本院檢驗(yàn)科專業(yè)人員負(fù)責(zé)操作。

1.3.1 2組患者血清中蘑菇酪氨酸酶活性的測定：采用蘑菇TYR多巴速率氧化法檢測患者血清中酪氨酸酶的活性(試劑盒由武漢博士的生物技術(shù)有限公司提供)。反應(yīng)混合物共2.0 mL，由1.8 mL、pH6.5、0.1 mol/L PBS+0.1 mL患者血清+0.1 mL蘑菇TYR(100 U)混合而成。在37 ℃環(huán)境中孵育10 min，然后加入0.1 mL 0.15%L-多巴反應(yīng)液，繼續(xù)孵育2 min，用酶標(biāo)儀475 nm處測定吸光度(A475 nm)。以不加患者血清的反應(yīng)混合物為正常對照。分別測定2組患者血清中酪氨酸酶的活性。按以下公式計(jì)算酶激活率：TYR激活率(%)=[(C-D)-(A-B)]/(A-B)×l00%。其中，A：未加中藥樣品但加酶的混合液所測的吸收度；B：未加中藥樣品和酶的混合液所測的吸收度：C：加中藥樣品和酶的混合液所測的吸光度；D：加中藥樣品但未加酶的混合液所測的吸光度。

1.3.2 2組患者血清中多巴色素自動(dòng)氧化生成黑素量的測定：先將0.1 mL蘑菇TYR(100 U)與1 mL 0.15%L-多巴反應(yīng)液混合，在37 ℃環(huán)境中孵育5 min。然后加1 mL血清，繼續(xù)孵育60 min。最后用0.2 mL 1 mol/L鹽酸終止反應(yīng)。將反應(yīng)混合物以3000 r/min離心15 min，棄去上清液，用6 mol/L鹽酸將沉淀物清洗1次，蒸餾水清洗2次。最后用3 mL 1 mol/L NaOH充分溶解離心團(tuán)塊，用酶標(biāo)儀400 nm處測定吸光度(A400 nm)。以不加中藥0.01 mol/LPBS(pH6.8)為正常對照，黑素生成上調(diào)率(%)=(A400 nm加藥組/A400 nm正常對照組)×100%。

1.3.3 臨床療效的觀察：顯效：白斑全部消失，恢復(fù)至正常膚色或白斑大部分消失或縮小，恢復(fù)面積≥皮損面積的50%；有效：白斑面積有所減少，恢復(fù)面積<皮損面積的50%；無效：白斑面積無消失甚至再生或面積增大?？傆行?(顯效例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)。服藥期間，患者每個(gè)療程復(fù)查1次，詳細(xì)記錄患者服藥期間出現(xiàn)的不良反應(yīng)和身上皮損的總塊數(shù)。

2 結(jié)果

2.1 2組患者血清中酪氨酸酶活性的比較 治療前2組患者血清中酪氨酸酶的活性相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后2組患者血清中酪氨酸酶的活性均比治療前升高(P<0.05)，且實(shí)驗(yàn)組患者血清中酪氨酸酶的活性高于對照組(t=13.47，P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清中酪氨酸酶活性的比較±s，%)Tab.1 Comparison of activity of tyrosinase in serum between two ±s，%)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 2組患者血清中黑素生成量的比較 治療前2組患者血清中黑素量生成相比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后2組患者血清中生成的黑素量均比治療前升高(P<0.05)，且實(shí)驗(yàn)組患者血清中生成的黑素量高于對照組(t=5.91，P<0.05)。見表2。

表2 2組患者血清中黑素生成量的比較±s)Tab.2 Comparison of amount of melanin in serum between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group before treatment ；#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.3 2組患者臨床療效的比較 治療3個(gè)療程后，實(shí)驗(yàn)組患者的總有效率為75.56%，對照組患者的總有效率為61.11%，實(shí)驗(yàn)組總有效率顯著高于對照組(χ2=4.34，P<0.05)。見表3。

表3 2組患者臨床療效的比較[n(%)]Tab.3 Comparison of clinical effect between two groups [n(%)]

#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.4 2組患者皮膚新生片數(shù)的比較 治療前2組患者的皮損片數(shù)相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各個(gè)療程治療結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)組患者皮膚新生片數(shù)顯著多于對照組(P<0.05)。見表4。

表4 2組患者皮膚新生片數(shù)的比較[n(%)]Tab.4 Comparison of the number of skin regeneration piece between two groups[n(%)]

3 討論

白癜風(fēng)可發(fā)病于任何部位，以易受摩擦或日光照射處皮膚為多，皮膚顏色越深，發(fā)病率越高。近年來，白癜風(fēng)在我國的發(fā)病率呈上升趨勢。大量的研究證實(shí)[7]，白癜風(fēng)對機(jī)體的組織器官不會(huì)造成危害，但嚴(yán)重影響人們的外觀，對人們的日常生活、交往、婚姻、心理等方面產(chǎn)生了較大的影響。白癜風(fēng)的發(fā)病機(jī)制尚不明確[8]，目前主要存在以下觀點(diǎn)：發(fā)病過程中，皮膚表面的黑素細(xì)胞凋亡，黑素產(chǎn)生減少或停止，從而導(dǎo)致皮膚色素脫失。此時(shí)白斑周圍的黑素細(xì)胞受到刺激，產(chǎn)生黑素增多，在適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)條件下，黑素合成的途經(jīng)再次激活，并向皮膚白斑處移動(dòng)，從而使白斑處重新出現(xiàn)色素沉著，恢復(fù)至正常膚色。因此，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)治療白癜風(fēng)，多是通過激活上述途徑中的某些環(huán)節(jié)。酪氨酸酶是皮膚黑素細(xì)胞產(chǎn)生黑素的主要限速酶，增加酪氨酸酶的活性，可促進(jìn)黑素細(xì)胞合成黑素增多，進(jìn)而加快皮膚白斑的色素沉著[9]。中醫(yī)治療白癜風(fēng)歷史悠久，具有獨(dú)特的優(yōu)勢，彌補(bǔ)單純西醫(yī)的不足。主要以滋補(bǔ)肝腎、疏肝解郁、調(diào)和氣血為主。三白沖劑組方以補(bǔ)骨脂、蒺藜、重樓、柴胡、紫草、白僵蠶、白薇、白芷、白藥子、山藥、降香、甘草為主。方中以白藥子、補(bǔ)骨脂、山藥滋補(bǔ)肝腎、活血祛風(fēng)，為君藥；白僵蠶、白芷、重樓、降香合用活血祛風(fēng)通絡(luò)，為臣藥；紫草、柴胡、蒺藜疏肝解郁、行氣活血為佐藥；甘草調(diào)和諸藥，為使藥。方中諸藥合用，共奏滋補(bǔ)肝腎、祛風(fēng)通絡(luò)、疏肝解郁、調(diào)和氣血之功效[10]。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，2組患者治療后血清中酪氨酸酶的活性及黑素生成量均比治療前升高(P<0.05)，說明三白沖劑和西藥均能增強(qiáng)酪氨酸酶的活性，增加黑素的生成量。但治療后實(shí)驗(yàn)組患者血清中酪氨酸酶的活性及黑素生成量均高于對照組，說明在西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)用三白沖劑治療效果更明顯。研究證實(shí)[11-12]，增強(qiáng)酪氨酸酶的活性，可加快黑素細(xì)胞合成黑素。正常人皮膚毛囊外根鞘部存在無功能黑素細(xì)胞(melanocyte，MC)，主要分布在毛囊中下部。白癜風(fēng)患者白斑表皮內(nèi)MC全部消失，毛囊球部和漏斗部的色素MC部分凋亡，但毛囊外根鞘部仍存在無功能MC，其與正常人的數(shù)量和分布相似。白癜風(fēng)患者病情好轉(zhuǎn)時(shí)，毛囊外根鞘部出現(xiàn)功能性MC，其分泌的黑素多于正常。多余的黑素從毛囊外根鞘部向白斑表皮移動(dòng)，移動(dòng)過程中，MC逐漸成熟增殖，待其移到表皮時(shí)，便以毛囊為中心，繼續(xù)向周圍擴(kuò)散，形成色素沉著。由此可見，在西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上聯(lián)用三白沖劑能夠有效升高白癜風(fēng)患者的酪氨酸酶的活性，促進(jìn)黑素生成量增多，加快皮膚色素的沉著，對白癜風(fēng)的臨床治療具有重要的意義。

有研究表明[13]，三白沖劑可以有效改善白癜風(fēng)患者的臨床癥狀，減少不良反應(yīng)，但相關(guān)研究較少。本研究結(jié)果顯示，三白沖劑聯(lián)合西藥治療的白癜風(fēng)患者臨床癥狀改善的總有效率明顯高于對照組，皮膚新生片數(shù)明顯高于對照組(P<0.05)。2組患者在實(shí)驗(yàn)過程中無人出現(xiàn)肝、腎功能及血、尿、便常規(guī)明顯異常，均未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)。白癜風(fēng)病機(jī)多為肝郁氣滯、肝腎不足、氣血失和，本實(shí)驗(yàn)采用三白沖劑以滋補(bǔ)肝腎、疏肝解郁、調(diào)和氣血，上調(diào)酪氨酸酶的活性，促進(jìn)黑素合成，從而促進(jìn)皮膚的色素沉著，加快皮膚新生。由此可見，三白沖劑治療白癜風(fēng)有效率高，臨床癥狀改善明顯，不良反應(yīng)少的優(yōu)點(diǎn)。

實(shí)驗(yàn)對180例白癜風(fēng)患者血清中的酪氨酸酶的活性、黑素生成量、臨床療效及皮膚新生皮數(shù)等情況進(jìn)行比較分析，證實(shí)了三白沖劑能夠上調(diào)酪氨酸酶的活性，促進(jìn)黑素的合成，臨床療效明顯、不良反應(yīng)少。因此，三白沖劑對治療白癜風(fēng)患者具有重要意義。下一步研究中將對其具體機(jī)制進(jìn)行探討，為本實(shí)驗(yàn)所反映的現(xiàn)象做出進(jìn)一步論證和分析。

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(編校：王冬梅)

Effect of Sanbai granules on patients with leucoderma

KONG Hong-mei1, LI Zong-zhi2

(1. Department of Pharmacy, Rizhao City Shandong Skin Disease Hospital, Rizhao 276800,China; 2. Department of Cosmetology, Rizhao City Shandong Skin Disease Hospital, Rizhao 276800, China)

ObjectiveTo investigate the effect of sanbai granules on the patients with leucoderma.Methods180 cases with leucoderma were selected and divided into two groups.90 cases in the control group were treated by Methoxsalen Tablets 10mg,1 times a day,2h sunlight after the medication,appropriate amount external of Compound Kaliziran tincture and Halometasone.90 cases in the experiment group were treated on the base of the control group with Sanbai granules.The activity of tyrosinase,amount of melanin in the serum,clinical effect and amount of skin regeneration between two groups were compared.ResultsCompared with the control group, the activity of tyrosinase and melanin in serum of the experiment group were higher(P<0.05),the clinical effect rate were higher(P<0.05),number of skin regeneration piece was higher(P<0.05).ConclusionSanbai granules can effectively improve the activity of tyrosinase and melanin in patients with leucoderma, and it has important significance for the treatment of leucoderma.

Sanbai granules; leucoderma; tyrosinase; melanin; clinical effect;number of skin regeneration piece

孔紅梅，女，本科，副主任藥師，研究方向：皮膚病性病用藥及不良反應(yīng)，E-mail： ttkdmei@163.com。

R828.5

A

1005-1678(2015)06-0077-03